肿瘤早筛样本处理技师考试试卷及答案

肿瘤早筛样本处理技师考试试卷及答案肿瘤早筛样本处理技师考试试卷一、填空题（每题1分，共10分）1.肿瘤早筛常用血液样本类型包括全血、血清和______。2.血清/血浆分离需在样本采集后______小时内完成。3.核酸提取样本需避免______污染（关键酶类）。4.血清分离常用离心力为______×g（10分钟）。5.粪便样本采集后需加入______保存液稳定核酸。6.-80℃可长期保存肿瘤早筛样本______以上。7.样本处理需佩戴的防护用品含手套、口罩和______。8.蛋白检测样本应避免反复______（影响活性）。9.样本接收需核对采集时间、类型和______。10.核酸裂解常用试剂含______（破坏细胞结构）。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.最常用于ctDNA检测的样本是？A.全血B.血清C.血浆D.尿液2.血清离心后下层沉淀是？A.红细胞B.白细胞C.血小板D.纤维蛋白3.粪便样本短期保存温度是？A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室温4.核酸提取去蛋白常用试剂是？A.异丙醇B.氯仿C.乙醇D.蛋白酶K5.导致样本溶血的操作是？A.离心力过高B.立即离心C.冻存D.加保存液6.ctDNA检测优先选哪种抗凝管？A.EDTA-K2B.肝素C.促凝D.无抗凝7.样本量不足应？A.继续处理B.退回采集C.记录使用D.稀释使用8.RNA提取需避免______污染？A.DNaseB.RNaseC.蛋白酶D.核酸酶9.血清冻存分装量常为？A.10μLB.100μLC.1mLD.5mL10.符合生物安全的操作是？A.手触样本B.离心敞盖C.消毒台面D.剧烈振荡三、多项选择题（每题2分，共20分）1.肿瘤早筛常用样本类型含（）A.血浆/血清B.粪便C.尿液D.唾液E.组织2.血浆离心注意事项（）A.2小时内离心B.1000-1500×gC.10分钟D.4℃离心E.反复冻融3.核酸提取关键步骤（）A.样本裂解B.核酸结合C.洗涤D.洗脱E.扩增4.样本接收检查项目（）A.类型B.采集时间C.样本量D.溶血/脂血E.抗凝剂5.ctDNA血浆样本处理流程（）A.离心分离B.分装C.-80℃冻存D.加稳定剂E.立即提取6.粪便采集注意事项（）A.避尿液B.采5g左右C.加保存液D.室温24hE.避光7.样本处理防护要求（）A.实验服B.手套C.护目镜D.N95口罩E.隔离衣8.ctDNA假阴性样本问题（）A.溶血B.量不足C.核酸降解D.保存不当E.抗凝剂错误9.血清与血浆区别（）A.血浆含纤维蛋白原B.血清不含C.血浆用抗凝管D.血清用促凝管E.血浆测ctDNA10.核酸提取后检测指标（）A.浓度B.A260/A280C.完整性D.含量E.活性四、判断题（每题2分，共20分）1.血清可直接用于ctDNA检测。（）2.血浆采集后应立即离心。（）3.粪便样本无需加保存液可冻存。（）4.乙醇可沉淀核酸。（）5.样本避免-20℃长期保存。（）6.溶血对蛋白检测无影响。（）7.ctDNA主要存在于血浆。（）8.样本接收无需记录状态。（）9.多个样本可同管离心。（）10.核酸提取后无需保存。（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述血浆样本采集后处理的关键步骤及注意事项。2.粪便样本（肠癌早筛）的采集与保存要点。3.如何判断血清/血浆溶血？溶血对检测的影响是什么？4.核酸提取中有效去除蛋白污染的方法。六、讨论题（每题5分，共10分）1.分析导致ctDNA检测假阴性的样本处理因素及控制措施。2.结合生物安全，讨论样本处理的防护要点及应急措施。---参考答案一、填空题1.血浆2.23.核酸酶4.1000-15005.粪便核酸6.1年7.护目镜8.冻融9.患者信息10.蛋白酶K二、单项选择题1.C2.A3.A4.B5.A6.A7.B8.B9.B10.C三、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCDE5.ABC6.ABCE7.ABC8.ABCDE9.ABCDE10.ABCD四、判断题1.×2.√3.×4.√5.√6.×7.√8.×9.×10.×五、简答题1.血浆处理步骤及注意事项：步骤：①2小时内离心（1000-1500×g，10分钟）；②吸取上层清液（避红细胞）；③分装100-200μL/管；④-80℃冻存。注意：用EDTA-K2抗凝管，避免溶血，分装标记编号，不反复冻融。2.粪便采集保存要点：采集：避尿液/表面污染，取内部5-10g样本。保存：立即加1:3粪便核酸保存液，4℃≤24h，-80℃长期保存，密封避光。3.溶血判断及影响：判断：上清呈淡红/深红色。影响：蛋白检测（血红蛋白干扰吸光度）、核酸检测（红细胞DNA污染ctDNA）、生化指标（钾/乳酸脱氢酶升高）。4.去蛋白方法：①蛋白酶K裂解（56℃30-60min）；②酚-氯仿抽提（分离蛋白于有机相）；③硅胶膜吸附（洗涤去残留蛋白）；④异丙醇沉淀（去除可溶性蛋白）。六、讨论题1.ctDNA假阴性因素及控制：因素：溶血（污染）、核酸降解（保存不当）、量不足、抗凝剂错误、提取效率低。控制：EDTA-K2管2小时内离心，-80℃冻存，筛选合格样本（≥2mL，血红蛋白≤1g/L），用ctDNA专用提取试剂盒