第1章发酵工程(满分培优卷)(原卷版+解析)

第1章发酵工程（考试时间：60分钟试卷满分：100分）满分培优卷选择题：本题共20个小题，每小题3分，共60分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1．人们在酿造果醋时，往往要先酿造果酒，其原因不包括（

）A．果酒发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率B．醋酸菌能以果酒中的乙醇为底物来产生乙酸C．果酒有利于溶解水果中的风味物质并保留在果醋中D．酿制果酒和果醋时的最适发酵温度接近，均为30~35℃2．相传，酒祖杜康的儿子在长江边上开了个酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中。到了第21天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜美。酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料。他高兴地琢磨，21天后的酉时，就在酉字后面加上昔(廿一日)，造出了“醋”字。根据上述材料，下列相关分析正确的是（

）A．酒糟只提供发酵所需的微生物B．传统发酵以混合菌种的液体发酵为主C．酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分D．酒和醋的原料和工艺流程相同，但二者的发酵条件不同3．上饶多地都有酿米酒的风俗，其制作流程大致为：原料处理、糖化发酵、酒精蒸馏、陈酿熟化、装瓶封存。下列叙述错误的是（

）A．制备好的糯米与酒曲充分混合，装满容器后进行密封发酵B．蒸煮好的糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性C．发酵时，霉菌先分泌淀粉酶将淀粉糖化，之后酵母菌才能大量繁殖D．发酵过程中，酵母菌将糖分转化为酒精和二氧化碳，产生了米酒的特有风味4．钙果果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，其中钙元素的含量超出许多水果。钙果用途广泛，叶可加工成茶叶，花、仁、根能制成药材，果实可加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列说法正确的是（）A．利用酵母菌进行钙果果醋发酵的过程中温度应控制在18～30℃B．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧条件，不能拧松发酵瓶的盖子C．制作钙果果酒、果醋时，应将钙果进行高压蒸汽灭菌D．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的5．传统发酵技术的目的是将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要产物，下列关于传统发酵工程的叙述中，错误的是（

）A．酿制成功的粮食酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现酸味，原因是醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸B．酿酒和酿醋两个过程中，发酵液pH的变化趋势均为下降C．泡菜制作利用的是乳酸菌发酵，该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质中，泡菜坛内长出一层白膜的原因是因为产膜酵母的繁殖D．腐乳的营养丰富，原因是毛霉将蛋白质分解成肽和氨基酸，在制作过程中加入酒精含量过高，腐乳成熟时间缩短6．发酵辣椒酱一般是利用附着在辣椒表面的微生物进行自然发酵而成的，味美可口，健胃消食，在贵州、湖南、湖北、四川、江西等地家庭广泛制作。湖南发酵辣椒酱工业化生产一般工艺流程为：原料→去蒂→入池腌制（按一层辣椒一层盐腌制，并不时用水泵将下层盐水抽出从表面淋下）→存放发酵（最好是满池存放，表面用膜覆盖密封）→出池清洗→磨酱→拌料调味→灌装→高温杀菌→成品。下列叙述错误的是（

）A．生产发酵辣椒酱利用了醋酸菌发酵产生醋酸B．去蒂完全与否会影响到最终辣酱的细腻程度C．用水泵将下层盐水抽出从表面淋下以利于腌制均匀D．传统生产辣椒酱无法满足工业化大规模生产和食品安全的需要7．下列关于发酵过程产物检验的说法中，正确的是（）A．果汁发酵是否产生酒精，可用NaOH来检验B．检验醋酸的产生可用pH试纸鉴定C．泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量不能测定D．测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法8．微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于灭菌和消毒的叙述，正确的是（

）A．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B．无菌操作时，对操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌C．灼烧灭菌的对象是金属器具，不可以是玻璃器具D．消毒和灭菌的原理是基本相同的，程度有所不同9．下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是（

）A．微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌B．将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞后直接放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌C．接种环在火焰上灼烧灭菌后，立即蘸取菌液在培养基表面连续划线以分离纯化菌种D．稀释涂布平板法可以估算酵母菌数量，且估算值偏大10．纯培养物是由一种微生物组成的细胞群体，通常由一个细胞生长、繁殖形成，除了常规接种方法外，浇注平板法也可用于获得纯培养物，即将待分离的样品用无菌水进行充分稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液倒入已溶化的固体培养基中充分混匀，再倒入无菌培养皿中培养。下列叙述错误的是（）A．实验室中常利用平板划线法或稀释涂布平板法获得纯培养物B．为防止培养基再次凝固，融化后的固体培养基需立即与菌悬液混合C．浇注平板法和稀释涂布平板法均需将待分离的样品进行适宜梯度稀释D．浇注平板法获得的纯培养物可存在于培养基内部，而平板划线法只在表面11．下表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述不正确的是（

）成分蛋白胨葡萄糖KH2PO4伊红亚甲基蓝蒸馏水琼脂含量10g10g2g0.4g0.065g1000mL15gA．从用途分析该培养基属于选择培养基B．培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是蛋白胨C．该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质D．该培养基pH值应调节至中性或弱碱性12．养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。研究人员从养殖池的池泥中分离出硝化细菌并进行计数。下列相关说法错误的是（

