实验2毛细血管采血WBC计数课件

临床检验学实验课临床检验学教研室实验二毛细血管采血（Collectionofcapillaryblood)

白细胞计数(Whitebloodcell)实验二[要求]

1、掌握毛细血管采血的方法,了解不同部位采血对检验结果的影响；2、掌握显微镜WBC计数的原理和方法；3、熟悉WBC增高和减少的临床意义。原理采血针刺破毛细血管后血液自然流出，用微量吸管吸取一定量的血液。一、毛细血管采血器材与试剂[器材]

一次性消毒采血针、一次性微量吸管、小试管、75％（V／V）乙醇棉球、无菌干棉球。

[试剂]白细胞稀释液（2％冰醋酸中加入10g/L结晶紫或亚甲兰3滴）操作1、实验准备3、消毒，待干2、按摩左手食指或中指4、针刺（深度2-3mm）5、拭血（第一滴血）7、稀释（擦去吸管外余血、冲洗次2-3次）返回6、吸血（20ul）方法学评价手指血耳垂血优点操作方便一次可获较多血样结果稳定痛感较轻操作方便实用于反复采集缺点较痛与静脉血仍存在着某些差异血循环差，血液容易停滞导致RBC、Hb、Hct结果均比静脉血高受气温影响较大，特别是冬天，波动较大,结果不够恒定原理用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。二、

WBC计数

器材、试剂、标本[器材]

显微镜、改良Neubauer计数板、试管、吸管、微量吸管等[试剂][标本]

操作1、加稀释液0.38ml2、吸取血液20ul3、混匀、悬液变为棕褐色4、充池，静止2-3min5、计数（四角4个大方格）图示6、计算、出报告

计算和报告计算:WBC=

＝注：N为计数的四个大格内的WBC总数结果报告：WBC=X.XX×109/LN.4×10×20×106N.20×109/L注意事项

1、充池时，如充液不足、液体外溢、断续充液，或产生气泡、充液后移动盖玻片等，均会使细胞分布不均匀，造成计数结果不准确，应重新充池。一般情况下各大方格间的细胞数相差不超过10％。若相差太大，应重新充池。2、白细胞数量过多时，可采用加大稀释倍数的方法。如20μl血加入到0.78ml稀释液中或10μl血加入到0.38ml稀释液中；数量过少时，可采用扩大计数域的方法，如计数8个或9个大方格；也可采用减少稀释倍数的方法注意事项白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数结果偏高，此时应计算白细胞校正值（公式中的有核红细胞是指分类100个白细胞时所遇见的有核红细胞）WBC校正值／L＝

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100.100+有核RBC×校正前WBC数方法学评价手工血液分析仪优点简便易行、不需昂贵仪器，可用于血液分析仪器的校准精密度和准确性较高、易于标准化、适合大规模健康人群普查缺点精密度和重复性欠佳仪器昂贵、某些人为或病理情况（有核RBC、大PLT等)可干扰计数本次实验顺序2、按摩、消毒、针刺1、准备微量吸管和加WBC稀释液至试管内4、准备计数池盖玻片3、用微量吸管分别吸取血20ul于WBC稀释液试管内5、混匀WBC悬液后滴入计数盘中6、2-3min