病理学技术(中级)考试试题及答案5

病理学技术(中级)考试试题及答案5一、单项选择题（下列每题选项中，只有1个选项最符合题意，每题1分，共40分）1.病理切片制作中，最常用且最为经典的固定液是A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.4%多聚甲醛D.戊二醛E.苦味酸答案：B2.组织脱水过程中，若脱水时间过长，最可能导致的现象是A.组织变软，难以切片B.组织变脆，切片易碎呈粉末状C.组织收缩不明显D.染色着色加深E.透明度降低答案：B3.常规石蜡切片的厚度一般在多少微米之间？A.1～2μmB.3～5μmC.8～10μmD.15～20μmE.20～30μm答案：B4.在苏木素-伊红染色（HE染色）中，细胞核被染成蓝紫色的原理是A.细胞核内蛋白质带正电荷，与碱性染料结合B.细胞核内核酸带负电荷，与碱性染料苏木精结合C.细胞核内核酸带正电荷，与酸性染料结合D.细胞质中蛋白质带负电荷，与酸性染料结合E.细胞膜脂质双分子层与染料结合答案：B5.采用Masson三色染色法时，胶原纤维呈现的颜色是A.蓝色B.红色C.绿色D.黄色E.紫色答案：C6.显示糖原最常用的染色方法是A.PAS染色B.苏丹III染色C.刚果红染色D.网状纤维染色E.结晶紫染色答案：A7.网状纤维染色中，以下哪种银氨溶液最常使用？A.Grocott银氨液B.Gomori银氨液C.Warthin-Starry银氨液D.Fontana-Masson银氨液E.Jones银氨液答案：B8.组织固定不良最容易导致的后续问题是A.切片刀刃口变钝B.染色时组织脱落C.免疫组化非特异性背景加深D.细胞内抗原丢失及组织自溶E.蜡块变硬答案：D9.冰冻切片制作时，为了防止组织内冰晶形成过多，最常用的处理措施是A.降低切片机箱体温度至-40℃B.加速切片C.使用OCT包埋剂并采取速冻法D.延长固定时间E.增加切片厚度答案：C10.在免疫组织化学染色中，常用的抗原修复方法不包括A.微波热修复B.高压锅热修复C.胰酶消化修复D.紫外线照射修复E.水浴锅热修复答案：D11.免疫组化S-P法中，“S”和“P”分别代表A.链霉亲和素和生物素B.链霉亲和素和过氧化物酶C.卵白素和生物素D.亲和素和过氧化物酶E.链霉亲和素和磷酸酶答案：B12.免疫组化染色中，内源性过氧化物酶主要存在于哪种细胞中，需要进行灭活处理？A.神经元B.红细胞和粒细胞C.平滑肌细胞D.纤维母细胞E.内皮细胞答案：B13.诊断淀粉样变性最特异且经典的染色方法是A.HE染色B.PAS染色C.刚果红染色D.Masson三色染色E.网状纤维染色答案：C14.常规石蜡包埋时，石蜡的熔点一般选择在A.30～35℃B.40～45℃C.56～60℃D.70～75℃E.80℃以上答案：C15.切片时出现“颤刀”痕迹，组织呈阶梯状厚薄不均，最可能的原因是A.蜡块过硬或刀刃不锋利B.蜡块过软C.切片速度过慢D.展片水温过低E.烤片时间不足答案：A16.脂肪组织常规石蜡切片在HE染色中呈空泡状的原因是A.脂肪被苏木精染成蓝色并溶解B.脂肪在乙醇脱水、二甲苯透明过程中被溶解C.脂肪本身不含细胞核D.脂肪在甲醛中溶解E.脂肪与伊红不结合答案：B17.欲显示组织内的脂质成分，应采用的切片方法是A.常规石蜡切片B.冰冻切片或恒冷箱切片C.火棉胶切片D.树脂切片E.超薄切片答案：B18.组织处理过程中，“透明”这一步骤的主要目的是A.使组织变硬B.使组织脱水更彻底C.作为二甲苯与石蜡之间的媒介，使石蜡能进入组织D.固定组织E.增加组织弹性答案：C19.关于苏木精染液配制后的“成熟”过程，描述正确的是A.加入氧化汞使其立即成熟B.必须放置数周使其自然氧化成熟C.加酸可加速成熟D.加碱可使其成熟E.配制后即可使用，无需成熟答案：B20.