）A．取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌B．对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法C．分离硝化细菌的培养基为含亚硝酸盐的牛肉膏蛋白胨培养基D．为保证结果准确，要选择菌落数为30~300的平板进行计数13．精喹禾灵（分子式：C19H17ClN2O4）是一种旱田除草剂，能被土壤微生物分解。研究人员配制了甲、乙两种培养基用于从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物，甲的组分为无机盐、水和精喹禾灵，乙的组分为无机盐、水、精喹禾灵和琼脂，其操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（

）A．两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐B．甲培养基的作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种C．乙培养基的作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种D．平板划线法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数14．某实验小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，操作流程如图所示，下列相关叙述正确的是（

）A．某些细菌合成的脲酶可催化尿素分解为NH3和CO2B．实验所用的培养基应该以尿素为唯一的氮源和碳源C．由图中数据可知实验土样中的菌株数约为1.7×10⁴个/gD．涂布3个平板可以避免出现菌落数比活菌的实际数目少的现象15．下列有关发酵工程实验操作正确的是（

）A．在暴露于空气的无氮培养基上生长出的都是固氮微生物B．泡菜制作时盐水浸没菜料的主要目的是杀死菜料中的杂菌C．血细胞计数板适用于酵母菌但不适用于细菌的数量测定D．家庭制果酒和工业化啤酒生产都要严格对原料进行灭菌16．某研究小组为比较药物AZA和CZA对肺炎克雷伯菌的抑菌效果，用含有药物的滤纸片进行抑菌实验，结果如图，下列叙述错误的是（

）A．培养皿和培养基都要经过灭菌处理B．倒平板操作应在酒精灯火焰旁进行C．本实验是运用平板划线法进行接种D．AZA抑制肺炎克雷伯菌的效果更好17．传统葡萄酒的制作利用了果皮上的野生酵母菌，某学习兴趣小组利用相关培养基培养葡萄果皮清洗液以探究果皮上的微生物种类，对此实验相关说法不正确的是（

）A．倒平板时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布B．用接种无菌水的培养基与接种微生物的培养基进行对照培养检测培养基是否受污染C．采用稀释涂布平板法培养和计数微生物数量会导致计数结果偏小D．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境18．大肠杆菌显色培养基是改良的快速检测培养基，可用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。下列有关说法正确的是（）A．从物理性质看大肠杆菌显色培养基属于液体培养基B．大肠杆菌显色培养基中一般含有水、氮源、无机盐、维生素C．可用稀释涂布平板法将大肠杆菌接种于显色培养基并进行计数D．在大肠杆菌显色培养基上观察到的是很多个细菌个体19．碱性果胶酶是一种生物酶制剂，可用于纺织纤维的脱胶预处理和煮练助剂。芽孢杆菌能分泌大量的碱性果胶酶，但分泌的物质中含有损伤纤维的内源性纤维素酶。毕赤酵母具有高表达的启动子，且不产生对纤维有损伤的酶，常作为碱性果胶酶的表达系统被应用。下列叙述错误的是（

）A．发酵结束后进行离心，从沉淀物中提取、分离产品B．改造的菌种必须经过扩大培养才能向发酵罐中接种C．发酵时要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件D．发酵用的菌种可为导入碱性果胶酶基因的毕赤酵母20．我国是啤酒生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成，其工业化生产的简要流程如图所示，下列叙述正确的是（

）A．大麦萌发时仅产生淀粉酶，几乎不产生蛋白酶B．赤霉素处理大麦可诱导淀粉酶合成，促进糖化发生C．酵母的发酵适宜在30~35°C、无氧的环境下进行D．消毒过滤可杀死所有微生物，延长啤酒的保存期非选择题：本题共4个小题，共40分。21．（10分）第十三届中国泡菜食品国际博览会在四川眉山开幕，泡辣椒、泡萝卜、泡黄瓜等小泡菜吸引了来自多个国家和地区参展商的眼球。请回答下列问题：(1)泡菜虽然酸爽可口，利于下饭，但在日常生活中我们应少吃泡菜，多吃新鲜蔬菜，原因是。泡菜腌制的过程中，要注意控制的条件有等方面(至少说出2项)。(2)泡菜制作过程中，泡菜坛中溶液量会增加，原因可能是。在制作泡菜过程中泡菜坛内长白膜，常常加入少量白酒的作用是。某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌，纯化乳酸菌的接种方法是，固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，分离纯化时应挑选出的菌落作为乳酸菌目的菌。研究发现，泡菜制作中添加适量的蔗糖能降低亚硝酸盐含量的峰值。为了进一步探究蔗糖量对亚硝酸盐含量峰值的影响，请你简要写出实验的主要思路。。22．（8分）有机磷农药会造成严重的环境污染，并直接或间接的危害人类健康，某研究小组采取下列流程获取农药降解菌：从受农药污染严重的土壤中筛选分离具优良性状的菌种→定向培育优良菌种→在此基础上进行诱变育种及构建工程菌。回答下列问题：(1)在采集的样品中，一般目的菌种在数量上并不占优势，为提高分离效率，可以先采用富集培养，即在培养基中加入，使所需要的微生物繁殖，造成数量上的优势，限制不需要的微生物生长繁殖。磷在体内可以参与合成(答出2种即可)等生物大分子。(2)富集培养并不能获得农药降解菌的纯种，可以通过和的方法进行纯化。(3)为了进一步获得优良菌种，研究小组进行了诱变育种，诱变育种是指。(4)研究小组进一步研究了影响降解率的碳源和氮源，得到如下结果，从图中可以得出的结论有：。

