乌腺金丝桃提取物对肉鸡空肠抗氧化功能影响的研究

症等方面有良好的应用前景。空肠是肉鸡消化吸收的关键部位，加HYG可影响空肠抗氧化功能，但具有剂量作用。其中，在21日龄时添加400mg/kg与800mg/kgHYG的组GSH-Px活性显著提升；42日龄时，添加HYG后MDA含量降低改善了42日龄肉鸡空肠的氧化应激状态；在应激后添加800mg/kgHYG能够显著降低42日龄肉鸡的CD,并提高VH/CD值。综上，本研究发现日粮中添加HYG对肉鸡空肠抗氧关键词：乌腺金丝桃；提取物；肉鸡；空肠；抗氧化功能StudyontheeffectofextractsofHypericumattenuatumChoisyontheantioxidantfunctionofthejejunumofbroilerchickensdiabetestreatment,andidiseaseresistanceofbroilerchickens.Inthisexperiment,differentdosesofHypericumtoexploretheeffectofaddingHYGtothedietontheantioxidantfunctionofthejejunumofbroilerchickens.TheresultsshowedthataddingHYGtothfunctionofthejejunum,buttherewasadosageeffect.Amongsignificantlyincreased;at42daysofage,afteraddingwhichimprovedtheoxidativestressstateofthejejunumofbroilerchickensat42daysofage;daysofageandincreasetheVH/CDvalue.Inconclusion,thisstudyKEYWORDS:HypericumattenuatumChoisy;extra英文名称中文名称乌腺金丝桃提取物脂多糖番石榴植物提取物八星醋栗植物提取物丙二醛TotalAntioxidantC总抗氧化能力绒毛高度隐窝深度绒毛高度与隐窝深度比值身体体重增加血红素加氧酶-1NAD(P)H:quinoneoxidoreduct1醌氧化还原酶1NuclearfactorE2-relatedfact核因子E2相关因子2 11.1乌腺金丝桃的研究进展 1.2植物提取物对肠道健康作用 1.3植物提取物的抗氧化功能 1.4空肠抗氧化功能对肉鸡的影响 21.5研究目的与意义 2 2.1试验仪器及试剂 2.2提取物制备 2.3试验设计 2.4饲养管理及试验饲粮组成 32.5样品采集 42.6试验指标测定 52.7数据处理 5 63.1添加HYG对肉鸡空肠抗氧化指标的影响 63.1.1添加HYG对肉鸡空肠CAT活性影响 63.1.2添加HYG对肉鸡空肠GSH活性影响 63.1.3添加HYG对肉鸡空肠MDA含量影响 73.1.4添加HYG对肉鸡空肠SOD活性影响 3.1.5添加HYG对肉鸡空肠T-AOC指数影响 3.2添加HYG对肉鸡空肠形态结构的影响 1第一章前言草原区山地、林缘、灌丛、草甸草原，分布于中国、日本、肠道是重要的消化和免疫器官，不仅是动物消化吸收蛋白质、的最为关键的场所，还是抵御外界病菌、毒素等入侵的重要保护屏蛋白酶等消化酶活性[8,以加速营养物质分解。除此之外，植物提取物还可调节肠道菌群平衡91,增强肠道微生物的恢复能力，维持肠道内环境稳定，从多个方面守护肠道健康，李硕[10]等研究表明添加了中草药植物提取物化合物的生长和饲料利用率、免疫血液学反应和对嗜水曲霉的抗病性空肠VH/CD以及血清中SOD活性，还显著降低了FCR、肠道病变评分和回肠中产气荚膜梭菌的数量。试验表明补充黄芩和金黄叶草提取物可通过改善肠在动物机体的生命活动中，当产生过量自由基时，自由基就会生物大分子，使得细胞功能受损，从而导致动物的生长发育变得迟缓、繁殖能力下降等生清除有害自由基，明显增强机体抗氧化酶系统的活性，有效预防张晓华等17试验表明在肉鸡饲料中添加450mg/kg熊果酸可以提高血清和空肠抗氧2化能力，减少空肠和回肠炎症，改善空肠形态，调节盲肠菌群结构组成，促进肉鸡生长。赵向民等[18研究结果表明，日粮中添加3%的当归可提高肉鸡的生长指标并加强肠道屏障影响，百香果皮和酶解百香果皮可在一定程度上改善三黄肉鸡的盲肠感染(金黄色葡萄球菌)较少，并且使用450mg/kg饮食水平的柳树除了可以改善肉等研究发现，在日粮中添加鼠李糖脂可改善肉鸡的生长性能鸡的生产性能，它提高了饲料利用率、乳房肌肉产量和氧化稳定性空肠是肉鸡消化吸收的关键部位，它的健康能和抗病能力。