乌扎拉根质量指标及片剂制备

1 2文献综述 41外来中药基本情况介绍 41.1外来中药的发展历史 41.2外来中药的发展现状 41.3外来中药的研究意义 52外来中药乌扎拉基本情况介绍及国内外研究现状 52.1乌扎拉的传统应用 52.2乌扎拉的产品开发应用现状 62.3化学成分 62.4药理活性与临床研究 62.5中药药性研究结论 73小结 7前言 9第一章乌扎拉根质量指标的初步研究 1仪器与材料 2方法与结果 2.1饮片性状 2.2显微鉴定 2.3水分检测 2.4总灰分检测 3小结 第二章乌扎拉根止泻片的制备工艺初步研究 1仪器与材料 2方法与结果 2.1提取工艺 2.2辅料选择 2.3成型工艺 3小结 第三章乌扎拉根止泻片的片剂质量检查 21仪器与材料 2方法与结果 2.1硬度检测 22.2片重差异检测 2.3脆碎度检测 2.4崩解时限检测 3小结 1总结 2讨论 错误!未定义书签。1AfricanHerbalPharmacopoeia),尽管其在欧洲已有成药开发，但国内尚未纳入究文献及2020版《中国药典》四部通则要求，开展了乌扎拉根饮片的质量标准研究及止泻片制备工艺的初步探索，旨在为引入我国石细胞等。理化检测结果显示，饮片水分含量平均为11.0%(≤12.0%),总灰分含量平均为5.2%(≤6.0%),符合《中国药典》要求，为其质量标准的建立提供在制剂工艺研究中，采用50%乙醇回流进行提取，提取液浓缩干燥制备干膏粉，平均干膏率为32.37%。采用湿法制粒压片法制备片剂。通过单因素实验优化处方，筛选得到处方为：糊精为稀释剂(药辅比1:1)、2%交联羧甲基纤维素钠(CCNa)为崩解剂、0.5%硬脂酸镁为润滑剂。制得的片剂成型检查显示硬度6.80kgf、片重差异±5%以内、脆碎度0.32%2theSouthAfricanHerbalPharmpharmaceuticalproductsinEuropmedicinalstandardsystem.Thisstudy,basedonthereseaintroducedtraditionalChinesemedicstandardsofUzararootslicesandpreliminarilyexploredthepreparationprocessofqualityresearchliterature,andthegeneralrequirementthequalitystandardstudyoftheslices,themorphologifInthepreparationprocessstudy,a50%ethanolrefluxextraccycles)wasemployed,acvariationwithin±5%,friabilit3meetingthestandardsoftheChinesePharmacopoeia.KEYWORDS:introducedtradition4文献综述外来中药乌扎拉基本情况及研究现状1.1外来中药的发展历史外来中药的引入最早可追溯至商周时期31,在汉代历代通过商贸、朝贡等形式输入的外来药材(如胡椒、丁香、阿魏等)在《神农展迎来了新机遇，砂仁、豆蔻、乳香等100多种外来中药被纳入《中国药典》和5统外来中药(如乳香、没药)扩展到新外来中药(如玛咖、紫锥菊),涵盖全球五大洲的180多个品种，研究成果逐渐投入实际应用，为中药大家庭增加新的成1.3外来中药的研究意义培和产品开发可形成新的产业链，促进经济发展，如云南辣木产业已初见成的药用价值，但由于现代科学研究较少，开发程度较低，其实际应用受到限制。2外来中药乌扎拉基本情况介绍及国内外研究现状托、斯威士兰和南非的大部分省份，适宜生长在海拔84至2000米的开阔草原、2.1乌扎拉的传统应用乌扎拉根传统医学用途81:腹泻，痢疾，腹痛，痛经，呕吐，感冒，发热，6水肿，消化不良，肠易激综合征，癔病，头痛，溃疡等。主要用于胃肠道疾2.2乌扎拉的产品开发应用现状中排名第51位，有着悠久的商业使用历史。早在上世纪[101,南非比勒陀利亚附近就已经进行了这种植物的商业种植，其提取物于1909年被引入德国医药市从乌扎拉中已分离和鉴定出至少18种化合物。