广西钦州市第四中学2026春季学期高二年级5月份考试生物试卷（含答案）

广西钦州市第四中学2026春季学期高二年级5月份考试生物试卷全卷满分100分，考试用时75分钟一、选择题（本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分;第13~16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）1．下列相关实验的叙述错误的是（）A．溶解粗提取的DNA加入二苯胺试剂沸水浴，溶液呈蓝色B．用95%的冷酒精析出DNA，溶解蛋白质C．PCR是酶促反应，需加入耐高温DNA连接酶D．通过引物的设计可以做到选择性PCR扩增DNA片段2．为解决北方低温污水处理问题，科研工作者以冬季稳定运行的污水处理厂再生污泥为原料，筛选出优势耐低温硝化菌株并进行16SrDNA鉴定。其技术路线如下，以下分析中错误的是（）注：16SrDNA鉴定是用于细菌分类鉴定的生物学技术，如全序列99%~100%相似性的细菌为同种A．培养基中的碳氮比可反映优势耐低温菌株降解污水中氨氮的能力B．耐低温硝化菌株的分离与纯化可采用稀释涂布平板法和平板划线法C．通过PCR扩增16SrDNA后比较凝胶电泳DNA条带可判断上述菌株是否同菌属D．控制变量法可进一步探究优势耐低温硝化微生物在不同条件下生长和硝化特性3．下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（

）A．琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖熔化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均B．DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解C．PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Ca2+用于激活DNA聚合酶D．凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置4．下列与生物学实验相关的叙述中，合理的是（）A．制作果酒先将葡萄去除枝梗和腐烂的籽粒再用清水冲洗B．“DNA粗提取”时可能两次用到离心的方法，第一次取上清液，第二次取沉淀物C．鉴定DNA时将DNA直接溶于二苯胺试剂，沸水浴后冷却观察D．将扩增得到的PCR产物与电泳缓冲液混合后注入加样孔5．基因工程探索历程中，有些实验为基因工程理论的建立提供了启示：DNA可以在不同生物之间转移。下列科学研究中，提供这一启示的是（

）A．1944年艾弗里等人进行的肺炎链球菌转化实验B．1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构C．1972年伯格首先在体外进行了DNA改造的研究D．1985年穆里斯等人发明PCR技术获取目的基因6．在基因工程操作中，科研人员利用两种限制酶（R1和R2）处理基因载体，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所示。下列说法错误的是（）A．两种限制酶在载体上识别的序列不相同B．两种限制酶在载体上可能各有一个酶切位点C．限制酶R1与R2的切割位点最短相距约为200bpD．DNA在凝胶中迁移的速率与DNA构象无关7．PCR技术在科研实践中有着广泛的应用。下列关于PCR技术的叙述，错误的是（

