合成生物学底盘细胞构建技师考试试卷及答案

合成生物学底盘细胞构建技师考试试卷及答案合成生物学底盘细胞构建技师考试试卷一、填空题（共10题，每题1分，共10分）1.合成生物学常用底盘微生物包括大肠杆菌和__________。2.质粒载体中驱动基因表达的元件是__________。3.CRISPR-Cas9系统中引导Cas9识别靶序列的是__________。4.感受态细胞制备常用__________法。5.底盘细胞改造可提高目标__________的合成效率。6.重组质粒导入大肠杆菌的方法是__________。7.代谢途径优化需过表达__________酶。8.底盘细胞筛选标记常用__________抗性基因。9.GFP的中文名称是__________。10.底盘细胞稳定性包括遗传稳定性和__________稳定性。二、单项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.以下哪种不是合成生物学底盘细胞？（）A.酿酒酵母B.枯草芽孢杆菌C.人类细胞D.毕赤酵母2.CRISPR-Cas9的核心功能是？（）A.复制DNAB.编辑基因C.转录RNAD.翻译蛋白质3.感受态细胞的特点是？（）A.快速分裂B.吸收外源DNAC.分泌抗生素D.抵抗高温4.质粒筛选阳性克隆的元件是？（）A.复制原点B.多克隆位点C.抗性基因D.终止子5.不能导入原核细胞的方法是？（）A.转化B.电穿孔C.显微注射D.转导6.耐受性改造不包括？（）A.耐高渗B.耐酸碱C.耐重金属D.耐光照7.报告基因的作用是？（）A.指示基因表达B.提高生长速度C.增强抗性D.促进产物合成8.遗传稳定性指？（）A.形态不变B.基因序列不变C.产物不变D.生长速度不变9.底盘细胞核心作用是？（）A.基因载体B.合成产物C.提供能量D.分解有机物10.不是基因编辑工具的是？（）A.CRISPR-Cas9B.ZFNC.TALEND.质粒三、多项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.常用底盘微生物有？（）A.大肠杆菌B.酿酒酵母C.链霉菌D.假单胞菌2.CRISPR-Cas9组成包括？（）A.Cas9核酸酶B.gRNAC.靶DNAD.启动子3.质粒基本元件有？（）A.复制原点B.抗性基因C.多克隆位点D.终止子4.感受态制备方法有？（）A.CaCl2法B.电穿孔法C.热激法D.冻融法5.底盘改造策略有？（）A.敲除冗余基因B.过表达关键酶C.引入新途径D.增强耐受性6.DNA导入方法有？（）A.转化B.转导C.电穿孔D.显微注射7.报告基因类型有？（）A.GFPB.LacZC.抗生素抗性基因D.荧光素酶基因8.表型稳定性表现有？（）A.产物合成稳定B.生长速度稳定C.抗性稳定D.基因序列稳定9.其他基因编辑工具是？（）A.ZFNB.TALENC.慢病毒载体D.逆转录病毒载体10.底盘构建考虑因素有？（）A.遗传背景清晰B.生长速度快C.代谢易调控D.安全性高四、判断题（共10题，每题2分，共20分）1.大肠杆菌是常用底盘细胞之一。（）2.CRISPR-Cas9仅用于真核细胞编辑。（）3.感受态细胞可自然吸收外源DNA。（）4.质粒需复制原点才能复制。（）5.底盘改造仅为提高产物产量。（）6.转导通过噬菌体导入DNA。（）7.GFP是常用报告基因。（）8.遗传稳定性与基因序列无关。（）9.酿酒酵母不能作为底盘细胞。（）10.电穿孔法适用于原核和真核细胞。（）五、简答题（共4题，每题5分，共20分）1.简述底盘细胞定义及选择要求。2.简述CRISPR-Cas9在底盘改造中的应用。3.简述感受态细胞定义及制备方法。4.简述底盘细胞稳定性含义及影响因素。六、讨论题（共2题，每题5分，共10分）1.讨论底盘细胞代谢途径优化策略及意义。2.讨论底盘细胞构建的安全性问题及应对措施。合成生物学底盘细胞构建技师考试试卷答案一、填空题1.酿酒酵母2.启动子3.gRNA4.CaCl25.产物6.转化7.关键8.抗生素9.绿色荧光蛋白10.表型二、单项选择题1.C2.B3.B4.C5.C6.D7.A8.B9.B10.D三、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.AB5.ABCD6.ABCD7.ABD8.ABC9.AB10.ABCD四、判断题1.√2.×3.×4.√5.×6.√7.√8.×9.×10.√五、简答题1.底盘细胞是可改造用于合成目标产物的宿主细胞。选择要求：遗传背景清晰、生长快成本低、代谢易调控、耐受性强、产物效率高、安全性好。2.CRISPR-Cas9用于基因敲除、插入、替换。通过gRNA引导Cas9切割靶基因，实现精准编辑，如敲除冗余基因、过表达关键酶、引入新途径，优化代谢网络。3.感受态细胞是能吸收外源DNA的细胞。制备方法：CaCl2法（低渗处理增通透性）、电穿孔法（高压脉冲形成通道）。4.稳定性包括遗传（基因序列不变）和表型（生理特性稳定）。影响因素：基因位点、质粒稳定性、培养条件、环境胁迫。需优化表达系统、控制传代次数。六、讨论题1.策略：过表达关键酶、敲除旁路途径、引入新途径、优化辅酶供应。意义：提高产物产