空肠一旦出现健康问题，就功能，威胁肉鸡健康，使用乌腺金丝桃提取物则可及时这些自由基会攻击细胞膜、细胞器和生物大分子，损坏细胞的的活性成分，做到高效清除有害自由基，增强机体抗氧化酶活性，阶段。本试验旨在深入研究乌腺金丝桃提取物对肉鸡空肠抗氧化功能的影响，希望能为乌腺金丝桃资源在畜禽生产中的开发利用提供多种理论依据。殖应用中的价值，能够为吉林省金丝桃属植物，尤其是濒危的32.1试验仪器及试剂乌腺金丝桃地上部分所制成的供试品粉末、实验肉鸡空肠样本(1日龄肉鸡购自吉林德大有限公司)、乙醇、脂多糖(LPS)、LC-FG系列冷冻研磨仪(上海力辰邦西仪器科技有限公司)、酶标仪(上海科华实验系列有限公司)、HH.CP-7型二氧化碳细胞培养箱 (上海博讯实业有限公司医疗设备厂)、超净工作台、微量离心机(EppendorfCentrifuge5427R,Hamburg,Germany)、低温高速离心机(新加坡ESCO)、超微量分光光度计 (TIANGENOSE-260-01,北京，中国)。采集地上5cm处的乌腺金丝桃植株部分，用蒸馏水洗净阴干后移至50℃恒温干燥箱烘干至恒重，烘干后充分研磨过筛(60目),制成供试品粉末。在50ml离心管中加入1.0g乌腺金丝桃试验样品的粉末和62%的乙醇(液料比为37:1g·ml-¹)混匀。将离心管至于KQ-100A型超声波清洗机中，超声功率为500W,60℃超声辅助提取32min。待提取液冷却离心10min(4000r/min)取上清液，并将其放至于60℃水浴条件下旋转蒸发浓缩至5ml,本试验所有的试验程序均获得了吉林农业大学动物伦理委良好，体重相近，体况相似的240羽平均体重为45.44g的1日龄AA白羽肉鸡(购自吉林德大有限公司),随机分成5组，每组6重复，每个重复8羽，并且每重复组肉鸡雌雄各半。采用单因素随机区组设计，其中CN为空白对照组，饲喂基础日粮；PC组为LPS应激模型组，饲喂基础日粮；HYG1为试验组1,饲喂基础日粮+400mg/kgHYE;HYG2为试验组2,饲喂基础日粮+800mg/kgHYE;HYG3为试验组3,饲喂基础日粮+1200mg/kgHYE。在第21和42日龄屠宰取样前12h,各试验组和PC组分别腹腔注射5ml/kg的LPS (LPS用生理盐水配制成浓度为200μg/ml的溶液),CN组注射等量的生理盐水。试验使用5组阶梯式笼饲。进行试验之前清洗、消毒鸡舍及器具，检查试验设备和试验饲料。整个试验周期肉鸡可自由采食和饮水(烧开的白开水，温度22±1℃),每天上午8:30和17:30各喂料一次，24h饮水不限。试验第一周鸡舍温度保持在33℃,之后每周下降3℃直至鸡舍温度达到22±1℃左右，维持该温度直至试验结束。鸡舍相对湿度控制在60-70%,并保持一定的光照。试验期间每天观察鸡群的采食量、饮水量、死亡个数及精神状态，按时清理鸡舍，保持鸡舍干净卫生，室内采用机械通风，维持鸡舍良好通风换气，4并结合实际生产配置，日粮配方及营养水平见表1。试验分两个阶段饲养，第一阶段1-21日，第二阶段22-42日。表1试验日粮组成及营养水平(风干基础)Table1Compositionandnutritionallevelofex1～21日龄原料玉米小麦麸豆粕豆油鱼粉营养水平**代谢能粗蛋白质钙蛋氨酸注：*示预混料为每千克词粮提：VA3250IU,VD31010IU,VE7VB11mg,VB22.500mg,VB61200mg,VB120.009mg,烟酸10mg,D-泛酸钙5mg,分别在第21和42日龄从每试验组中挑选体重相近，健康相似的4羽肉鸡进行颈部放血致死，采集血样，并在采集前空腹12小时。采集相同部位的空肠样本5g置于液氮中速5分别在第21天和42天前一晚20:00禁饲(饮水不限),12h后从每个重复组随机抽经滤纸吸去表面水分，使用分析天平称量重量。根据公式2.1计算各试验组空肠指数。空肠指数=空肠重/活体重×100%认为差异具有统计学显著性，所有数据均以平均值±标准差表示。使用Origin2023进行6第三章结果与分析过氧化氢酶活性过氧化氢酶活性对42日龄肉鸡的CAT活性无显著作用。7谷胱甘肽过氧化物酶活性谷胱甘肽过氧化物酶活性图2空肠GSH活性测定Note:Differentlowercaseletters(a,b)denotesignificantdifferenc0.05).由图2可知,21日龄时,HYG1组和HYG2组肉鸡空肠GSH-Px显著高于CN组和作用,增强了21日龄肉鸡空肠的抗氧化能力。而HYG3组与CN组、PC组无显著差异 (P>0.05),表明在21日龄时,该组添加HYG对肉鸡空肠GSH-Px活性无显著影响。(P>0.05),表明日粮中添加HYG对42日龄肉鸡空肠GSH-Px活性无显著作用,即从该酶活性指标来看,日粮中添加HYG不影响42日龄肉鸡空肠相关抗氧化机能。