现代药理学研究11表明，乌扎拉根的主要药理活性成分包括乌扎拉苷uzarin(5.6%)和xysmalorin(1.5%),2.4药理活性与临床研究在Schulzke等人[12]开展的HT-29/B6细胞实验中，乌扎拉在60分钟内了福尔可林及霍乱毒素诱导的肠道分泌细胞(ISC),使活性氯离子分泌减少，扎拉通过抑制活性氯离子分泌发挥抗腹泻作用。这种抑制主要是由于对Na/K-儿腹泻[13作用显著,Uzara®Saft也被批准用于婴幼儿141,因此可用于儿童腹泻72.4.3抗痛经作用性痛经的交叉试验研究[16表明乌扎拉在治疗原发性痛经方面可能与布洛芬一样有效，但副作用较小，具体结论还需通过设计合理且样关于乌扎拉相对已知化疗药物紫杉醇对结直肠癌的潜在活性实验[17使用先进的三维(3D)海藻酸钠包裹的LS180结直肠癌功能性类球模型评估细胞毒性乌扎拉作为南非传统药用植物，主要活性成分为乌扎拉苷uzarin和xysmalorin等甾体苷类化合物，具有抗腹89乌扎拉(Xysmalobiumundulatum)为夹竹桃科止泻萝摩，英文名为Uzara,及溃烂的伤口。现代药理学研究表明，乌扎拉根的主要药理活性成分为甾体苷、尽管该药材已在德国等欧洲国家开发为抗腹泻成药(如Uzara®),但目前药的研究方法，参照2020年版《中国药典》及《南非草药药典》标准，建立乌第一章乌扎拉根质量指标的初步研究1仪器与材料仪器：多功能粉碎机(型号800C,东莞市房太电器有限公司);显微镜(NiconECLIPSEEi);酒精灯(长沙湘玻科学仪器有限公司);胶头滴管；25mm×76mm载玻片、20mm×20mm盖玻片(盐城市羽帆实验器材有限公司);扁形称量瓶；真空干燥箱(型号DZ-2BCIV,天津市泰斯特仪器有限公司);干燥器；电子天平(型号BSA224S,赛多利斯科学仪器有限公司);坩埚；坩埚钳；马弗炉(型号TSX1200,西尼特科技有限公司)。材料：乌扎拉根饮片(VANDANGROUP);水合氯醛(西安天茂宝鼎生物科技有限公司);甘油(上海源叶生物科技有限公司);95%酒精；蒸馏水。2方法与结果参照《南非草药药典》及收集的实际饮片状况(见图1),将性状描述为：图1乌扎拉根饮片参照《中国药典》(2020版)四部通则2001显微鉴定法用粉碎机将乌扎拉细粉样本有效融入水合氯醛溶液中，且颜色由浅变透，冷却后再滴加2滴50%甘(1)淀粉粒(2)草酸钙簇晶图3草酸钙簇晶的显微观察图(×400)(3)石细胞图4石细胞的显微观察图(×400)(4)导管图5导管的显微观察图(×400)(5)木栓细胞图6木栓细胞的显微观察图(×400)由于乌扎拉根中不含挥发性成分，因此参照《中国药典》(2020年版)四部通则0832“水分测定法”第二法进行测定。机中粉碎，过筛得到直径不超过3mm的碎片，铺在扁形称量瓶中，厚度不超过5mm,精密称定，开启瓶盖在105℃的电热恒温鼓风干燥箱中干燥5h,将瓶盖105℃的电热恒温鼓风干燥箱中干燥1h,放冷，称重，至连续两次称重的差异(%)。平行测定三次。表1乌扎拉根饮片水分检测实验结果组号减失重量(g)含水量(%)123如表1所示，三次实验测得的含水量分别为10.7%、10.9%和11.4%,平均含水量为11.0%。因此，暂定乌扎拉根饮片的含水量不得超过12.0%。2.4总灰分检测参照《中国药典》(2020年版)四部通则2302“灰分测定法”,将乌扎拉片粉末2-3g,置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量(准确至0.01g),缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500-600℃,使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算乌扎拉根饮片中总灰分的含量(%)。表2乌扎拉根饮片总灰分检测实验结果组号药品质量(g)总灰分含量123如表2所示，三次实验测得的总灰分含量分别为4.9%、5.5%、5.3%,平均总灰分含量为5.2%。