23．（8分）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌种T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌种T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。回答下列问题。上述实验过程中利用了菌种T能产生纤维素分解酶将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，酵母菌的无氧呼吸生产酒精。检测乙醇发酵是否成功，请写出两种方案。采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要适量补充氮源等营养成分，配制完成后需要灭菌而不是消毒，原因在于。温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置的最适温度约为。(3)在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是。(4)与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是。24．（14分）实验一：灰霉病菌感染使作物减产，因化学防治措施会引起诸多副作用，科研人员以黄瓜灰霉病菌为指示菌对BA-KA4解淀粉芽孢杆菌的防治效果进行了研究。(1)从自然界筛选BA-KA4解淀粉芽孢杆菌的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→计数及性能测定。富集培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是提高培养液中的，

可利用方法对土壤样品中的微生物进行分离纯化并计数，筛选获得BA-KA4解淀粉芽孢杆菌。(2)为了确定起主要抑菌作用的是BA-KA4菌体细胞，还是BA-KA4菌体释放到胞外的抑菌物质，实验步骤如下：①挑取BA-KA4菌株单菌落接种于液体培养基中，28℃恒温培养48h，离心收集上清液并过孔径0.22μm的滤膜得到无菌发酵液。收集离心获得的菌体，超声波破碎，用培养基稀释到原体积，经离心收集上清液为菌体破碎液。②实验组和对照组处理如下表：请完善实验方案中的I组组别第一步第二步第三步抑菌率倒入25mLPDA培养基，待培养基凝固后，在中央接入直径5mm的灰霉菌菌块22℃恒温培养至菌丝刚长满平板时，测量灰霉菌菌落直径（R0）0对照组AI实验组B加1mLBA-KA4的无菌发酵液至培养皿中同上同时测量灰霉菌的菌落直径（R1）63.87%实验组C加1mLBA-KA4的菌体破碎液至培养皿中同上同时测量灰霉菌的菌落直径（R2）41.17%注：PDA是马铃薯葡糖琼脂培养基的简称，抑菌率=（R一R）/R×100%③实验结果：该菌株的无菌发酵液具有较强的抑菌活性，而细胞破碎液的抑菌活性较低，说明。实验二：塑料被称为白色污染，黄粉虫幼虫能吃塑料，并降解其中的聚苯乙烯。我国北京航空航天大学的科学家们通过实验进行了如下研究：（一）、用13C标记的聚苯乙烯喂食黄粉虫幼虫，一段时间后，不仅检测到黄粉虫幼虫呼吸释放13CO2，还在黄粉虫幼虫体内检测到标记的化合物。给黄粉虫幼虫喂食庆大霉素，十天后再喂食聚苯乙烯，发现黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的降解效率几乎为零。（二）、将制备好的黄粉虫幼虫肠道菌悬液用①均匀涂抹在培养基平板上，将含庆大霉素、青霉素、氯霉素、四环素的圆形滤纸片置于平板上，将培养皿倒置于适宜温度的恒温箱中培养，结果显示含庆大霉素的滤纸片抑菌圈范围最大。（三）、将黄粉虫幼虫的肠道菌悬液加入含聚苯乙烯薄片的无碳培养基（A）中培养，目的是②：待聚苯乙烯薄片明显变小、变薄时，将培养物接种到含聚苯乙烯的无碳培养基（B）中培养得到单个菌落：对菌落进行筛选、鉴定，得到对聚苯乙烯有较强降解能力的微小杆菌和金黄杆菌。回答下列问题：(3)实验一的结果说明聚苯乙烯可以被黄粉虫幼虫利用，作为，庆大霉素可能会（促进/抑制）黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的吸收或利用。(4)实验二中，对接种用的玻璃器皿灭菌应该用法：①处使用的接种工具是。(5)实验三的培养基A和B中属于分离纯化微生物的培养基的是;②处所填的目的是。(6)由实验三的结果可知，黄粉虫幼虫能将吃进体内的塑料中的聚苯乙烯降解与直接相关。第1章发酵工程（考试时间：60分钟试卷满分：100分）满分培优卷选择题：本题共20个小题，每小题3分，共60分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1．人们在酿造果醋时，往往要先酿造果酒，其原因不包括（

）A．果酒发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率B．醋酸菌能以果酒中的乙醇为底物来产生乙酸C．果酒有利于溶解水果中的风味物质并保留在果醋中D．酿制果酒和果醋时的最适发酵温度接近，均为30~35℃【答案】D【分析】在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最是生长温度为30～35℃。【详解】A、酒精发酵产生的酒精能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率，A正确；B、缺少糖源时，醋酸能将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸（醋酸），B正确；C、果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，C正确；D、酿制果酒和果醋时的最适发酵温度不同，前者为18~30℃，后者为30~35℃，D错误。故选D。2．相传，酒祖杜康的儿子在长江边上开了个酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中。到了第21天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜美。酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料。他高兴地琢磨，21天后的酉时，就在酉字后面加上昔(廿一日)，造出了“醋”字。根据上述材料，下列相关分析正确的是（

