（正式版）DB34∕T 2723-2016 《农田杂草马唐对草甘膦抗性检测技术规程》

2016-09-27发布2016-10-27实施工工24.4TritonX-10——量取30mLTritonX-100,加水定容到100mL。——量取33.33mL30%TritonX-100,加水定容至100mL。——量取1mL10%TritonX-100,加水定容到100mL。4.80.3%高锰酸钾——称取0.3g高锰酸钾溶解于100mL水中。4.120.1%高碘酸5.1电子天平(感量0.1mg);5.1电子天平(感量0.1mg);5.11量筒(100mL,250mL,500mL,1000mL);5.12离心管(1.5mL,2mL,10mL);3保存。种子的田间采集区域不小于100m×50m,每隔20Km取样首先将供试马唐种子用质量分数为0.3%的高锰酸钾溶液浸泡消毒10min,用无菌水清洗3次。然后在9cm培养皿内放2层滤纸，每皿放入50粒马唐种子，置于光照培养箱内催芽，培养周期和温度设为白天30℃12h、黑夜25℃12h,当种子露白时待用。选20粒经预处理露白的马唐种子均匀摆放于垫有2张滤纸的培养皿(直径9cm)内，种子的胚根与胚芽的方向要保持一致。将草甘膦母液用0.1%TritonX-100水溶液按照等比梯度配制成5-7个系列浓度，向培养皿内加入5mL系列浓度的草甘膦药液，使种子充分浸入药液中，每处理设6次4标定喷雾设备参数(喷雾压力和喷头类型),校正喷液量；当马唐长到株高10-15cm(4-6叶、2-3个分蘖)时，将草甘膦母液用0.1%TritonX-100水溶液按照等比梯度配制成9-11个系列浓度，按试验设计从低剂量到高剂量顺序进行喷雾处理。每处理设6次重复，并设不含药剂的处理作空白对喷药6d后剪取马唐植株上部茎叶(倒2、倒3叶)待用。首先称取中平衡后10000g、4℃离心15min。取200μL离心上清液加入2mL0.1%高碘酸，于37℃温浴2.5-3酸稀释液加入2mL0.1%高碘酸，于37℃温浴2.5-3h,以充分氧化莽草酸；然后加入2mL1mol/L7.5结果调查整株植物测定法在施药后7d记录每个剂量处理的马唐症状级别(见表1),并于施药后14d剪级别01心叶轻微萎蔫2叶片从叶尖开始红褐化卷曲，部分叶片出现枯斑，枯叶面积为20%～40%。3部分叶片红褐花卷曲，植株整体褪绿红褐化，枯叶面积为40%～70%,植缩的趋势。4植株叶片红褐化严重，枯叶面积达到70%以上，植株萎蔫，生长停滞。5植株严重萎蔫，枯死面积达到95%以上，或整株死58.1.1根据培养皿测定法调查数据，按公式(1)计算各药剂处理的胚根长或胚芽鞘长占空白对照的生长百分率(%),计算结果保留小数点后两位。R=Li/L×100...................................R——生长百分率(%);8.1.2根据整株植物测定法调查数据，按公式(2)计算施药I=∑(每钵各毒害级别杂草株数×毒害级别)/(每钵总杂草数×最高毒害级别)×100%.......(2)R=G₁/Go×100%..................................R——干重百分率(%);Go——对照马唐干重(g);8.2.1用DPS(数据处理系统)、SAS(统计分析系统)或SPSS(社会科学统计程序)标准统计软件按公式(4)对药剂浓度与生长百分率R、药害综合指数I或干重百分率R进行非线性回归分析，计算ED5o、ED₀值及95%置信限。8.2.2用DPS(数据处理系统)六SAS(统计分析系统》或-SPSS社会科学统计程序)标准统计软件按公式(5)对药剂浓度与莽草酸积累量进行非线性回归分析，计算EDso、EDs0值及95%置信限。U=D+(C-D)/[1+exp[b×(logx-logEDso)]]