）A．能在体外对特定基因快速扩增B．需要在一定的缓冲液中才能进行C．利用DNA的热变性原理解旋D．耐高温的DNA聚合酶在复性过程起作用8．“章姬”草莓因口感香甜广受市场欢迎，但长期无性繁殖导致病毒病频发，果实品质和产量逐年下降。如图是育种工作者培育脱毒草莓和转抗病毒基因草莓的技术路线。下列叙述正确的是（）A．方法一中甲常选用成熟叶片组织，因其细胞体积大、易操作且全能性高B．方法一获得的脱毒苗通过自交产生的后代也均为无病毒植株C．方法二中②过程需构建基因表达载体以保证目的基因正常表达D．方法二中③过程需在培养基中加入病毒以筛选抗病毒草莓植株9．获取目的基因的方法有多种，科学家从已分化的细胞中提取mRNA进行逆转录获得cDNA（互补DNA）后，再对cDNA进行PCR扩增，可利用此技术获取大量目的基因，具体过程如图所示。下列叙述正确的是（）A．将该技术获得的cDNA直接导入原来的细胞可增加相应蛋白质的含量B．引物序列越短，越有利于其与目的基因的模板链结合以获得目标DNAC．过程②需要加入缓冲液、原料、DNA模板、耐高温的DNA聚合酶和引物A、引物B等D．过程②需要加入解旋酶，使mRNA-cDNA杂交链分散开形成单链结构10．中重度盐碱地逆境胁迫条件下，科研人员利用根瘤农杆菌介导法将水稻Leap启动子（一种强启动子）调控的SNAC1基因导入早粳稻中，成功培育了SNAC1基因耐盐碱水稻。转基因耐盐碱候选品种呈现SNAC1基因超强表达，产品性状及产量明显优于普通水稻，其培育过程如下图所示。下列叙述错误的是（）A．在提取SNAC1基因的过程中加入体积分数为95%的冷酒精是为了析出DNAB．SNAC1基因以B链为转录模板链C．为使SNAC1基因在普通水稻植株中超量表达，应选用限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ切割图中的Ti质粒和DNA片段D．若将重组质粒导入农杆菌中，农杆菌培养基中需添加卡那霉素11．农杆菌感知到植物分泌的酚类化合物后，会开启其侵染过程，胞内蛋白V2识别并切割T-DNA的边界序列，切割后的T-DNA的一条链与V2形成复合物经通道复合体进入植物细胞。植物细胞被农杆菌侵染后会合成磷酸化的蛋白（VIP1-P）激活抗病相关基因的表达。同时，农杆菌的VF蛋白通过通道复合体进入植物细胞使VIP1-P去磷酸化且去除T-DNA上的V2为T-DNA的整合做准备。下列说法正确的是（）A．VF属于分泌蛋白，直接参与其合成过程的细胞器有核糖体、内质网与高尔基体B．胞内蛋白V2的合成场所是核糖体，合成过程需要由线粒体供能C．切割后T-DNA含有两个游离的磷酸基团和两个游离的3′—OHD．将T-DNA整合到农杆菌细胞中的染色体DNA上的过程涉及磷酸二酯键的断裂与形成12．研究人员发现高强度光照下，番茄会通过NPQ（一种光保护机制）散失过多热能，避免高强度光照造成损伤。为研究V基因对NPQ的作用机制，科研人员利用病毒诱导基因沉默技术（VIGS技术）特异性地使V基因沉默，发现高强度光照下番茄叶片的损伤明显增强。技术原理如图所示。下列叙述错误的是（）A．本实验中的目的基因应选用V基因，该基因可通过PCR技术获得B．该过程中目的基因整合到特殊农杆菌的T-DNA上C．该过程中VIGS技术通过降解V基因的mRNA进而抑制V基因的表达D．V基因的表达可能促进了NPQ机制的活化13．质粒P含有2个EcoRⅠ、1个SacⅠ和1个BamHⅠ的限制酶切割位点。用上述3种酶分别单独切割该质粒（完全酶切），酶切产物的凝胶电泳结果如图，其中泳道①条带是未酶切的质粒P，泳道②③④条带为3种单酶切产物。下列叙述正确的是（）A．DNA分子在该凝胶的迁移方向是从电源正极到负极B．泳道③条带是EcoRⅠ的单酶切产物C．泳道②④条带位置相同，说明酶切后产生相同的DNA片段D．泳道①②条带位置不相同，说明未酶切质粒的碱基数小于酶切后质粒的碱基数14．重叠延伸PCR技术是一种通过引物设计引入定点突变或连接不同基因片段的基因工程方法。研究人员利用该技术将来自水稻的几丁质酶基因（Chi）和来自烟草的葡聚糖酶基因（Glu）进行拼接，构建融合基因并利用农杆菌转化法转入小麦细胞，以增强小麦对白粉病的抗性。部分构建流程如图所示，下列相关叙述错误的是（）A．引物P2和引物P3的5'端需添加互补序列B．重叠延伸PCR技术无需酶切连接即可拼接基因C．农杆菌转化时需将融合基因插入Ti质粒的T-DNA区域D．经培养基筛选后的转化细胞即是目的基因成功整合和表达的细胞15．玉米螟是我国玉米的主要害虫。研究人员通过基因工程育种将抗虫基因（cry1Ab13）和抗除草剂基因（Bar）一起转入玉米中，以提升其抗虫和抗除草剂的能力，过程如图所示。下列叙述错误的是（）A．②过程前需在cry1Ab13基因两端添加限制酶BamHⅠ的识别序列B．步骤②应将cry1Ab13基因插入表达载体的启动子1和终止子1之间C．可采用分子杂交技术定性检测cry1Ab13基因的转录产物D．通过观察玉米抗除草剂的能力判定转基因抗虫玉米是否培养成功16．为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员利用大肠杆菌制备了巨噬细胞表面标志蛋白CD14蛋白，下图为构建目的基因及载体的相关示意图，下列有关叙述错误的是（