）A．酒糟只提供发酵所需的微生物B．传统发酵以混合菌种的液体发酵为主C．酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分D．酒和醋的原料和工艺流程相同，但二者的发酵条件不同【答案】C【分析】酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。醋的制作离不开醋酸菌，醋酸菌属于好氧性细菌。【详解】A、酒糟不仅提供发酵所需的微生物还提供了原料，A错误；B、传统发酵是以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，B错误；C、酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分，C正确；D、酒和醋的原料和工艺流程不完全相同，发酵条件也不同，D错误。故选C。3．上饶多地都有酿米酒的风俗，其制作流程大致为：原料处理、糖化发酵、酒精蒸馏、陈酿熟化、装瓶封存。下列叙述错误的是（

）A．制备好的糯米与酒曲充分混合，装满容器后进行密封发酵B．蒸煮好的糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性C．发酵时，霉菌先分泌淀粉酶将淀粉糖化，之后酵母菌才能大量繁殖D．发酵过程中，酵母菌将糖分转化为酒精和二氧化碳，产生了米酒的特有风味【答案】A【分析】酵母菌既可以在有氧的条件下生活，也可以在无氧的条件下生活。有氧时它将有机物分解成二氧化碳和水，无氧时将有机物分解成酒精和二氧化碳。制作米酒利用的是酵母菌的无氧呼吸，所以在操作过程中要注意做好密封工作。【详解】A、酿酒过程中利用酵母菌的无氧呼吸会产生二氧化碳气体，为防止发酵液溢出，不会装满容器后进行密封发酵，会留有一段空间（一方面利于早期酵母菌有氧呼吸繁殖增加数量，一方面防止发酵过程中发酵液溢出），A错误；B、温度过高，会将酵母菌等微生物杀死（避免高温杀死酵母菌），故蒸煮好的糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性，B正确；C、发酵时，霉菌先分泌淀粉酶进行糖化后，产生大量的葡萄糖，供酵母菌分解利用，C正确；D、发酵过程中，酵母菌无氧发酵将糖分转化为酒精和二氧化碳，产生了米酒的特有风味，D正确。故选A。4．钙果果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，其中钙元素的含量超出许多水果。钙果用途广泛，叶可加工成茶叶，花、仁、根能制成药材，果实可加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列说法正确的是（）A．利用酵母菌进行钙果果醋发酵的过程中温度应控制在18～30℃B．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧条件，不能拧松发酵瓶的盖子C．制作钙果果酒、果醋时，应将钙果进行高压蒸汽灭菌D．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的【答案】D【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋发酵的条件是温度为：30～35℃为适宜，pH为酸性条件，且醋酸菌是好氧细菌，需要充足的氧气。【详解】A、果醋发酵利用的菌种是醋酸菌，在利用醋酸菌进行钙果果醋发酵过程中，温度应控制在30～35℃，A错误；B、酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，但需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放气，B错误；C、制作钙果果酒、果醋时，对钙果进行灭菌会杀死附着在果皮上的野生酵母菌，C错误；D、钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的，D正确。故选D。5．传统发酵技术的目的是将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要产物，下列关于传统发酵工程的叙述中，错误的是（

）A．酿制成功的粮食酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现酸味，原因是醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸B．酿酒和酿醋两个过程中，发酵液pH的变化趋势均为下降C．泡菜制作利用的是乳酸菌发酵，该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质中，泡菜坛内长出一层白膜的原因是因为产膜酵母的繁殖D．腐乳的营养丰富，原因是毛霉将蛋白质分解成肽和氨基酸，在制作过程中加入酒精含量过高，腐乳成熟时间缩短【答案】D【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【详解】Ａ、醋酸菌是好氧菌，酿制成功的粮食酒如果暴露在空气中，醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸，A正确；B、酿酒过程中酵母菌通过呼吸作用产生的CO2溶于发酵液中，会使发酵液pH下降，在制作果醋的过程中，醋酸菌会产生醋酸，发酵液pH下降，B正确；C、泡菜制作利用的是乳酸菌发酵，乳酸菌是原核生物，该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质中，泡菜坛内长出一层白膜的原因是因为产膜酵母的繁殖，C正确；D、腐乳的营养丰富，原因是毛霉将蛋白质分解成肽和氨基酸，在制作过程中加入酒精含量过高，腐乳成熟时间延长，D错误。故选D。6．发酵辣椒酱一般是利用附着在辣椒表面的微生物进行自然发酵而成的，味美可口，健胃消食，在贵州、湖南、湖北、四川、江西等地家庭广泛制作。湖南发酵辣椒酱工业化生产一般工艺流程为：原料→去蒂→入池腌制（按一层辣椒一层盐腌制，并不时用水泵将下层盐水抽出从表面淋下）→存放发酵（最好是满池存放，表面用膜覆盖密封）→出池清洗→磨酱→拌料调味→灌装→高温杀菌→成品。下列叙述错误的是（