在组织固定中，交联型固定剂戊二醛最主要的特点是A.渗透力强，适合大块组织固定B.对组织穿透力弱，但固定细胞内结构极好，多用于电镜标本C.能够显示糖原D.能够使组织完全脱钙E.不产生交联答案：B21.脱钙过程中判断脱钙是否完全的常用方法是A.观察组织颜色变白B.针刺测试法，体会针刺阻力C.称量组织重量D.测量脱钙液pH值E.观察组织是否浮起答案：B22.核酸原位杂交技术中，常用的探针标记物是A.荧光素或地高辛B.辣根过氧化物酶C.碱性磷酸酶D.生物素E.苏木精答案：A23.常规HE染色中，伊红染液的pH值一般控制在A.2.0～3.0B.4.0～5.0C.6.0～7.0D.7.2～7.4E.8.0～9.0答案：B24.测量细胞核DNA含量最经典的组织化学方法是A.PAS染色B.Feulgen染色C.苏丹黑染色D.甲苯胺蓝染色E.结晶紫染色答案：B25.免疫组化染色呈现阳性结果时，DAB显色剂在过氧化物酶催化下生成的沉淀物颜色为A.蓝色B.红色C.棕黄色D.黑色E.紫色答案：C26.组织切片中出现黑色细微沉淀，覆盖于组织之上，最可能是由于A.甲醛色素沉淀未清除B.脱水不彻底C.染液过滤不净D.苏木精过度染色E.伊红过度染色答案：A27.显微镜观察时，若视野内光线过强导致切片反光刺眼，应如何调节？A.开大光圈B.调高聚光镜C.缩小光圈或调低聚光镜D.增大光源亮度E.更换高倍物镜答案：C28.怀疑组织内有抗酸杆菌感染时，首选的染色方法是A.革兰染色B.抗酸染色C.PAS染色D.六胺银染色E.HE染色答案：B29.免疫组化实验中，设立阳性对照的目的是A.排除内源性过氧化物酶的干扰B.验证实验方法和试剂的有效性及特异性C.检测组织固定是否良好D.封闭非特异性结合位点E.检测抗原修复是否过度答案：B30.关于Bouin固定液的特点，描述错误的是A.主要成分为苦味酸、甲醛和冰醋酸B.固定后组织收缩明显，变硬变脆C.适合结缔组织固定D.对糖原保存较好E.常用于睾丸组织的固定答案：B31.载玻片在涂抹防脱片剂多聚赖氨酸后，应如何处理？A.立即使用B.放入冰箱保存C.在室温下自然晾干或60℃烤箱烘干备用D.浸泡于酒精中备用E.水洗后备用答案：C32.染色完毕后封片时，最常用的中性树胶溶解剂是A.乙醇B.丙酮C.二甲苯D.氯仿E.乙酸答案：C33.切片机进刀方式分为粗调和微调，常规切片厚度调整通常使用A.粗调手轮B.微调手轮C.自动进刀系统D.刀架角度调节钮E.块体进退旋钮答案：B34.进行原位PCR时，为防止PCR产物扩散到细胞外，常在组织切片上覆盖一层A.石蜡膜B.盖玻片并用指甲油封边C.甘油明胶D.中性树胶E.OCT答案：B35.电子显微镜超薄切片的厚度一般要求在A.50～100nmB.1～2μmC.3～5μmD.5～10μmE.10～20μm答案：A36.流式细胞术检测所需样本通常要求细胞处于A.石蜡包埋状态B.冰冻状态C.单细胞悬液状态D.固定切片状态E.组织匀浆不需要消化状态答案：C37.组织脱水透明后，浸蜡时间过短会导致A.组织发脆B.包埋时蜡块产生气泡或组织硬度不足无法切片C.染色过深D.切片卷曲E.组织过度收缩答案：B38.Giemsa染色法在病理学中最常用于A.神经元尼氏体染色B.骨髓涂片或血液涂片中的细胞分类C.细菌革兰染色D.真菌染色E.脂肪染色答案：B39.切片时蜡块带有OCT包埋剂，多见于哪种切片？A.常规石蜡切片B.冰冻切片C.火棉胶切片D.树脂切片E.超薄切片答案：B40.在全自动组织脱水机运行过程中，为防止试剂挥发和保证安全，通常采取的措施是A.提高运行温度B.采用密闭式试剂缸并开启抽风过滤系统C.延长固定时间D.搅拌组织E.添加丙酮答案：B二、多项选择题（下列每题选项中，至少有2个选项符合题意，每题2分，少选、错选均不得分，共10题，共20分）41.病理组织切片中常见的切片假象包括A.