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课时作业54微生物的培养技术及应用1.C[解析]在以尿素为唯一氮源的培养基中分解尿素的微生物能生存,不能分解尿素的微生物不能生存,故需配制以尿素为唯一氮源的选择培养基,A正确;动物粪便和尿液中富含尿素,故可从富含动物粪便和尿液的土壤中取样分离尿素分解菌,B正确;土壤浸出液中含有分解尿素的细菌,灭菌会杀死细菌,故不能对浸出液进行灭菌,C错误;培养基倒置于恒温培养箱中进行培养,可减少培养基表面水分的挥发,以及防止皿盖上冷凝的水珠滴落到培养基上对实验造成影响,D正确。2.A[解析]若培养基灭菌不彻底,则未接种的平板上也会有菌落产生,A错误;接种环灼烧后未冷却处理,则会杀死接种的菌液中的酵母菌,因而接种后的平板上未形成酵母菌菌落,B正确;未进行倒置培养,则皿盖上冷凝的水滴会滴落到平板上,C正确;每次划线前都重新蘸取菌液相当于未将菌液稀释,因而平板上可能未分离出单个菌落,D正确。3.A[解析]称量、溶化是配制培养基的部分过程,培养基配制后需要灭菌,称量和溶化不需要无菌操作,倒平板过程需要进行无菌操作,A错误;可用稀释涂布平板法进行接种,吸取适当稀释度的菌悬液滴在平板上并涂布均匀,B正确;可分别将浸于大蒜汁和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置,浸入大蒜汁的滤纸片是实验组,浸入无菌水的作为对照组,通过比较不同滤纸片抑菌圈的有无来判断其是否有抑制作用,C、D正确。4.B[解析]要获得能降解柴油的菌种,需用以柴油为唯一的碳源制备的培养基进行筛选,A正确;所用培养基需进行严格灭菌,以防止杂菌污染,若对土壤样液进行灭菌处理,则会连所需菌种一起杀死,B错误;可采用稀释涂布平板法或平板划线法获得降解菌的单菌落,C正确;由表格可知,只有Y1在高浓度(5%)柴油下生长说明其对高浓度柴油的耐受性高于其余两个菌种,D正确。5.C[解析]刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,A正确;由于基因表达载体中含有标记基因,可以利用选择培养基筛选导入目的基因的大肠杆菌(受体细胞),B正确;要确定杂交瘤细胞能否产生所需抗体,需要进行抗体检测,仅利用选择培养基只能筛选出杂交瘤细胞,不能确定其是否能产生所需抗体,C错误;分离尿素分解菌需利用以尿素为唯一氮源制备的选择培养基,只有能合成脲酶的尿素分解菌能利用培养基中的尿素,在该培养基上存活,D正确。6.D[解析]图中①采用的是稀释涂布平板法,A正确;为排除无菌水的干扰,及检验培养基灭菌是否彻底,应增设仅接种无菌水的组别作为空白对照,B正确;每个稀释梯度应设置3个平行实验,减小误差,C正确;用稀释涂布平板法接种,当两个或两个以上细胞连在一起时只能观察到一个菌落,所以仅以深紫色菌落数估测会导致结果偏低,D错误。7.B[解析]由题图可知,两组平板都分成3个区进行划线,A错误;接种前需对接种环灼烧灭菌一次,每次划线后都灼烧一次,甲组共灼烧4次接种环,B正确;活菌计数用稀释涂布平板法,图中为平板划线法,不可计数,C错误;单菌落的形状、大小、颜色等特征可反映菌种种类差异,D错误。8.D[解析]用接种环在培养基上连续划线获得单个菌落是平板划线法,图示实验菌落(分布较均匀)不是通过平板划线法获得的,是用稀释涂布平板法获得的,A错误;图示结果说明细菌对抗生素的抗性在使用青霉素之前就已经存在,青霉素只起到了选择作用,B错误;超级细菌的产生是基因突变的结果,与抗生素浓度无关,抗生素浓度只是起到选择作用,C错误;细菌培养基在使用前灭菌是防止杂菌污染,使用后灭菌是为了防止污染环境和感染操作人员,D正确。9.B[解析]根据题中信息分析可知,图甲中取直径为3mm的果树腐烂病菌菌落移至A处,B处接种芽孢杆菌。培养若干天,测量并计算抑菌率,图乙显示实验组果树腐烂病菌的菌落直径为d,对照组果树腐烂病菌的菌落直径为D,又因为一开始接种的果树腐烂病菌菌落的直径为3mm,则抑菌率=(D-d)/(D-3)×100%,故选B。10.B[解析]该实验通过形成的抑菌圈的大小来判断3种植物精油对BQM生长的作用,故应用稀释涂布平板法接种BQM,,A正确;对照组的培养皿中布满了BQM菌落,说明接种了BQM,B错误;3种植物精油滤纸片的周围都形成了抑菌圈,说明三者都能抑制BQM生长,C正确;由图可知,丁香精油滤纸片周围的抑菌圈最小,说明其抑菌效果最差,D正确。