）A．生产发酵辣椒酱利用了醋酸菌发酵产生醋酸B．去蒂完全与否会影响到最终辣酱的细腻程度C．用水泵将下层盐水抽出从表面淋下以利于腌制均匀D．传统生产辣椒酱无法满足工业化大规模生产和食品安全的需要【答案】A【分析】乳酸菌是厌氧菌，在无氧情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于泡菜的腌制、乳制品的发酵。【详解】A、存放发酵时需要用膜覆盖密封，说明生产发酵辣椒酱的菌种不是醋酸菌，而是厌氧的乳酸菌，A错误；B、若去蒂不完全，会影响到最终辣椒酱的细腻程度，B正确；C、用水泵将下层盐水抽出从表面淋下有利于腌制均匀，C正确；D、发酵辣椒酱的传统生产工艺主要是利用了天然乳酸菌发酵产生乳酸，再辅以低盐来保存产品，存在生产周期长，产品品质不稳定，亚硝酸盐等有害物质的含量超标等严重问题，无法满足工业化大规模生产和食品安全的需要，D正确。故选A。7．下列关于发酵过程产物检验的说法中，正确的是（）A．果汁发酵是否产生酒精，可用NaOH来检验B．检验醋酸的产生可用pH试纸鉴定C．泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量不能测定D．测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法【答案】B【分析】测定亚硝酸盐含量的原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。【详解】A、在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，因此可用酸性重铬酸钾来检验果汁发酵是否产生酒精，A错误；B、醋酸是一种弱酸，无毒，有酸味，可以品尝或用pH试纸鉴定，B正确；C、泡菜制作过程的亚硝酸盐含量可用比色法测定，C错误；D、亚硝酸盐无味，且具有毒性，不能用品尝法测定其含量，D错误。故选B。8．微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于灭菌和消毒的叙述，正确的是（

）A．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B．无菌操作时，对操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌C．灼烧灭菌的对象是金属器具，不可以是玻璃器具D．消毒和灭菌的原理是基本相同的，程度有所不同【答案】D【分析】灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面合或内部的部分微生物（不包括芽孢与包子），常用的方法主要有煮沸消毒法，巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。【详解】A、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子；消毒只能杀死物体表面或内部一部分微生物，不能杀死芽孢和孢子，A错误；B、对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁消毒，B错误；C、灼烧灭菌的对象可以是金属器具和玻璃器具，C错误；D、消毒和灭菌的原理基本相同，都是使微生物的核酸或蛋白质变性，灭菌更彻底，D正确。故选D。9．下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是（

）A．微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌B．将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞后直接放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌C．接种环在火焰上灼烧灭菌后，立即蘸取菌液在培养基表面连续划线以分离纯化菌种D．稀释涂布平板法可以估算酵母菌数量，且估算值偏大【答案】A【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌，A正确；B、将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞，包上牛皮纸并用牛皮筋勒紧后再放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理，B错误；C、接种环在火焰上灼烧灭菌冷却后再蘸取一环菌液在培养基表面通过连续划线而分离纯化菌种，C错误；D、平板划线法和稀释涂布平板法都能分离、纯化菌种，但稀释涂布平板法还可以统计菌种数目，且统计值偏小，D错误。故选A。10．纯培养物是由一种微生物组成的细胞群体，通常由一个细胞生长、繁殖形成，除了常规接种方法外，浇注平板法也可用于获得纯培养物，即将待分离的样品用无菌水进行充分稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液倒入已溶化的固体培养基中充分混匀，再倒入无菌培养皿中培养。下列叙述错误的是（）A．实验室中常利用平板划线法或稀释涂布平板法获得纯培养物B．为防止培养基再次凝固，融化后的固体培养基需立即与菌悬液混合C．浇注平板法和稀释涂布平板法均需将待分离的样品进行适宜梯度稀释D．浇注平板法获得的纯培养物可存在于培养基内部，而平板划线法只在表面【答案】B【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过梯度稀释后，取少量菌液均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、实验室中常利用平板划线法或稀释涂布平板法获得纯培养物，最终都可以得到单菌落，A正确；B、融化后的培养基需冷却至一定温度后，才可与菌悬液混合，防止高温杀死微生物，B错误；C、稀释涂布平板法先进行梯度稀释，再将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面，C正确；D、浇注平板法也可用于获得纯培养物，即将待分离的样品用无菌水进行充分稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液倒入已溶化的固体培养基中充分混匀，再倒入无菌培养皿中培养，由此判断浇注平板法获得的纯培养物可存在于培养基内部。平板划线法在固体培养基表面连续划线，最终在培养基表面获得单菌落，D正确。故选B。11．下表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述不正确的是（

）成分蛋白胨葡萄糖KH2PO4伊红亚甲基蓝蒸馏水琼脂含量10g10g2g0.4g0.065g1000mL15gA．从用途分析该培养基属于选择培养基B．培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是蛋白胨C．该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质D．该培养基pH值应调节至中性或弱碱性【答案】A【分析】根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。【详解】A、从用途分析该培养基属于鉴别培养基，可以鉴别大肠杆菌，A错误；B、葡萄糖中含有碳，培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，蛋白胨中富含蛋白质，提供氮源的物质是蛋白胨，B正确；C、微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机盐等，有的还需要特殊营养物质如维生素，蛋白胨还可以提供维生素等，C正确；D、由于该培养基用于培养细菌，所以pH值应调节至中性或弱碱性，D正确。故选A。12．养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。研究人员从养殖池的池泥中分离出硝化细菌并进行计数。下列相关说法错误的是（