3.1.3添加HYG对肉鸡空肠MDA含量影响8丙丙二醛含量0.05),whiledifferentletter(A、B)in由图3可知,试验21d,添加HYG的组与CN组、PC组的肉鸡空明日粮中添加HYG显著降低42日龄肉鸡空肠的MDA含量,即从MDA含量指标来看,日粮中添加HYG影响了42日龄肉鸡空肠的氧化应激状态。9超氧化物歧化酶活性超氧化物歧化酶活性Note:Differentlowercaseletters(a,b,c,d,etc.)indicatesignifi<0.05),anddifferentlowercaseletters(A,B)0.05).由图4可知,试验21d,HYG组肉鸡空肠SOD活性与CN组、PC组不同,差异显著活性的影响在不同处理下有差异,从SOD活性指标来看,部分处理组(HYG1组、HYG2组)添加HYG会产生显著影响,而HYG3组添加HYG不影响42日龄肉鸡空肠相关抗氧总抗氧化能力总抗氧化能力处理组Note:Differentlowercaseletters(a,b,c,d,etc.)indicatesignifican(P<0.05),anddifferen0.05).组之间的T-AOC活性差异显著(P<0.05)。即从T-AOC指标来看,日粮中添加不同剂量HYG对42日龄肉鸡空肠相关抗氧化机能产生不同影响。中添加HYG会导致肉鸡肠道形态发生变化。由表2可知,21日龄肉鸡,与CN组相比,MmFigure6.effectsofH第四章结论与展望4.1结论本研究发现日粮中添加HYG对肉鸡空肠抗氧化指标和发育指数在不同日龄呈现出不同的影响效果。相关研究发现,在日粮中添加艾蒿水提取物后肉鸡在21日龄时回肠T-AOC (P>0.05),即HYG不影响肉鸡相关抗氧化生理机能;添加HYG可以显著提高21日龄发现添加HYG可以显著降低42日龄肉鸡MDA含量影响其空肠的氧化应激状态;21日龄度HYG;有研究发现,在饲粮中添加混合植物提取物可增加绒毛长度,降低十二指肠隐窝在后续的研究中,可开展系统设计梯度化剂量试验,探究不同日龄阶段肉鸡日粮中HYG添加水平与空肠抗氧化指标、发育指数的剂量效应关系,实现空肠抗氧化能力与组织发育的精准调控;还可研究HYG与其他功能性添加剂(如益生菌、酶制剂)或植物提取物(如精油、黄酮类物质)的联合应用,探索其联合使用时对肉鸡空肠健康的协同作用,同时在肉鸡养殖生产中,注意合理应用HYG并制定科学的饲养策略,如此有利于提高饲料利用率,降低疾病发生的风险,增加养殖生产的经济效益;利用HYG等植物提取物天然、安全的特点,可以进一步推广其在绿色肉鸡养殖中的应用,可以减少抗生素等各种药物的使用,确保了家禽产品的绿色、安全,更好的满足消费者的需求,推动肉鸡养殖[5]Du-XinJin,Jun-FangHe,Xue-GangLuo,Tong-CunZhang.Hypogutmicrobiota[J].JournalofFunctionalFoods,2019,52:479-491.[7]M.F,D.I,A.T.Y.K,etal.Effintestinalmorphology,caecalmicroflora,andgutbarriersgeneexpressio[8]ChauhanS,ThayesC,AliB,etal.EvaluationofHimalayannettle(Urticaardens)extractmea[9]MengjunWu,MengPeng,JiajiaZang,etal.Phloretinsupplementationamelioratesintestbroilerswithnecroticenteritisbyalleviatingiintestinalmorphology,nutrientdigestibility,andimmunityofweanedpiglets[J].CanadianJourAnimalScience,2023,performance,antioxidantcapacity,andintestinalbarrierofyellow-featherbroilerchickensagainst[15]TungmunnithumD,ThongboonyouA,CompoundsfromMedicinalPlantsforPharmaceutical2018;5(3):93.[16]DiSun,NanyangZeng,YingjiaPan,etal.EffectsofArtemisiaargyigrowthperformance,musclequality,intestinalmicrobial,andmetabolomicsofc[17]ZhangX,LiX,YinY,etal.Effectsofursolicacidongrowthperformance,serumbiochemistry,