11.(1)菌落链格孢(2)①不接种微生物(接种无菌水)中央接种直径为0.5cm的链格孢菌菌落②实验组和对照组内两培养皿菌株均无接触,对照组链格孢菌菌落直径明显大于实验组(3)①无菌滤液+固体培养基链格孢菌的菌落直径②甲(4)芽孢杆菌L对烟草抗病性的影响;芽孢杆菌L用于生物防治的剂量、时期等。(答案合理即可)[解析](1)固体培养基上生长着的不同菌落呈现出不同的菌落特征。要筛选出对链格孢菌有抑制作用的芽孢杆菌L,则应在培养基中加入链格孢菌进行筛选。(2)①实验目的是探究芽孢杆菌L抑制链格孢菌生长的原理,根据实验遵循单一变量原则的要求,A1平板接种有芽孢杆菌L,则A2平板不接种微生物(接种无菌水);B1平板中央接种直径为0.5cm的链格孢菌菌落,则B2平板中央也应接种直径为0.5cm的链格孢菌菌落。②实验组和对照组内两培养皿菌株均无接触,对照组链格孢菌菌落直径明显大于实验组,据此可推测芽孢杆菌L可能产生某种挥发性物质抑制链格孢菌的生长。(3)①实验的目的是证明芽孢杆菌L的发酵液中可能也存在抑制链格孢菌生长的物质,根据实验遵循单一变量原则的要求及题表分析,甲组应添加无菌滤液于固体培养基。因变量为抑菌率,则实验中要测量甲、乙组中链格孢菌的菌落直径,以计算抑菌率。②若抑菌率=(R0-R)/(R0-0.5)×100%,甲组为实验组,则R应为甲组测量的菌落直径。(4)若将芽孢杆菌L用于烟草赤星病的生物防治,还要考虑芽孢杆菌L对烟草抗病性的影响和芽孢杆菌L用于生物防治的剂量、时期等。12.(1)蛋白质(或“多肽”)肠道菌群平衡(2)①稀释涂布平板②(等量的)土霉素溶液(等量的)凝结芽孢杆菌(菌液)既抑制肠道有害菌的繁殖,又对肠道有益菌没有毒副作用(3)该菌株对其他有益菌和有害菌的作用;该菌株是否可以在畜禽肠道中稳定存在;该菌株对畜禽是否具有毒副作用(答出两点即可)[解析](1)核糖体是蛋白质的合成场所,土霉素可特异性结合原核生物的核糖体,从而抑制蛋白质合成;畜禽肠道内有大量的细菌和真菌,其中有益菌和有害菌的平衡是保持肠道正常功能的必需因素,因此对畜禽使用土霉素,可能会破坏畜禽肠道菌群平衡。(2)①从图示结果可以看出,菌落生长比较均匀,是用稀释涂布平板法进行接种的;②为评估凝结芽孢杆菌对畜禽肠道主要有害菌和有益菌的作用,将凝结芽孢杆菌视为自变量,可设置三组:无菌水组、(等量的)土霉素溶液组、(等量的)凝结芽孢杆菌(菌液)组;从表格中可看出,凝结芽孢杆菌既抑制肠道有害菌的繁殖(指示菌为猪霍乱沙门氏杆菌时,凝结芽孢杆菌组抑菌圈直径大于无菌水组),又对肠道有益菌没有毒副作用(指示菌为罗伊氏乳酸杆菌时,凝结芽孢杆菌抑菌圈直径与无菌水组一样)。(3)结合题述实验数据,可知将凝结芽孢杆菌用于实际生产,可能还需要研究该菌株对其他有益菌和有害菌的作用;该菌株是否可以在畜禽肠道中稳定存在;该菌株对畜禽是否具有毒副作用等。13.(1)苯丙氨酸湿热灭菌(或“高压蒸汽灭菌”)(2)接种前的苯丙氨酸含量-排除杂菌污染、苯丙氨酸自然降解等对实验结果的干扰(3)稀释涂布平板两种菌株在人工胃液中存活率无差异且均可繁殖,而Y菌株在人工肠液中存活率高于F菌株(4)YF-L中加入不同浓度的Y菌株(菌液)苯丙氨酸浓度、蛋白质含量、乳酸产量、菌落数、发酵过程中的pH变化等(答出2个即可)[解析](1)选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长的培养基。分析题意,本实验目的是筛选能降解苯丙氨酸的乳酸杆菌,故除加上题述成分外,还应以苯丙氨酸为唯一氮源,故培养基需要再加入苯丙氨酸;对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法(湿热灭菌法)。(2)筛选苯丙氨酸降解能力强的菌株,需计算不同菌株的苯丙氨酸降解率,计算公式为(接种前的苯丙氨酸含量-培养后的苯丙氨酸含量)/接种前的苯丙氨酸含量×100%。为排除杂菌污染、苯丙氨酸自然降解等对实验结果的干扰,本实验中还需设置不接种菌株的空白对照,若空白对照出现菌种,则证明培养基被杂菌污染,应重新配制。(3)能够测定活菌数目的接种方法是稀释涂布平板法;据图可知,两种菌株在人工胃液中存活率无差异且均可繁殖,而Y菌株在人工肠液中存活
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