）A．取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌B．对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法C．分离硝化细菌的培养基为含亚硝酸盐的牛肉膏蛋白胨培养基D．为保证结果准确，要选择菌落数为30~300的平板进行计数【答案】C【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌，防止污染，A正确；B、对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法，B正确；C、分离硝化细菌的培养基为选择培养基，应以亚硝酸盐或氨为唯一氮源，C错误；D、为保证结果准确，要选择菌落数为30~300的平板进行计数，避免因误差过大而影响计数，D正确。故选C。13．精喹禾灵（分子式：C19H17ClN2O4）是一种旱田除草剂，能被土壤微生物分解。研究人员配制了甲、乙两种培养基用于从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物，甲的组分为无机盐、水和精喹禾灵，乙的组分为无机盐、水、精喹禾灵和琼脂，其操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（

）A．两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐B．甲培养基的作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种C．乙培养基的作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种D．平板划线法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数【答案】D【分析】微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，有的还需要生长因子等特殊的营养，微生物培养的关键是无菌操作，筛选和分离微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。【详解】A、两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐，A正确；B、甲培养基为液体培养基，其作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种，B正确；C、乙培养基含琼脂，为固体培养基，其作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种，C正确；D、稀释涂布平板法或显微镜直接计数法可用于测定土壤中能降解精喹禾灵的细菌细胞数，但平板划线法不能用于微生物计数，D错误。故选D。14．某实验小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，操作流程如图所示，下列相关叙述正确的是（

）A．某些细菌合成的脲酶可催化尿素分解为NH3和CO2B．实验所用的培养基应该以尿素为唯一的氮源和碳源C．由图中数据可知实验土样中的菌株数约为1.7×10⁴个/gD．涂布3个平板可以避免出现菌落数比活菌的实际数目少的现象【答案】A【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数。【详解】A、尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为其合成的脲酶可催化尿素分解为NH3和CO2，A正确；B、实验所用的培养基应该以尿素为唯一氮源，但需要加入其他必需的碳源，B错误；C、由图中数据可知实验土样中的菌株数约为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个/g，C错误；D、涂布3个平板可以减小实验误差，但并不能避免出现菌落数比活菌的实际数目少的现象，D错误。故选A。15．下列有关发酵工程实验操作正确的是（

）A．在暴露于空气的无氮培养基上生长出的都是固氮微生物B．泡菜制作时盐水浸没菜料的主要目的是杀死菜料中的杂菌C．血细胞计数板适用于酵母菌但不适用于细菌的数量测定D．家庭制果酒和工业化啤酒生产都要严格对原料进行灭菌【答案】C【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详解】A、无氮培养基只能筛选出自生固氮微生物，因为自生固氮微生物能够利用空气中的氮气作为氮源，但在无氮培养基上生长的微生物并不一定都是固氮微生物，A错误；B、在泡菜制作过程中，盐水需要浸没全部菜料，主要目的是创造一个无氧的环境，有利于乳酸菌的发酵，B错误；C、血细胞计数板适用于测定酵母菌等个体较大细胞，而不适用于细菌等个体较小的细胞的测定，C正确；D、家庭制果酒利用的是葡萄表面附着的野生酵母菌，所以不能灭菌，D错误。故选C。16．某研究小组为比较药物AZA和CZA对肺炎克雷伯菌的抑菌效果，用含有药物的滤纸片进行抑菌实验，结果如图，下列叙述错误的是（

）A．培养皿和培养基都要经过灭菌处理B．倒平板操作应在酒精灯火焰旁进行C．本实验是运用平板划线法进行接种D．AZA抑制肺炎克雷伯菌的效果更好【答案】C【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数。【详解】A、培养皿和培养基都要经过灭菌处理才能使用，A正确；B、倒平板时为了避免杂菌污染，故应在酒精灯火焰旁进行，B正确；C、分析题图可知本实验是运用稀释涂布平板法进行接种操作，C错误；D、从图中可以看出，AZA的抑菌圈更大，说明对肺炎克雷伯菌的抑菌效果更好，D正确。故选C。17．传统葡萄酒的制作利用了果皮上的野生酵母菌，某学习兴趣小组利用相关培养基培养葡萄果皮清洗液以探究果皮上的微生物种类，对此实验相关说法不正确的是（