）A．PCR扩增CD14基因，DNA聚合酶催化引物的5'端与加入的脱氧核苷酸形成磷酸二酯键B．若B链为转录的模板链，则构建基因表达载体时，B链的3'端与启动子相连C．用XhoⅠ和SalⅠ双酶切CD14基因和载体，经DNA连接酶连接后，可用限制酶XhoⅠ和SalⅠ对CD14基因的连接方向进行鉴定D．将重组质粒导入受体细胞时，可用Ca2+处理，使其处于能吸收环境中DNA分子的状态第II卷（非选择题）二、综合题（共60分，请考生按要求答题）17．我国科研人员全球首次在猪的体内培育出了一个“人源化中期肾”，且维持到胚胎第28天。实验过程如图1所示，其中iPS细胞为类似胚胎干细胞的一种细胞，①~⑨为技术操作或生理过程。请回答下列问题：(1)过程②卵母细胞培养到______________________期才能去核，可以采用__________________技术对卵母细胞去核。过程④运用基因编辑技术（Cas9蛋白在向导RNA引导下，切割目标DNA双链，如图2所示）敲除成纤维细胞中的猪肾发育的关键基因SIX1，可以为后续人iPS细胞的生长和分化提供更合适的生存环境。下列对于该过程的分析，正确的有_____________________________（填字母）。a.Cas9蛋白由相关基因指导在核糖体上合成b.Cas9蛋白特异性识别并切割SIX1基因特定位点的磷酸二酯键c.若α链剪切点附近序列为……TCCACAATC……，则相应的识别序列为……UCCACAAUC……d.敲除SIX1基因的猪胚胎可避免猪细胞与人iPS细胞竞争肾脏发育的环境(2)选择iPS细胞进行实验，而非成体干细胞是因为______________________________。对iPS细胞培养的气体环境是____________________，在培养过程中需要________________________，以便清除代谢废物。(3)将DsRed（红色荧光蛋白基因）标记的改造iPS细胞注射到猪胚胎中，共1820枚胚胎移植到13只受体母猪体内。在胎龄28天收集到三个正常胚胎，胚胎移植前可通过_________________________技术产生同卵多仔后代，提高胚胎利用率。免疫荧光检测显示，DsRed标记的细胞仅出现在嵌合体胚胎________________的区域。(4)为确认改造iPS细胞的嵌合性，利用PCR技术检测是否存在DsRed基因，请在图3中将对应位置的条带涂黑___________________________，以得到电泳后预期的条带。获得的人源化肾脏仍然带有猪血管，若移植到患者体内可能会存在________________________________________________问题。18．耐盐碱玫瑰是通过转基因技术培育的食用、观赏两用花卉。如图是耐盐碱玫瑰的培育过程，外源DNA片段和Ti质粒上都有4种限制酶的切割位点，虚线箭头表示转录的方向。回答下列问题：(1)过程①用PCR技术扩增抗盐基因，需要_______种引物，引物的作用是_____________________。(2)过程③用Ti质粒和抗盐基因构建重组质粒，为防止自身环化和目的基因反向连接，应选择的限制酶是_______，限制酶作用的化学键为_______。(3)过程④将重组质粒导入农杆菌细胞前，需要用_______处理农杆菌。过程⑤获得转基因抗盐幼苗利用的原理是____________________________。(4)对耐盐碱玫瑰进行个体生物学水平的鉴定方法是_______。19．大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN（种子较大）中的表达量高于品种TL（种子较小），然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。(1)基因S启动子的基本组成单位是____________。(2)通过基因工程方法,将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大豆品种YZ。根据题图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是____________；此外，不宜同时选用酶SpeⅠ和XbaⅠ。原因是___________________________________________________________。(3)为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有_________________________。经验证的重组表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是______________。20．疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因发生突变，从而获得了对氯喹的抗性。回答下列问题：(1)提取DNA时，需将预处理后的患者血样用裂解液处理，破坏血细胞膜、______和______等膜结构，释放疟原虫核酸。(2)对pfcrt基因分析，区分氯喹敏感患者和氯喹抗性患者。①设计引物，扩增目的基因。根据pfcrt基因的序列，初步设计了F1、F2、R1和R2等备选引物（如图甲），并用______法合成。以疟原虫基因组DNA为______进行PCR。该PCR反应体系由疟原虫基因组DNA、引物、含Mg2+的扩增缓冲液、______、______、无菌水等构成。②选出正确、有效的引物。若不同引物扩增所得产物经琼脂糖凝胶电泳后结果如图乙所示，可知引物______适合用于扩增目的片段，理由是____________且特异性强。③分析目的片段，判断患者类型。对患者血样处理后进行PCR，扩增产物用限制酶Apol（识别序列5′A↓AATTT3′）处理，经电泳后凝胶中出现2个条带，则可判断该患者为______患者。(3)青蒿素可用于氯喹抗性患者的治疗。青蒿素是黄花蒿等植物中一种含量极低的非蛋白质类有机物。利用基因工程生产青蒿素可大大降低成本，在了解植物合成青蒿素的______和______的基础上，将目的基因的编码区与______（填“克隆载体”“表达载体”）连接，构建重组质粒，再将重组质粒导入酵母菌，利用酵母菌合成青蒿素。21．幽门螺杆菌（Hp）可能会导致慢性胃炎等疾病，该菌的Ipp20基因编码其特有的蛋白质，研究者欲利用基因工程制备Hp疫苗。3种常见的限制酶识别序列如图1所示，该实验所用的质粒结构如图2所示，基本操作流程如图3所示。回答下列问题：(1)重组质粒载体的核心部件有目的基因、启动子、___________。一般情况下，___________酶识别并结合真核细胞基因上的___________，从而驱动该基因的转录过程。(2)该基因工程中，构建基因表达载体时选用的限制酶是___________。选择双酶切的目的有_____________________，构建基因表达载体时选用T4DNA连接酶，能使目的基因片段和质粒载体片段之间形成___________键。(3)PCR扩增目的基因需在一定的缓冲溶液中进行，每一次循环过程包括94℃变性、50℃复性、_________三个步骤。PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+，作用是_________。PCR反应完成后，常采用_______技术来鉴定PCR的产物。(4)为筛选出含有目的基因的大肠杆菌，实验可以采用影印法：用无菌毡布压在培养基A的菌落上，带出菌种，平移并压在培养基B上，培养一段时间后的结果如图3所示，数字表示不同的菌落。据题意分析，培养基B中添加的抗生素是___________，图3中符合要求的菌落是________