因此，暂定乌扎拉根饮片总灰分含量不得超过6.0%。(1)对外来中药乌扎拉根的饮片进行外观鉴定，将性状描述为：根呈长圆(2)对乌扎拉根饮片粉末进行显微鉴定，观察到淀粉粒、石细胞、草酸钙(3)对乌扎拉根饮片进行水分灰分含量的测定，测得乌扎拉根饮片水分含量在10.7%-11.4%间(平均值11%),总灰分含量在4.9%-5.5%间(平均值5.2%)。第二章乌扎拉根止泻片的制备工艺初步研究1仪器与材料仪器：数显电热套(型号ZNHW,上海力展邦西仪器科技有限公司);旋转蒸发仪(型号RE-52A,上海亚荣生化仪器厂);真空干燥箱(型号DZ-28CIV,天津市泰斯特仪器有限公司);多功能粉碎机(型号800C,东莞市房太电器有限公司);旋转式压片机(型号ZP10A,北京新龙立智能科技有限公司);硬度仪(型号YD-20KZ,天津市天大天发科技有限公司);电子天平(型号BSA224S,赛多利斯科学仪器有限公司);崩解时限测试仪(型号BJ-2,天津市国铭医药设备有限公司);脆碎度检查仪(型号FT-2000AF,天津市天大天发材料：乌扎拉根饮片；50%乙醇溶液；20目、60目筛网。2方法与结果参考德国乌扎拉根产品的制备[181,采用50%乙醇进行提用十倍量的50%乙醇加热回流60min,滤过，收集滤液，滤渣用八倍量50%乙醇再加热回流60min,再重复提取滤渣1次，合并3次滤液。滤液减压浓缩得清膏，2.1.2实验结果2.2辅料选择参数，在10kN压力下压制片剂，以制得片剂的成型状况、片重差异、硬度、脆碎度、崩解时限等为指标(检测方法如下),筛选稀释剂、润湿剂、崩解剂、润(1)硬度取制得的片剂4片，分别放入硬度仪中，检测硬度大小，计算平均值。(2)片重差异取制得的片剂20片，参照《中国药典》(2020年版)四部通则0101“片剂”项下重量差异检查法检测，重量限度为±5%,超出重量限度的不得多于两片，超(3)脆碎度取制得的片剂若干片使总重约为6.5g,精密称重得m,参照《中国药典》 (2020年版)四部通则0923“片剂脆碎度检查法”进行测定，从脆碎度检查仪中取出后，吹去片剂表面粉末，再进行精密称重得m₂。计算脆碎度为减失重量 (m₁-m₂)与m₁之比，不得超过1%,且不得检出裂片、龟裂片及粉碎片。(4)崩解时限取制得的片剂6片，参照《中国药典》(2020年版)四部通则0921“崩解时限检查法”,记录各片完全崩解的时间，中药浸膏片崩解时限不得超过1h。(1)稀释剂种类筛选选择乳糖、糊精两种稀释剂进行比较。按原料：稀释剂=1:1称取干膏粉与糊精、乳糖，并称取重量2%的交联羧甲基纤维素钠(CCNa)将三者过筛混匀，用适量70%乙醇做润湿剂，制软材，挤压制粒，干燥，整粒，加入0.5%硬脂酸标准进行比较，判断是否合格，结果见表3。表3稀释剂种类筛选外观光洁、完整、均匀平均硬度(kgf)平均片重(g)片重差异(≤5%)脆碎度(≤1%)崩解时限(min)由该表结果可得出，在原料：辅料=1:1的情况下，以乳糖为稀释剂制备的(3)崩解剂种类筛选解剂进行比较。先按原料：糊精=1:1称取干膏粉与糊精，并称取重量2%的崩解剂，将三者过筛混匀，用适量70%乙醇做润湿剂，制软材，挤压制粒，干燥，整粒，加入0.5%硬脂酸镁，混匀，压片，对获得的两份成品并与《中国药典》对应标准进行比较，判断是否合格，结果见表4。外观光洁、完整、均匀光洁、完整、均匀平均硬度(kgf)平均片重(g)片重差异(≤5%)脆碎度(≤1%)崩解时限(min)由该表结果可得知，在糊精作为稀释剂且原料：辅料=1:1时，以CCNa和PVPP作为崩解剂制备得到的片剂均符合药典标准。结合成本考虑，选择CCNa(4)润滑剂用量筛选选择0.5%硬脂酸镁和1%硬脂酸镁作为润滑剂进行比较。先按原料：糊精=1:1称取干膏粉与糊精，并称取重量2%的CCNa,将三者过筛混匀，用适量70%乙醇做润湿剂，制软材，挤压制粒，干燥，整粒，分为两份，分别加入0.5%硬脂酸镁和1%硬脂酸镁，混匀，压片，对获得的两份成品进行片剂质量检查，并与《中国药典》对应标准进行比较，判断是否合格，结果见表5。