）A．倒平板时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布B．用接种无菌水的培养基与接种微生物的培养基进行对照培养检测培养基是否受污染C．采用稀释涂布平板法培养和计数微生物数量会导致计数结果偏小D．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境【答案】A【分析】无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。【详解】A、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，不能打开皿盖，A错误；B、用接种无菌水的培养基作为对照组，与接种微生物的培养基进行对照培养检测培养基是否受污染，B正确；C、用稀释涂布平板计数时，由于距离相近的两个细胞可以形成一个菌落，所以统计结果往往少于原始菌液中微生物数量，C正确；D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，防止污染环境，D正确；故选A。18．大肠杆菌显色培养基是改良的快速检测培养基，可用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。下列有关说法正确的是（）A．从物理性质看大肠杆菌显色培养基属于液体培养基B．大肠杆菌显色培养基中一般含有水、氮源、无机盐、维生素C．可用稀释涂布平板法将大肠杆菌接种于显色培养基并进行计数D．在大肠杆菌显色培养基上观察到的是很多个细菌个体【答案】C【分析】培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。【详解】A、从物理性质看大肠杆菌显色培养基属于固体培养基，A错误；B、大肠杆菌显色培养基无需要维生素，B错误；C、稀释涂布平板法可用于接种和计数，C正确；D、在大肠杆菌显色培养基上观察到的是很多个细菌菌落，而非个体，D错误。故选C。19．碱性果胶酶是一种生物酶制剂，可用于纺织纤维的脱胶预处理和煮练助剂。芽孢杆菌能分泌大量的碱性果胶酶，但分泌的物质中含有损伤纤维的内源性纤维素酶。毕赤酵母具有高表达的启动子，且不产生对纤维有损伤的酶，常作为碱性果胶酶的表达系统被应用。下列叙述错误的是（

）A．发酵结束后进行离心，从沉淀物中提取、分离产品B．改造的菌种必须经过扩大培养才能向发酵罐中接种C．发酵时要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件D．发酵用的菌种可为导入碱性果胶酶基因的毕赤酵母【答案】A【分析】发酵工程是利用微生物的生长和代谢活动来生产各种生物制品的过程。在发酵工程中,最核心的环节是发酵过程的设计和控制。【详解】A、发酵产物为碱性果胶酶，发酵结束后进行离心，从上清液中提取、分离产品，A错误；B、发酵罐的体积一般为几十立方米到几百立方米，接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。所以发酵时要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，B正确；C、环境因素会影响微生物的生长繁殖和代谢物的形成，所以发酵时要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，C正确；D、由题意可知，毕赤酵母具有高表达的启动子，且不产生对纤维有损伤的酶，常作为碱性果胶酶的表达系统被应用，因此发酵用的菌种可为导入碱性果胶酶基因的毕赤酵母，D正确。故选A。20．我国是啤酒生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成，其工业化生产的简要流程如图所示，下列叙述正确的是（

）A．大麦萌发时仅产生淀粉酶，几乎不产生蛋白酶B．赤霉素处理大麦可诱导淀粉酶合成，促进糖化发生C．酵母的发酵适宜在30~35°C、无氧的环境下进行D．消毒过滤可杀死所有微生物，延长啤酒的保存期【答案】B【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18～30°C。【详解】A、大麦萌发时不仅产生淀粉酶，还会产生其他蛋白酶，A错误；B、赤霉素处理大麦可诱导淀粉酶合成，淀粉酶催化淀粉分解，促进糖化发生，B正确；C、酵母的发酵适宜在18~30°C、无氧的环境下进行，C错误；D、消毒过滤只能杀死部分微生物，对发酵后的啤酒进行消毒，可以延长啤酒保质期，D错误。选B。非选择题：本题共4个小题，共40分。21．（10分）第十三届中国泡菜食品国际博览会在四川眉山开幕，泡辣椒、泡萝卜、泡黄瓜等小泡菜吸引了来自多个国家和地区参展商的眼球。请回答下列问题：(1)泡菜虽然酸爽可口，利于下饭，但在日常生活中我们应少吃泡菜，多吃新鲜蔬菜，原因是。泡菜腌制的过程中，要注意控制的条件有等方面(至少说出2项)。(2)泡菜制作过程中，泡菜坛中溶液量会增加，原因可能是。在制作泡菜过程中泡菜坛内长白膜，常常加入少量白酒的作用是。(3)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌，纯化乳酸菌的接种方法是，固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，分离纯化时应挑选出的菌落作为乳酸菌目的菌。研究发现，泡菜制作中添加适量的蔗糖能降低亚硝酸盐含量的峰值。为了进一步探究蔗糖量对亚硝酸盐含量峰值的影响，请你简要写出实验的主要思路。。【答案】(1)新鲜蔬菜中亚硝酸盐含量低腌制的时间、温度和食盐的用量等（2分）(2)外界溶液浓度高，细胞渗透失水抑制杂菌生长，也可增加泡菜的醇香感（2分）(3)稀释涂布平板法或平板划线法具有透明圈将适量的新鲜蔬菜均分为若干组，每组依次加入等量的盐水、调味料和不同浓度的蔗糖，其他按上述流程操作，测定不同蔗糖浓度下亚硝酸盐的含量并比较其峰值（2分）【分析】泡菜制作的实验原理：1、乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。2、利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加:一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。3、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。【详解】（1）腌制蔬菜含有亚硝酸盐，在体内会转化成亚硝胺，具有致癌作用。泡菜制作中，需注意控制食盐用量、温度以及腌制的时间，否则容易造成细菌大量繁殖而导致亚硝酸盐增加，影响泡菜品质，所以泡菜制作过程中需要定期测定亚硝酸盐的含量。（2）由于泡菜制作过程中要加入一定量的食盐、白酒以及香辛料等，因此蔬菜失水，造成泡菜坛中溶液增加。在制作泡菜过程中泡菜坛内常常长一层白膜，主要是产膜酵母繁殖引起的，加入少量白酒，可以抑制杂菌生长，减少白膜的产生，同时也可增加泡菜的醇香感。（3）分离纯化微生物通常用稀释涂布平板法或平板划线法，分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离，分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为目的菌。为了探究蔗糖含量对亚硝酸盐含量峰值的影响，自变量为蔗糖浓度，并且做实验要遵循对照原则，所以实验的主要思路为：配制具有一系列浓度梯度的蔗糖溶液，再加一组不添加蔗糖，加入等量蒸馏水的对照组，分别添加到等量的泡菜中，定期测定亚硝酸盐的含量，观察并记录亚硝酸盐含量的峰值。22．（8分）有机磷农药会造成严重的环境污染，并直接或间接的危害人类健康，某研究小组采取下列流程获取农药降解菌：从受农药污染严重的土壤中筛选分离具优良性状的菌种→定向培育优良菌种→在此基础上进行诱变育种及构建工程菌。回答下列问题：(1)在采集的样品中，一般目的菌种在数量上并不占优势，为提高分离效率，可以先采用富集培养，即在培养基中加入，使所需要的微生物繁殖，造成数量上的优势，限制不需要的微生物生长繁殖。磷在体内可以参与合成(答出2种即可)等生物大分子。(2)富集培养并不能获得农药降解菌的纯种，可以通过和的方法进行纯化。(3)为了进一步获得优良菌种，研究小组进行了诱变育种，诱变育种是指。(4)研究小组进一步研究了影响降解率的碳源和氮源，得到如下结果，从图中可以得出的结论有：。

