(5.2.1)-5.2.1常用检测技术（组织形态学技术）完

组织形态学技术01一般染色技术02免疫组化03神经示踪技术目录一般染色技术第一章HE染色也就是苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining)，简称HE染色法，是石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色HE染色法是组织学、胚胎学、病理学中最基本、使用最广泛的技术方法。其在实际应用中可以鉴别组织、细胞的病理学改变，在临床病理工作中是诊断良恶性疾病的最基本的染色方法。HE染色法的应用两组小鼠胃体组织病理形态学比较对照组：小鼠胃部组织较清晰，无明显炎症改变。模型组：小鼠胃体组织水肿，胃壁增厚，黏膜上皮伴炎症细胞浸润。刘永斌,龙梦阳,杨雪,等.胃溃疡小鼠体表穴位敏化与垂体腺苷酸环化酶激活肽作用关系研究[J/OL].中国中西医结合杂志:1-8[2024-04-15].各组兔前交叉韧带的苏木精-伊红染色结果空白组、温针灸组中箭头示成纤维细胞；模型组方框示毛细血管。李春,张艳玲,刘娣,等.温针灸对膝骨关节炎兔损伤前交叉韧带修复及相关因子的影响[J].中国组织工程研究,2024,28(23):3621-3626.Masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合，胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维的染色方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。Masson染色用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。Masson染色能够清晰地区分这两种纤维，其中胶原纤维与分子量大的染料结合呈现蓝色或绿色，而肌纤维、胞质、红细胞则与分子量小的染料结合呈红色。用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布。在纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别、肝纤维化、肾纤维化以及心梗模型、肺纤维化等病理模型中，Masson染色可以提供有价值的信息。用于肾脏疾病病理诊断。Masson染色法的应用各组大鼠造模第9天膝关节滑膜形态比较陈蔚,李恒聪,万红叶,等.电针对膝关节骨关节炎大鼠滑膜炎性反应期自发痛及后期触诱发痛的影响[J].中国针灸,2022,42(12):1385-1393.天狼星红染色主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。天狼星红染色用于染色组织切片，以观察细胞核的形态、大小和核酸含量。用于肿瘤学研究，可以帮助鉴定和分析肿瘤细胞的形态学特征，评估肿瘤的分级和分期。用于染色其他组织样本，如肝脏、肾脏和神经组织等，以研究其结构和功能。天狼星红染色法的应用各组心梗大鼠心肌纤维化程度对照组空白微针贴片组载药微针贴片组彭宁馨,谢峻.负载尼洛替尼的甲基丙烯酰化明胶微针贴片治疗心肌梗死后心脏功能障碍的研发与应用[J].生物医学工程学杂志,2023,40(05):996-1004.免疫组化第二章免疫组化是指用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。免疫组化用于恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断；确定转移性恶性肿瘤的原发部位；对某类肿瘤进行进一步的病理分型；对软组织肿瘤的诊断；指导靶向或免疫治疗用药；协助发现微小转移或微小病灶；助力判断血管、神经侵犯；协助评估患者预后等。免疫组化的应用根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。免疫组化的实验原理免疫组化法检测卒中后抑郁（PSD）大鼠结肠5-HT的水平许慧,李恋秋,康贞,等.电针“四关”穴对卒中后抑郁大鼠结肠5-羟色胺、粪便短链脂肪酸的影响[J].中国针灸,2023,43(05):545-551.神经示踪技术第三章神经示踪技术是利用神经元轴浆运输现象来研究神经元之间纤维联系的一种技术。常用的示踪方法有辣根过氧化物酶追踪法、荧光追踪法、放射性核素示踪法等。神经示踪技术辣根过氧化物酶（HRP）是一种提取于植物蛋白的双向神经示踪剂，常用于逆行标记神经,可标记周围神经系统和中枢神经系统。荧光示踪剂暴露在一定波长激光下能发出不同颜色,可直接在荧光显微镜下观察,不需要经过后期显色。针灸中应用较多的为荧光素,主要有双苯甲亚胺(bisbenzimide,Bb)、碘化丙啶(propidiumiodide,PI)、核黄(nuclearyellow,NY)、快蓝(fastblue,FB)、荧光金(fluro-gold,FG)。荧光素在体内易扩散,激光照射后容易褪色,不容易长时间保存。神经示踪技术的应用

神经元轴突的功能之一就是从胞体将各种成分不断地运输至轴突及其分枝以维持其代谢。在神经末梢释放的神经肽及合成经典递质的酶需在胞体合成；从末梢也有影响细胞代谢的物质，如神经营养因子，逆向转运至胞体，这种运输现象称为轴浆运输。神经示踪技术是利用神经元的轴浆运输追踪神经元间纤维联系的一种方法，沿其轴突从胞体向末梢(顺向)或从末梢向胞体(逆向)的物质运输。从胞体向轴突及其终末的运输称为顺行运输，反之，从轴突及其终末向胞体的运输称为逆行运输。神经示踪技术的实验原理

A：病毒注射位置示意图；B：VTA逆向示踪病毒荧光蛋白表达李龙,王丹,赵广超,等.腹侧被盖区多巴胺神经元全脑神