挤压假象B.刀痕C.气泡D.冰晶空泡E.甲醛色素答案：ABCDE42.属于糖类组织化学染色方法的包括A.PAS染色B.阿尔辛蓝染色（AB染色）C.甲苯胺蓝染色D.黏液卡红染色E.Feulgen染色答案：ABCD43.影响免疫组织化学染色结果的因素包括A.组织固定的时间和固定液的种类B.抗原修复的方法和时间C.一抗的稀释度和孵育时间D.内源性酶的灭活程度E.切片厚度及展片水温答案：ABCDE44.常用的组织透明剂有A.二甲苯B.氯仿C.甲苯D.纯乙醇E.松油醇答案：ABCE45.针对组织内钙盐的脱钙处理，常用的脱钙液配方包括A.盐酸甲酸混合液B.硝酸脱钙液C.EDTA螯合脱钙液D.硫酸脱钙液E.氢氧化钠脱钙液答案：ABC46.免疫组化非特异性染色的消除方法有A.正常血清封闭B.增加一抗稀释度延长孵育时间C.充分洗涤切片D.灭活内源性过氧化物酶E.使用亲和纯化的抗体答案：ABCDE47.冰冻切片较常规石蜡切片的优势在于A.节省时间，便于术中快速病理诊断B.能更好地保存酶活性C.能完好保存脂类物质D.组织结构收缩极小E.切片不易脱片答案：ABC48.关于组织固定的目的，描述正确的是A.防止组织自溶和腐败B.使细胞内蛋白质凝固沉淀C.使组织硬化易于切片D.使细胞内不同成分产生不同折光率E.增强染色亲和力答案：ABCDE49.病理实验室中常见的有害化学废弃物包括A.含有二甲苯的废液B.含有甲醇的废液C.含有重金属的固定废液（如铬酸、升汞）D.未使用完的组织蜡块E.DAB显色废液答案：ABCE50.以下关于组织切片展片水温的描述，合理的有A.常规石蜡切片展片水温通常设定在40～45℃B.水温过低会导致切片无法展平C.水温过高会导致蜡带溶化、组织散开D.冰冻切片一般不需要展片E.展片水温通常与人体体温一致（37℃）即可答案：ABC三、填空题（每空1分，共10题，共20分）1.病理技术中最常用的固定液是______，其标准浓度为______。答案：10%中性缓冲福尔马林；4%（或10%商品甲醛稀释，通常写4%）2.HE染色中，细胞核被染成______色，细胞质被染成______色。答案：蓝紫；红（或粉红）3.组织脱水过程中通常由低浓度乙醇向高浓度乙醇过渡，常规最后两步使用______和______。答案：无水乙醇；二甲苯（或氯仿）4.免疫组化实验中，常用的抗原修复液有______缓冲液和______缓冲液。答案：枸橼酸盐（pH6.0）；EDTA（或Tris-EDTA,pH8.0或9.0）5.测量脱钙液是否完全脱钙的物理测试法是______，常用的螯合脱钙剂是______。答案：针刺法；EDTA（乙二胺四乙酸）6.组织处理的三要素是______、______和试剂的纯度。答案：时间；温度7.刚果红染色后，在偏光显微镜下观察，淀粉样物质呈现______色双折光。答案：苹果绿8.核酸分子带有______电荷，在电场中向______极移动。答案：负；正9.根据染色原理，苏木精属于______染料，伊红属于______染料。答案：碱性；酸性10.显微镜物镜的数值孔径（NA）越大，其______越高，但______越浅。答案：分辨率；景深四、名词解释（每题4分，共5题，共20分）1.组织固定答案：将离体组织浸入化学试剂（固定液）中，使组织细胞内的蛋白质迅速凝固、沉淀，防止组织自溶和腐败，尽量保持其生活状态时的形态结构和化学成分，以利于后续制片和观察。2.透明答案：在组织脱水后，使用既能与脱水剂（乙醇）互溶，又能与石蜡互溶的试剂（如二甲苯）处理组织，以置换出组织中的脱水剂，并为石蜡浸入组织创造条件。由于该试剂处理后组织折光率改变而呈现透明状态，故称透明。3.抗原修复答案：在免疫组织化学染色中，由于组织固定过程中蛋白质发生交联，掩盖了抗原决定簇，导致抗原性降低或消失。