【答案】(1)有机磷农药蛋白质、核酸(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)用物理或化学因素来处理生物，使生物发生基因突变（2分）(4)以蔗糖为碳源降解率最高；蔗糖浓度1.6%降解率最高（2分）【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】（1）分析题意可知，本操作目的是获取农药降解菌，故应在培养基中加入有机磷农药，以达到富集目的菌种的目的；磷在体内可以参与合成蛋白质、核酸（DNA、RNA）等生物大分子。（2）富集培养并不能获得农药降解菌的纯种，可以通过平板划线法和稀释涂布平板法的方法进行纯化。（3）诱变育种是指用物理或化学因素来处理生物，使生物发生基因突变，可以提高突变率，创造人类需要的生物新品种。（4）由题图可知，与其它组别相比，蔗糖组的降解率最高，即以蔗糖为碳源时有机磷农药的降解率最高；且蔗糖浓度为1.60%时有机磷农药的降解率最高。23．（8分）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌种T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌种T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。回答下列问题。上述实验过程中利用了菌种T能产生纤维素分解酶将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，酵母菌的无氧呼吸生产酒精。检测乙醇发酵是否成功，请写出两种方案。采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要适量补充氮源等营养成分，配制完成后需要灭菌而不是消毒，原因在于。温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置的最适温度约为。(3)在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是。(4)与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是。【答案】(1)方案一：取适量培养液加入到酸性重铬酸钾的溶液中，观察溶液是否由橙色变为灰绿色。方案二：酒精测试仪检测方案三：用嗅觉（2分）(2)消毒是指使用较为温和的物理、化学和生物等方法仅杀此物体表面或内部一部分微生物，灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。相对于消毒，灭菌能阻止因杂菌繁殖给实验带来的影响。（2分）28℃(3)排出二氧化碳，防止发酵液溢出(4)节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广（2分）【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。【详解】（1）上述实验过程中利用了菌种T能产生纤维素分解酶将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，酵母菌的无氧呼吸生产酒精，检测酒精时可以选择方案一：取适量培养液加入到酸性重铬酸钾的溶液中，观察溶液是否由橙色变为灰绿色。方案二：酒精测试仪检测。方案三：用嗅觉。（2）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要适量补充氮源等营养成分，配制完成后需要灭菌而不是消毒，原因在于消毒是指使用较为温和的物理、化学和生物等方法仅杀此物体表面或内部一部分微生物，灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。相对于消毒，灭菌能阻止因杂菌繁殖给实验带来的影响。温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置的最适温度约为28℃。（3）在酵母菌发酵过程中，酵母菌的无氧呼吸产生二氧化碳，为了将其排出，防治发酵液溢出，还需适时拧松瓶盖。（4）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广。24．（14分）实验一：灰霉病菌感染使作物减产，因化学防治措施会引起诸多副作用，科研人员以黄瓜灰霉病菌为指示菌对BA-KA4解淀粉芽孢杆菌的防治效果进行了研究。(1)从自然界筛选BA-KA4解淀粉芽孢杆菌的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→计数及性能测定。富集培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是提高培养液中的，

可利用方法对土壤样品中的微生物进行分离纯化并计数，筛选获得BA-KA4解淀粉芽孢杆菌。(2)为了确定起主要抑菌作用的是BA-KA4菌体细胞，还是BA-KA4菌体释放到胞外的抑菌物质，实验步骤如下：①挑取BA-KA4菌株单菌落接种于液体培养基中，28℃恒温培养48h，离心收集上清液并过孔径0.22μm的滤膜得到无菌发酵液。收集离心获得的菌体，超声波破碎，用培养基稀释到原体积，经离心收集上清液为菌体破碎液。②实验组和对照组处理如下表：请完善实验方案中的I组组别第一步第二步第三步抑菌率倒入25mLPDA培养基，