CN115014903B 一种澳洲坚果花粉管生长行为观测方法 （云南省热带作物科学研究所）_第1页
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CN115014903B 一种澳洲坚果花粉管生长行为观测方法 （云南省热带作物科学研究所）_第3页
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景洪市宣慰大道99号热作所农业研究将雌蕊浸泡在磷酸缓冲液中；(5)将雌蕊于中间2钾的混合液；所述苯胺蓝的质量分数0.4～0.6%；所述磷酸二氢钾的质量分数0.005~3[0002]花粉管作为植物有性生殖过程中雄性个体的重要载体，具有典型的顶端生长特管在雌蕊内的生长过程以及相关生物学研究4分数0.4～0.6所述磷酸二氢钾的质量分数0.005～0.015所述染色剂的pH为9.8~[0023]优选的，步骤(2)所述洗涤的时间为25～35min；步骤(3)所述洗涤的次数为2～4雌蕊的体积比独立为8～12:1；步骤(3)和(6)所述吸干水分是将所述雌蕊置于吸水纸上10酒精浓度改为60极大地改变了待检材料的固定效果，并有效地消除了花柱组织自发荧达到花粉管在荧光显微镜下高清晰度的最佳条件。本发明极大地弱化了花柱组织自发荧5[0033]图2(A-C)是采用传统方法处理对比例1，澳洲坚果花粉管在雌蕊内的生长情况[0034]图3(A-B)是采用传统方法处理对比例1澳洲坚果花粉管在雌蕊内的生长情况(100[0035]图4(A-D)是采用本发明的荧光显微处理方法的澳洲坚果花粉管在雌蕊内的生长[0046]在本发明中，步骤(1)所述酒精溶液的体积分数为55～65优选为57～63进一步优选为59～61更优选为60％。[0049]在本发明中，步骤(3)所述的NaOH溶液的浓度为1.5～2.5mol/L；优选为1.7~6~0.013进一步优选为0.009～0.011更优选为0.01％。789[0133]6)染色：将步骤5)切开后的雌蕊置于吸水纸中20s后放入苯胺蓝染色液中进行染[0134]7)荧光显微观测：将步骤7)染色好的待检材料取出置于吸水纸20s，去除多余染[0135]从图2-A可知，常规方法下澳洲坚果雌蕊组织叶绿素自发红色荧光，影响观察效及NaOH浓度过高或者处理时间过长均会[0136]图4(A-D)是采用本发明的荧光显微处理方法的澳洲坚果花粉管在雌蕊内的生长

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