通过加热（微波、高压）或酶消化的方法，打破蛋白质交联，恢复抗原原有的空间构象和反应性，称为抗原修复。4.免疫组织化学（IHC）答案：利用抗原与抗体特异性结合的免疫学原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（如酶、荧光素等）显色，从而在组织、细胞水平上对相应的抗原（如多肽、蛋白质等）进行定性、定位及半定量测定的技术。5.细胞凋亡答案：由基因控制的细胞自主的有序的死亡，以维持内环境稳定。其形态学特征主要包括细胞皱缩、核染色质边集并固缩、胞核碎裂形成凋亡小体，但细胞膜结构保持完整，不引起周围组织炎症反应。五、简答题（每题8分，共5题，共40分）1.简述常规石蜡切片组织处理（脱水、透明、浸蜡）的标准流程及各步骤的目的。答案：（1）脱水：将固定好的组织依次浸入70%、80%、90%、95%、无水乙醇中逐级脱水。目的是置换组织内的水分，为透明剂进入创造条件。无水乙醇必须保证纯度，通常需两道。（2）透明：将脱水后的组织浸入二甲苯（或环保透明剂）中。目的是置换组织内的乙醇，作为乙醇和石蜡的中间媒介，使石蜡能够顺利进入组织内部，同时使组织呈现透明状态以判断脱水是否彻底。（3）浸蜡：将透明后的组织浸入已熔化的石蜡中。目的是用石蜡置换出组织内的透明剂，使石蜡渗入组织内外，起到内部支持的作用，冷却后凝固使组织具备硬度和韧性，以便在切片机上切出薄片。2.简述苏木素-伊红（HE）染色中造成切片染色不佳（如核浆分化不清、颜色过浅或过深）的常见原因及处理方法。答案：（1）染色过浅：可能是苏木精染液过度氧化失效或染液使用次数过多老化；处理方法为更换新染液或缩短染色时间不作为。此外，分化液作用时间过长也会导致过浅，应严格控制分化时间。（2）染色过深或核浆界限不清：主要是分化不足或水洗不充分导致残留酸碱影响pH值；处理方法为适当延长分化时间，增加流水冲洗时间，调整染液pH值（特别是伊红染液需用冰醋酸调pH）。（3）组织自溶或固定不良：固定不及时、固定液浓度不够会导致细胞结构破坏，核着色不良。需严格规范标本离体后固定时间（不超过30分钟内固定）。（4）切片过厚导致重叠或结构挤压，光学显微镜下无法清晰对焦，应保证切片厚度控制在3～5μm。3.试述免疫组织化学染色中内源性过氧化物酶的灭活方法及其必要性。答案：必要性：免疫组化最常用的显色系统是辣根过氧化物酶（HRP）和DAB底物。人体组织细胞（尤其是红细胞、粒细胞、单核细胞及部分肝脏、肾脏细胞）中含有丰富的内源性过氧化物酶。如果不进行灭活，这些内源性酶也会与DAB反应产生棕黄色颗粒，造成假阳性背景，干扰特异性结果的判读。灭活方法：（1）常用方法：将切片浸入3%过氧化氢（）溶液中处理5～10分钟，可破坏内源性过氧化物酶的活性。（2）对于内源性过氧化物酶含量极高的组织（如淋巴结、脾脏、血涂片），可使用含有过氧化氢和甲醇的混合液（如0.3%-甲醇液）处理，甲醇不仅能增强灭活效果，还能改善组织形态。但需注意，甲醇可能对部分抗原表位造成破坏，对于此类抗原可采用单纯水配制的过氧化氢溶液。4.简述细胞凋亡与细胞坏死的形态学区别。答案：细胞坏死形态学特点：通常为病理性损伤引起，表现为细胞肿胀（细胞器肿大），细胞膜破裂，核染色质边集、固缩进而核溶解消失；细胞内容物释放，引起周围组织强烈的炎症反应；通常为片状或大面积细胞受累。细胞凋亡形态学特点：由基因调控的主动程序化死亡。光镜下表现为单个或少数细胞受累，细胞体积缩小，胞质浓缩。核染色质边集于核膜下呈新月形，随后核碎裂成大小不等的块状；细胞膜和细胞器膜保持完整；胞膜内陷包裹胞质和核碎片形成凋亡小体；周围无炎症细胞浸润，不引起炎症反应。5.简述冰冻切片制作过程中的注意事项及其优缺点。答案：优点：（1）制片速度快，通常数分钟至十几分钟即可完成，常用于术中快速病理诊断；（2）未经化学溶剂处理，组织内酶类和脂类物质保存较好，适用于酶组织化学、脂肪染色及免疫荧光等。