表5润滑剂用量筛选1%硬脂酸镁外观光洁、完整、均匀光洁、完整、均匀平均硬度(kgf)平均片重(g)片重差异(≤5%)4.1%脆碎度(≤1%)崩解时限(min)由该表结果可得知，在糊精作为稀释剂且原料：辅料=1:1,以CCNa作为崩解剂时，润滑剂硬脂酸镁的用量为0.5%和1%制备得到的片剂均符合药典标准。考虑到相同条件下片剂中添加的辅料用量宜少，因此选择添加0.5%用量的及润滑剂用量，最终确定处方为：糊精作为稀释剂，药辅比1:1;CCNa作为崩解剂，用量2%;70%乙醇作为润湿剂；硬脂酸镁作为润滑剂，用量0.5%。2.3成型工艺(1)工艺流程图(见图7)。乌扎拉根饮片100g50%乙醇加热回流60min滤渣50%乙醇回流提取滤液合并滤液减压浓缩稠浸膏真空烘箱干燥粉碎过筛干膏粉稀释剂崩解剂过60目筛润滑剂过60目筛真空烘箱干燥干燥颗粒成品(2)原料前处理(3)提取浓缩取适量干燥的乌扎拉根饮片，使用95%乙醇配制50%乙醇水溶液，用十倍量50%乙醇80℃加热回流60min,滤过，收集滤液，滤渣用八倍量50%乙醇再加热回流60min,再重复提取滤渣1次，合并3次滤液。滤液减压浓缩得清膏，再(4)制软材将干浸膏粉碎后，过60目筛，得干膏粉细粉。同时取适量稀释剂糊精、崩解剂CCNa、润滑剂硬脂酸镁分别过60目筛备用。将干膏粉与等量糊精、2%CCNa混合均匀，加入70%乙醇溶液制软材，以达(5)制粒制得的软材使用20目筛网进行手搓制粒，得到湿颗粒。(6)整粒将湿颗粒置于真空干燥箱中进行干燥，得到干燥颗粒，整粒后加入0.5%硬(7)压片将制得的颗粒投入旋转式压片机中，10kN压力下压片，制得成品。成品展示(见图8)。图8乌扎拉根止泻片成品本品色泽为浅黄棕色，有苦味；形态完整光洁，大小基本一致，直径约本章实验根据相关文献确定了乌扎拉根有效物质的提取工艺，即使用50%精=1:1混合，加入2%CCNa,过筛混匀，以70%乙醇溶液作为润湿剂制软材，机参数，在10kN的压力下压制成片。根据实验方案制备出了实验室样品，并对1仪器与材料仪器：硬度仪(型号YD-20KZ,天津市天大天发科技有限公司);电子天平 (型号BSA224S,赛多利斯科学仪器有限公司);崩解时限测试仪(型号BJ-2,天津市国铭医药设备有限公司);脆碎度检查仪(型号FT-2000AF,天津市天大天发科技有限公司)。材料：乌扎拉根止泻片(实验室自制)。2方法与结果同第二章2.2.1实验方法(1)硬度。测得四片硬度分别为7.00kgf,6.47kgf,6.69kgf,7.07kgf,平均硬度为6.80同第二章2.2.1实验方法(2)片重差异。结果见表6,片重差异合格。表6片重差异检测实验结果片重(g)0同第二章2.2.1实验方法(3)脆碎度。测得m₁=6.782g,m2=6.760g,计算得脆碎度为0.32%,符合标准。2.4崩解时限检测同第二章2.2.1实验方法(4)崩解时限。成品乌扎拉根止泻片在12min40s内全部崩解，崩本章实验以《中国药典》(2020年版)为参照，对实验室制备的成品乌扎拉膏粉：糊精=1:1,含2%CCNa及0.5%硬脂酸镁)及湿法制粒工艺具有良好可草酸钙簇晶、石细胞等特征成分。理化检测结果显示，水分含量平均为11.0% (≤12.0%),总灰分含量平均为5.2%(≤6.0%),符合《中国药典》要求。这些基于国内外文献确定了采用50%乙醇回流进行提取，平均干膏率为32.37%。在处方筛选中，进行单因素实验对比，发现糊精作为稀释剂(药辅比1:1)可显著改善片重差异与硬度，2%交联羧甲基纤维素钠(CCNa)与0.5%硬脂酸镁的组本研究开发设计的乌扎拉根止泻片对加强乌扎拉根在中国的开发应用具有2讨论GMP要求的生产流程，早日产出合格的产品，以切实地推动乌扎拉根在我国的需进行加速试验(高温、高湿、强光)与长期留样试验等稳定性考察。参考文献[2]王林元.外来中药的发展及在中药学科建设中的地位和作用[J].北京中医药大[7]VermaakI,EnslinGM,IdowuTofanantidiarrhoealtraditionalmedicine[J].JournalofEthnopharmacology,2014,[8]BrendlerT,CameronS,KuchtaK.Uzara(X