2026年病理科免疫组化技术培训班试题(附答案)

2026年病理科免疫组化技术培训班试题(附答案)一、单项选择题（每题1分，共20分）1.免疫组化技术的基本原理是（）A.抗原与抗体特异性结合B.酶与底物催化反应C.核酸与探针互补杂交D.受体与配体竞争结合答案A2.免疫组化中，辣根过氧化物酶最常用的显色底物是（）A.DABB.BCIP/NBTC.银染液D.甲苯胺蓝答案A3.DAB显色后阳性信号呈现的颜色是（）A.红色B.棕黄色C.蓝黑色D.蓝紫色答案B4.石蜡切片免疫组化中，抗原修复的主要目的是（）A.增强内源性过氧化物酶活性B.暴露被甲醛交联遮蔽的抗原决定簇C.增加组织与载玻片的黏附力D.使细胞核着色更清晰答案B5.最常用的热抗原修复液是（）A.柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）B.PBS（pH7.2）C.Tris-HCl（pH8.0）D.碳酸盐缓冲液（pH9.6）答案A6.阻断内源性过氧化物酶常用的试剂是（）A.正常山羊血清B.3%过氧化氢C.1%BSAD.5%脱脂奶粉答案B7.为降低非特异性背景染色，一抗孵育通常采用的条件是（）A.56℃2小时B.37℃30分钟C.4℃过夜D.室温5分钟答案C8.免疫组化染色中，阳性对照的主要目的是（）A.排除假阳性B.排除假阴性C.校正显微镜光路D.测定一抗效价答案B9.用PBS代替一抗作为阴性对照，主要用于检测（）A.非特异性染色造成的假阳性B.抗原丢失造成的假阴性C.抗体效价D.抗原修复效果答案A10.石蜡切片脱蜡水化的正确顺序是（）A.二甲苯→梯度乙醇→水B.水→梯度乙醇→二甲苯C.乙醇→二甲苯→水D.二甲苯→水→乙醇答案A11.免疫组化切片的常用厚度是（）A.1～2μmB.3～4μmC.8～10μmD.15～20μm答案B12.苏木素复染后，细胞核呈现的颜色是（）A.红色B.棕黄色C.蓝色D.绿色答案C13.免疫组化染色过程中，PBS洗涤的主要作用是（）A.固定组织B.洗去未结合的抗体，减少背景着色C.激活抗原决定簇D.促进DAB显色答案B14.组织固定的常用试剂是（）A.10%中性缓冲福尔马林B.无水乙醇C.4%戊二醛D.冰醋酸答案A15.冰冻切片免疫组化的主要优势是（）A.组织形态更清晰B.有利于保存不稳定抗原C.切片可长期室温保存D.不需要显微镜观察答案B16.组织脱钙过度可能导致（）A.抗原信号增强B.抗原丢失，染色减弱C.背景着色降低D.细胞核更清晰答案B17.确定一抗最适工作浓度的常用方法是（）A.棋盘滴定（抗体梯度稀释）B.随机选择C.按二抗说明书直接确定D.统一使用1:100答案A18.免疫组化封闭液的常用成分是（）A.5%～10%正常动物血清B.3%过氧化氢C.二甲苯D.苏木素答案A19.免疫组化结果判读中“定位正确”是指（）A.着色出现在该抗原应存在的亚细胞部位B.整个细胞质弥漫着色C.细胞外基质均匀着色D.切片边缘明显着色答案A20.下列哪项属于免疫组化染色成功的质量控制指标？（）A.阳性对照阳性、阴性对照阴性、背景清晰B.阳性对照阴性、阴性对照阳性C.整张切片全部深染D.仅坏死区域着色答案A二、多项选择题（每题2分，共20分）1.免疫组化染色的基本流程包括（）A.脱蜡和水化B.抗原修复C.封闭D.一抗孵育E.二抗孵育及显色答案ABCDE解析常规免疫组化染色流程包括脱蜡水化、抗原修复、阻断内源性酶、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色、复染封片等步骤。2.下列哪些因素可能导致免疫组化背景染色过深？（）A.一抗浓度过高B.二抗孵育时间过长C.PBS洗涤不充分D.封闭不充分E.DAB显色时间过长答案ABCDE解析上述因素均可导致非特异性结合增强或显色过度，造成背景染色过深。3.关于内源性生物素造成的非特异性染色，正确的处理措施有（）A.使用卵白素-生物素封闭液B.延长正常血清封闭时间C.用3%过氧化氢处理D.改用非生物素检测系统（如聚合物法）E.延长抗原修复时间答案AD解析内源性生物素多见于肝、肾、脂肪等组织，可与ABC、SP法中的生物素结合产生假阳性。可用生物素封闭液阻断，或改用非生物素检测系统。4.关于抗原修复，下列叙述正确的有（）A.热修复可打开甲醛交联，暴露抗原决定簇B.修复液pH对修复效果有影响C.修复后应自然冷却，避免切片脱片D.修复过度可导致组织脱片和抗原丢失E.所有抗体均必须进行抗原修复答案ABCD解析并非所有抗体都需要抗原修复，应参照抗体说明书进行验证和优化。5.理想的阳性对照应具备的条件包括（）A.