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C1qSRSR细胞经典途径溶细胞第十八章（二）补体的检测

出境SRBCSRBCSRBCC1-C9一、CP-CH50实验原理经典途径Ag：绵羊红细胞（sheepredbloodcell,SRBC）Ab：抗绵羊红细胞抗体（溶血素）（Ab）（Ag）当溶血素和SRBC浓度恒定时，在一定反应时间内，溶血程度与补体含量及活性成正相关掌握CH50曲线溶血程度与补体含量的关系0%80%70%60%50%40%30%20%10%100%90%4ml3ml2ml1ml溶血百分率取50%溶血作为判断终点CP-CH50实验原理:绵羊红细胞（

SRBC

）与相应的抗体（溶血素）结合后，启动补体经典激活途径，引起SRBC发生溶血。在一个适当的、稳定的反应系统中，溶血的程度与补体活性呈正相关，呈一特殊的S形曲线。在50％溶血上下时曲线最陡，对补体量的变化最敏感。故采用50％溶血作为终点指标，这一方法称为补体50％溶血实验，简称为CP-CH50。掌握1.绵羊红细胞浓度的调整（2％－5％）2.溶血素滴定（2U）3.稀释缓冲液（PH7.2-7.4；Ca2+、Mg2+；PBS或巴比妥缓冲液）4.50%溶血标准管二、CH50测定方法熟悉（一）实验前准备取10只试管，分别编号，按照下表加入各试剂试管号BBS1:20稀释血清2％SRBC2U溶血素补体溶血活性123456789101.401.351.301.251.201.151.101.051.001.500.100.150.200.250.300.350.400.450.500.000.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5置37℃水浴30min2001331008066.657.15044.440阴性对照-（二）实验步骤2500转/min，5min离心CH50(U/ml)=1/血清用量×稀释倍数总补体活性参考范围：50-100U/ml（三）结果计算OD值最接近标准管1.方法评价CP-CH50试验测定经典途径总补体溶血活性，所反应的是补体9种成分（C1－C9）的综合水平；方法简便、快速，但敏感性、精密度较低；只能半定量影响因素多三、方法评价与临床意义熟悉2.临床意义：参考范围为50～100U/mlCH50增高见于：急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤、心肌梗塞、妊娠、糖尿病、甲状腺炎、大叶性肺炎等；CH50降低见于：自身免疫病：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和强直性脊柱炎、急性肾小球肾炎等。细菌感染，尤其是G-感染时

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