缺点：（1）组织未经固定和脱水透明，结构不如石蜡切片清晰，细胞形态略差；（2）切片较厚，通常在5～10μm，易产生重叠，影响细结构观察；（3）无法长期保存，切片容易褪色。注意事项：（1）取材应薄而小，一般厚度不超过3mm，以利速冻；（2）必须使用OCT包埋剂作为支持介质；（3）控制好冷冻温度，通常箱体温度在-20℃至-25℃之间，温度过低组织变脆易碎，温度过高则无法切片或产生冰晶破坏组织；（4）切片刀需保持极其锋利，以防组织撕裂产生伪迹；（5）切片后应立即放入固定液（如纯丙酮或10%中性缓冲福尔马林）中固定，防止组织自溶。六、综合应用分析题（每题10分，共3题，共30分）1.计算题：实验室现需配制4%多聚甲醛固定液500mL。现有试剂为多聚甲醛粉末（分子量约30.03，纯度>95%）、0.1mol/L磷酸盐缓冲液（PBS，pH7.4）和少量1mol/LNaOH溶液。请写出详细的配制步骤及所需多聚甲醛的质量计算公式与结果（结果保留1位小数）。答案：配制步骤：（1）计算所需多聚甲醛的质量：已知需配制4%（W/V）的多聚甲醛溶液500mL。百分比浓度计算公式为：C其中C=4，V=推导计算质量：m所以需要称取多聚甲醛粉末20.0g。（2）称量：使用电子天平准确称取20.0g多聚甲醛粉末。（3）溶解：将称取的多聚甲醛粉末加入约300mL的0.1mol/LPBS溶液中，置于磁力搅拌器上搅拌，并置于水浴锅中加热至60℃左右（注意不可煮沸）。（4）调节pH促溶：由于多聚甲醛在常温下难溶，需在搅拌过程中滴加少量1mol/LNaOH溶液，直到溶液逐渐变得清澈透明。（5）定容：待溶液冷却至室温后，使用0.1mol/LPBS定容至总体积500mL。（6）校正：使用pH计测定配制好的固定液，确保pH值在7.2～7.4之间。最后过滤备用或避光保存于4℃冰箱中。2.分析题：某技术人员在行胃黏膜活检组织常规石蜡切片时，切片放入展片水槽中，发现组织切片迅速呈现乳白色浑浊并在水中散开碎裂，无法捞取完整切片。请分析该现象产生的可能原因，并提出相应的解决措施。答案：可能原因分析：（1）组织脱水不彻底：组织在处理过程中，无水乙醇浓度下降或脱水时间不足，导致组织内残留水分。进入二甲苯透明步骤后，水与二甲苯不互溶，组织呈现白色浑浊。这种组织由于内部结构破坏，切片极易破碎散开。（2）透明时间不足或透明剂失效：二甲苯使用过久或混入大量水分和酒精，导致透明不完全，石蜡无法正常渗入组织内。（3）浸蜡时间不足或石蜡温度过低：石蜡未完全置换出透明剂，组织内部未得到有效支持，导致无法成片。（4）组织本身富含血液或黏液而固定不佳：胃黏膜活检若未及时固定，或血块黏液过多，会导致局部组织结构破坏，切片易碎。（5）水槽温度过高：展片水温过高（如超过60℃），会使蜡带及组织瞬间熔化，导致组织散开。解决措施：（1）重新脱水与透明：将组织从蜡块中熔出，重新进入无水乙醇（换新的纯酒精）彻底脱水，再经过两道新的二甲苯透明，最后重新浸蜡包埋。（2）规范脱水机维护：定期更换组织处理机内的各级乙醇和二甲苯试剂，并记录更换时间。（3）控制切片与展片条件：适当降低展片水槽温度，保持在40～45℃；如组织过硬，可使用冰块擦拭蜡块表面以软化；对于过脆组织，可在切片前在蜡块表面涂抹少量冰水或薄荷油进行软化处理。（4）确保固定质量：临床标本离体后必须做到“越新鲜越好”，立即放入足量固定液中固定。3.综合题：患者男性，45岁，颈部淋巴结肿大，经手术切除送病理活检。临床高度怀疑淋巴瘤。现需要同时进行常规HE染色、免疫组化表型分析以及分子病理检测（基因重排）。作为病理技术主管，请详细设计该标本的取材、处理及后续切片技术方案。答案：（1）取材与标本分配：淋巴结取材时，先用刀片剖开，取最大切面。考虑到多检测项目的进行，必