CN116589521B 甾体类化合物、用途及其制备方法 （成都康弘药业集团股份有限公司）

202010015181.02020.01.07US4056633A,1977.11.01WO2019126761A1,2019.06.27WO2019154247A1,2019.08.15WO2019154257A1,2019.0823.权利要求1中所述化合物或其可药用盐在制备4.权利要求1中所述化合物或其可药用盐在制备用于预防或治疗神经系统疾病药物中7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于所述神经系统疾病选自轻度抑郁、中度抑3[0003]在动物体内，GABA(gamma_aminobutyricacid)γ_氨基丁酸仅存在于神经组织神经系统的主要抑制信号通路，对调节中枢神经系统功能具有重要意义。GABA(A)受体(GABAAR)是一种离子性受体和配体门控离子通道。其内源性配体γ_aminobutyricacid其孔隙。Cl_在内部电压小于静息电位时流出神经元细胞，在内部电压大于静息电位(即_75mv)时流入神经元细胞。这可以成功减少动作电位发生的机会，对神经传递产生抑制作是精神分裂症的重要情绪症状。而研究成果证实GABA能系统和GABA(A)受体在这三种疾病面都被证实参与了焦虑抑郁和精神分裂症中的病理过程，并且GABA(A)受体已经被长期作还原孕甾烷_20_酮和3α_21_二羟基_5_还原孕甾烷_20_酮，其分别为激素类固醇孕酮和脱Pharmacol.Exp.Ther.241:346_353(1987))。卵巢激素孕酮及其代谢物已被证明对脑兴奋性有深度的影响(Backstrom,T.etal,ActaObstet.Gynecol.Scand.Suppl.130:19_244献证明。已变成与经前综合征(PMS)有关的这些症状包括应激(紧张)、焦虑和偏头痛(Dalton,K.,PremenstrualSyndromeandProgesteroneTherapy,2ndedition,ChicagoYearbook,Chicago(1984))。具有PMS的受试者具有每月一次重现的在经期前存在且在经发性全身性小发作癫痫的患者，疾病发生率已与经前症状的发生率有关(Backstrom,立即急剧降低，导致PND的发作。PND的症状范围从轻度抑郁症到需要住院治疗的精神病。[0008]很多研究基于GABA(A)受体进行研究，以期获得能够有效治疗相关疾病的药物，CN103958540A、CN10533928A等公开了一系列神经类固醇化合物，用于治疗精神神经性疾有δ亚基的GABA(A)受体主要分布在突触外(extrasynaptic)。(ActivationofGABA(A)Receptors:ViewsfromOutsidetheSynapticCleft,Neuron.vol56,2007,763_770)；根据现有研究(EndogenousneurosteroidsregulateGABAAreceptorsthroughtwodiscretetransmembranesites:N源性的甾体类化合物如四氢脱氧皮质脂酮(THDOC)在高浓度(微摩尔级)的情况下可以直接5取60_2R4是单环或双环杂789[0038]本发明还进一步提供了上述化合物或药物组合物的在用于制备预防或治疗神经[0046]“芳基”是指具有提供在芳族环系中的6_14个环碳原子和零个杂原子的单环或多中的碳原子数目。典型的芳基包括但不限于衍生自以下的基团：醋蒽烯、苊烯、醋菲烯(1977)66:119中详细描述的可药用盐。本发明化合物的可药用盐包括衍生自合适无机和[0063]使用下列一般方法和工艺，由容易获得的起始原料可以制备本文提供的化合物。[0072]化合物KHC_5：将化合物KHC_4(23.6g,63.3mmol)和钯黑(1.2g)(在四氢呋喃用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，得到的粗品用硅胶柱色谱纯化，得到化合物KHC[0077]化合物KH002:化合物KHC_6(80mg，0.2洗脱)，然后重结晶(乙酸乙酯/石油醚＝1:10)，得白色固体(24mg，50.2％)。1HNMRHNMR(400MHz,CDCl3)δHNMR(400MHz,CDCl3)δHNMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,1H),烷/甲醇＝40:1展开)，分别得白色固体KH6070053_1(13mg，20.88％)和白色固体22保护，加入无水四氢呋喃40mL，室温搅拌5分钟后，转至45℃条件下，缓慢滴加[0149]化合物KH024：取化合物KHC_8(60m[0212]化合物KH039：取化合物KHC_8(75m[0216]化合物KH040：取化合物KHC_8(60m[0221]化合物KH041：取化合物KHC_8(70m醇＝40:1展开)，分别得白色固体KH6070100_1(12mg，20.70％)和白色固体KH6070100_2减压蒸除溶剂，得粗品。用石油醚：丙酮＝1:1溶液打浆，得到化合物KHC_11(150.0g,2KHC_16：取化合物KHC_15(72.0g,250.0mmol)，加入甲醇1000mL溶解，加入I2(19.0g,HCl溶液调酸至pH＝3，室温搅拌12小时。反应液加入食盐水(1.0L)，用乙酸乙酯萃取KHC_19(32.0g,101.9mmol)溶于1000mL二氯甲烷滴加至反应液中，加热60℃搅拌反应2小KHC_21：取化合物KHC_20(20.0g,63.7mmol)，加入四氢呋喃500mL溶解，加入10％Pd/C反应4小时，TLC监测反应显示反应完全。反应液加入饱和NH4Cl约40mL淬灭，用乙酸乙酯醇＝30:1展开)，分别得白色固体KH6070069_1(19mg，19.74％)和白色固体KH6070069_2[0282]化合物KH055：化合物KHC_22(100m5甲氧基4H1,2,4三氮唑(62mg，[0312]本发明使用了重组GABAA受体的α1β2γ2和α4β3δ两种亚型的膜片钳电生理学方法2O[0322]稳定表达GABAA(α1β2γ2)受体的HEK293细胞系在含有10％胎牛血清以及800μg/[0327]HEK293细胞在含有10％胎牛血清的DMEM培养基中培养，培养温度为37Instruments)拉制成记录电极。在倒置显微镜(IX71，Olympus)下操纵微电极操纵仪[0334]全细胞膜片钳记录GABAA1受体电流的电压刺激方案如下：当形储存于PatchMaster(HEKA[0335]全细胞膜片钳记录GABAA4受体电流的电压刺激方案如下：当形胞膜电压钳制于_70mV。在Gap_free模式下进行记录GABAA4电流，当细胞稳定后开始给与[0345]在检测GABAA1时，分别将3μΜGABA和配制不同药物浓度的混合液的电流与100μΜ[0346]在检测GABAA4时，分别将10nMGABA和配制不同药物浓度的混合液的电流与10μMGABA电流标准化然后计算每一个药物浓度对应的激动率。对每一个浓μmolGABA共同作用于GABAA1受体时产生的峰值电流与100μmol的GABA单独存在时E463.9478.1403.7821.1619.9[0356]Emax定义为受试样品与3μmolGABA共同存在下产生的峰值电流与100μmol的GABA[0360]Emax定义为受试样品单独存在和与10nmolGABA共同存在下产生的峰值电流与10μ物通过腹腔注射KH022和对照品化合物的溶液，给药体积为5mL/kg；在给药前称量动物体[0370]采用HPLC_UV法测定给药制剂的浓度，校正曲线至少包含6个浓度水平，且R2≥字，所有以百分数表示的数值(如偏差和％变异系数等)均保留到小数点后一位。采用WinNonlinTMVersion6.3(Pharsight,MountainView,CA)药动学软件的非房室模型处理血30min后进行行为学检测，选择明箱滞留时间作为评估KH004和KH022抗焦虑作用的主要指