雌二醇炔诺酮片H20020112

PAGE1PAGE5雌二醇炔诺酮片Ci’erchunQuenuotongPianEstradiolandNorethisteroneAcetateTablets本品为雌二醇和醋酸炔诺酮制成的复方制剂。含雌二醇(C18H24O2)和醋酸炔诺酮(C22H28O3)均应为标示量的92.5%-105.0%。[性状]本品为白色薄膜衣片。[鉴别]（1）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品各主峰的保留时间应与雌二醇和醋酸炔诺酮对照品峰的保留时间一致。（2）取本品2片，置10ml具塞离心管中，加水0.2ml，静置15分钟，使药片充分浸湿，加无水乙醇4.0ml，振摇15分钟，离心，取上层清液作为供试品溶液；另取雌二醇对照品适量，加无水乙醇溶解并稀释成每1ml约含0.5mg的溶液作为对照溶液=1\*ROMANI；再取醋酸炔诺酮对照品适量，加无水乙醇溶解并稀释成每1ml约含0.25mg的溶液作为对照溶液=2\*ROMANII。照薄层色谱法（中国药典2000年版二部附录VB）试验，吸取上述三种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-氯仿（1：9）为展开剂，展开后，晾干，然后在100C干燥15分钟，放冷置室温，喷以5%硫酸乙醇溶液，在100C加热薄层板直至其显色，再在紫外光灯（365nm）下检视。供试品溶液所显主斑点的颜色与位置应分别与对照溶液=1\*ROMANI、=2\*ROMANII的主斑点相同。[检查]含量均匀度取本品1片，置100ml具塞锥形瓶中，精密加50%乙醇溶液50ml,磁力搅拌1小时，用0.45m滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。照含量测定项下的方法测定并计算出每片的含量，应符合规定（中国药典2000年版二部附录XE）。溶出度照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录VD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水-80%乙腈（31：69）为流动相，检测波长280nm（测定雌二醇）、241nm（测定醋酸炔诺酮），流速1ml/min。理论板数按雌二醇峰计算应不低于3000。测定法取本品，照溶出度测定法（中国药典2000年版二部附录XC第二法）测定，以0.3%十二烷基硫酸钠500ml为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，用0.45m滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；另精密量取含量测定项下的雌二醇对照品储备液和醋酸炔诺酮对照品储备液各1.0ml置100ml量瓶中，加0.3%十二烷基硫酸钠溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各100l，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算出每片中雌二醇和醋酸炔诺酮的溶出量。雌二醇的限度为标示量的80%，醋酸炔诺酮的限度为标示量的85%，应符合规定。有关物质照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录VD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以溶剂A和溶剂B为流动相进行梯度洗脱，检测波长235nm（测定雌二醇的有关物质）、254nm（测定醋酸炔诺酮的有关物质），流速0.8ml/min。进样体积100l，运行时间60分钟，用系统适用性溶液注[1]在254nm测定6羟基-醋酸炔诺酮和雌二醇的分离度，应大于1.0，雌二醇的保留时间应控制在22-25分钟。洗脱程序如下表：洗脱程序时间溶剂A溶剂B0分钟80%20%2分钟65%35%35分钟20%80%49分钟20%80%50分钟80%20%60分钟80%20%溶剂A：0.5%四氢呋喃的水溶液。溶剂B：0.5%四氢呋喃的80%乙腈溶液。供试品溶液的制备：取本品12片，置100ml具塞锥形瓶中，精密加50%乙醇溶液50ml,磁力搅拌3小时，用0.45m滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；对照溶液的制备：精密量取供试品溶液1.0ml置100ml量瓶中，用50%乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。测定法精密量取对照溶液100l注入液相色谱仪，调节仪器的灵敏度使主峰达到满量程的25%。再精密量取供试品溶液和对照溶液各100l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，计算样品中各杂质的含量。与雌二醇相关的单个杂质峰面积的校正值不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%）,总杂质峰面积的校正值不得大于对照溶液的主峰面积的2倍(2.0%)；与醋酸炔诺酮相关的单个杂质峰面积的校正值不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%）,总杂质峰面积的校正值不得大于对照溶液的主峰面积的2倍(2.0%)。[注2-4]干燥失重取本品10片研细，精密称取细粉0.3g，60C减压干燥3小时，减失重量不得过7.5%微生物限度取本品10g（取自3盒）加灭菌生理盐水100ml制成1：100均匀混悬液，按中国药典2000年版二部附录XIJ依法检验，细菌计数不得过1000个/g；霉菌计数不得过100个/g；大肠杆菌：1g中不得检出。其他应符合片剂项下有关的各项规定（中国药典2000年版二部附录IA）。[含量测定]照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录VD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水-80%乙腈（31：69）为流动相，检测波长280nm（测定雌二醇）、254nm（测定醋酸炔诺酮），流速1ml/min。雌二醇与雌酮的分离度应大于2.0，理论板数按雌二醇峰计算应不低于3000。预试液的制备与测定精密称取雌酮对照品6mg置200ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为雌酮对照品储备液；精密量取含量测定项下的雌二醇对照品储备液和醋酸炔诺酮对照品储备液各1.0ml置10ml量瓶中，加雌酮对照品储备液1.0ml，加50%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取50l，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，计算雌二醇与雌酮的分离度，应大于2.0。对照品溶液的制备精密称取雌二醇对照品20mg置100ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为雌二醇对照品储备液；另精密称取醋酸炔诺酮对照品10mg置100ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为醋酸炔诺酮对照品储备液；分别精密量取雌二醇对照品储备液1.0ml、醋酸炔诺酮对照品储备液1.0ml置10ml量瓶中，加50%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备取本品12片，置100ml具塞锥形瓶中，精密加50%乙醇溶液50ml,磁力搅拌3小时，用0.45m滤膜过滤，精密量取续滤液2.0ml置25ml量瓶中，加50%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。测定法精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各50l，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算雌二醇和醋酸炔诺酮的含量。附各杂质相对于各自主峰的相对保留时间（RRt）杂质名称厂方提供RRt实际测定RRt6-羟基-雌二醇0.490.486-羟基-雌二醇0.530.516-酮基-雌二醇0.640.6216-酮基-雌二醇0.660.656-酮基-雌酮0.790.77-Equilenol0.890.886-脱氢-雌二醇0.950.95-雌二醇1.051.06雌酮1.161.174-甲基-雌二醇1.231.256-羟基-醋酸炔诺酮0.580.583,20-二酮-醋酸炔诺酮0.880.90炔诺酮0.660.64醋酸炔诺酮1.01.0雌二醇1.01.0[注2]在235nm检测雌二醇的相关物质，除了6羟基-醋酸炔诺酮外，各杂质均在6分钟到29分钟（4-甲基-雌二醇）之间出峰。在254nm检测醋酸炔诺酮的相关物质，除了雌二醇、-雌二醇和4-甲基-雌二醇峰外，各杂质均在29分钟到56分钟之间出峰，但计算杂质时应加上较早出峰的6羟基-醋酸炔诺酮。[注3]用系统适用性溶液有助于鉴别已知的杂质，除了这些杂质外，与醋酸炔诺酮相关的下列杂质未包括在上述系统适用性溶液中，而是给出了它们的相对保留时间和校正因子：6-酮基-醋酸炔诺酮RRt=0.80，f=1.8；6-脱氢-醋酸炔诺酮RRt=0.97，f=2.2。与雌二醇相关的-Equilenol的校正因子f=0.04，因此在计算这三种杂质的含量时应乘以校正因子。[注4]峰面积小于或等于主峰面积0.1%的峰被认为是基线波动造成的，