已知表达待检抗原B.与待检组织经历相同固定、包埋和切片处理C.目标抗原表达量适中D.必须为新鲜冰冻组织E.必须为恶性肿瘤组织答案ABC解析阳性对照不一定是冰冻组织，也不一定是恶性肿瘤组织，关键是已知表达目标抗原且处理方式与待检标本一致。6.免疫组化检测系统的组成包括（）A.二抗B.酶聚合物C.显色底物D.苏木素E.梯度乙醇答案ABC解析检测系统通常指二抗、酶或荧光标记物、显色底物等；苏木素为复染液，梯度乙醇用于脱水。7.可用于免疫组化显色的酶底物有（）A.DABB.AECC.BCIP/NBTD.甲苯胺蓝E.伊红答案ABC解析DAB和AEC是辣根过氧化物酶的常用底物，BCIP/NBT是碱性磷酸酶的常用底物；甲苯胺蓝和伊红为染料，不作显色底物。8.减少非特异性背景着色的措施包括（）A.正常动物血清封闭B.充分洗涤C.严格控制显色时间D.提高一抗浓度E.延长二抗孵育时间答案ABC解析提高一抗浓度和延长二抗孵育时间会加重非特异性结合，导致背景升高。9.关于内源性碱性磷酸酶，正确的叙述有（）A.小肠、胎盘等组织中含量较高B.可用左旋咪唑抑制C.可用过氧化氢完全阻断D.使用碱性磷酸酶标记系统时应考虑其影响E.抗原修复可以将其消除答案ABD解析过氧化氢主要用于阻断内源性过氧化物酶，不能完全阻断碱性磷酸酶；抗原修复也不能消除内源性碱性磷酸酶。10.免疫组化结果判读时，正确的做法包括（）A.对照染色合格后再判读B.观察着色部位是否与抗原定位一致C.结合组织形态和临床信息综合判断D.仅根据着色强度判断阳性E.将弥漫性背景着色视为阳性答案ABC解析免疫组化判读应结合定位、强度和形态学，不能脱离对照和背景单独判断。三、判断题（每题1分，共10分）1.免疫组化技术可用于组织中抗原的定位、定性及半定量分析。答案正确2.石蜡切片免疫组化染色前必须经过脱蜡和水化。答案正确3.3%过氧化氢处理切片可阻断内源性过氧化物酶活性。答案正确4.抗原修复液pH越低，修复效果一定越好。答案错误解析修复效果受pH、温度、时间等多种因素影响，pH过低反而可能损伤抗原和组织形态。5.一抗孵育时间越长，阳性信号越强，因此可以无限延长。答案错误解析孵育时间过长会增加非特异性背景染色，并可能导致抗原信号失真。6.阴性对照和阳性对照应同批染色。答案正确7.DAB显色后切片可经梯度乙醇脱水、二甲苯透明，再用中性树胶封片。答案正确8.微波抗原修复过程中切片干涸不会影响染色结果。答案错误解析切片干涸会导致抗原暴露不均匀、组织边缘出现非特异性着色，甚至组织脱落。9.免疫组化切片出现全片均匀棕黄色，说明该组织弥漫阳性。答案错误解析全片均匀棕黄色多为非特异性背景染色，应结合阳性对照、阴性对照及着色定位综合判断。10.组织固定时间越长，抗原保存越好。答案错误解析过度固定会导致抗原决定簇被过度交联遮蔽，染色减弱甚至出现假阴性。四、名词解释（每题5分，共20分）1.免疫组织化学答案免疫组织化学技术是利用特异性抗体与组织切片中的抗原结合，再通过酶标记或荧光素标记等放大系统进行显色，从而对组织中抗原进行定位、定性及半定量检测的技术。2.抗原修复答案通过加热（微波、高压、水浴）或酶消化等方法，使甲醛固定过程中被交联遮蔽的抗原决定簇重新暴露，恢复抗体与抗原结合能力的处理步骤。3.阳性对照答案采用已知表达待检抗原的组织切片，与待检标本同批染色。阳性对照阳性说明抗体有效、染色流程正确，可排除假阴性。4.阴性对照答案用PBS或同型无关抗体代替一抗，与待检标本同批染色，用于排除非特异性结合造成的假阳性。五、简答题（每题10分，共30分）1.简述免疫组化染色的主要步骤及操作要点。答案(1)切片脱蜡水化：二甲苯脱蜡，梯度乙醇至水，充分水化。(2)抗原修复：根据抗体说明书选择热修复或酶修复，修复后自然冷却。(3)阻断内源性过氧化物酶：3%过氧化氢处理10～15分钟。(4)封闭：用正常动物血清或BSA封闭非特异性结合位点。(5)一抗孵育：加入适当浓度一抗，4℃过夜或37℃孵育1小时。(6)二抗孵育：加入相应二抗或聚合物检测系统，室温或37℃孵育。(7)显色：DAB显色，显微镜下控制显色时间。(8)复染、脱水、透明、封片。操作要点：必须设阳性对照和阴性对照；各步骤之间用PBS充分洗涤；防止切片干涸；严格按抗体说明书选择抗原修复条件和一抗稀释度。2.免疫组化染色应设置哪些对照？各对照有何意义？答案(1)阳性对照：采用已知表达目标抗原的组织切片，验证抗体效力和实验流程，排除假阴性。(2)阴性对照：用PBS或同型无关抗体代替一抗，排除非特异性结合造成的假阳性。(3)空白对照：不加一抗和二抗，仅进行显色，排除内源性酶及显色系统自