2.T GXAS XXXX-2025《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》征求意见稿编制说明（07.15修改）

团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》（征求意见稿）编制说明任务来源、起草单位、主要起草人根据广西标准化协会《关于下达2026年第五批团体标准制修订项目计划的通知》（桂标协〔2026〕61号）文件精神，由北部湾大学提出，由北部湾大学、中国水产科学研究院珠江水产研究所、广西壮族自治区水产科学研究院、钦州市农产品质量安全检测中心、广西百跃农牧发展有限公司、广西粤海饲料有限公司等单位共同起草的团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》（项目编号：2026-0518）已获批立项。为高质量编制团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》，由起草单位成立标准编制工作组并进行如下分工：表1团体标准编制人员与分工姓名职称/职位从事专业工作单位主要负责工作龚斌教授微生物学北部湾大学主持王亚军处长/副研究员水产养殖中国水产科学研究院珠江水产研究所参与编制韦信贤研究员水产养殖广西壮族自治区水产科学研究院参与编制潘喜芳高级农艺师农产品质量安全钦州市农产品质量安全检测中心参与编制熊拯副教授教育/食品科学与工程研究北部湾大学参与编制李丽燕农艺师农产品质量安全钦州市农产品质量安全检测中心参与编制黄全书农艺师农产品质量安全钦州市农产品质量安全检测中心参与编制高开进高级工程师/百洋集团技术总监/国家特色淡水鱼产业技术体系综合实验站站长水产养殖与饲料营养广西百跃农牧发展有限公司参与编制陆田百洋集团分管科研副总经理水产动物营养广西百跃农牧发展有限公司参与编制刘莹副研究员微生物学北部湾大学参与编制覃玉月讲师微生物学北部湾大学参与编制彭春艳助理研究员微生物学北部湾大学参与编制谢宗省助理研发工程师水产养殖北部湾大学参与编制贾纪鑫助理研发工程师水产养殖北部湾大学参与编制陈宏民内务/副总经理水产养殖与饲料营养广西粤海饲料有限公司参与编制蒋焕超技术副总监水产养殖与饲料营养广西粤海饲料有限公司参与编制方闯闯配方师水产养殖与饲料营养广西粤海饲料有限公司参与编制制定标准的必要性和意义链球菌病是鱼类养殖中一种常见的细菌性疾病，对海水和淡水鱼类养殖业造成了严重的威胁。链球菌病具有高致死率、传染性强等特点，这种疾病的发生不仅导致鱼类大量死亡，还给养殖户带来了巨大的经济损失。我国作为世界上鱼类生产量、出口量、消费量最大的国家，做好链球菌病的预防、治疗工作尤为关键。现有技术对链球菌病通常采用的防治方法有：1.采用氯制剂或生石灰全池泼洒对水体消毒，这种方式往往治标不治本，随着养殖环境的变化，养殖时间加长后仍然有感染链球菌病的可能，而且该方案并不能提高鱼类自身的抗病能力，氯制剂和生石灰还有可能会影响鱼类生长；2.注射疫苗，这种方法操作复杂，无法在规模化集约化养殖中广泛推广，而且疫苗的注射需要手术操作，一般由专业人员进行，不易在养殖户中推广，还会增加养殖成本；3.投喂添加抗生素类药物的饲料，该方案会导致抗生素类药物滥用会形成耐药菌，且抗生素会在水体和鱼体中残留，影响食品安全。针对上述问题，益生菌及其发酵产品已成为国内外研究的热点，因其具有纯天然、无毒害、无药残、安全方便、功能全面等特点，能够产生抗菌活性物质，有效抑制病原菌生长，成为替代抗生素的理想选择。近年来，随着“禁抗”“限抗”政策的实施和消费者对安全、优质水产品需求的增加，发酵饲料在水产养殖领域的应用呈现快速增长态势。据数据统计，欧美等发达国家的发酵饲料在工业饲料中占比已达30%。预计未来十年内，中国发酵饲料将占到饲料总量的10%-20%，总量达到3000万-6000万吨，产值超过1000亿元。在水产饲料市场方面，2024年全国水产饲料销量约为1900万-2000万吨，其中销量在10万吨以上的企业约44家，合计销量在1700万-1800万吨，约占全国水产料销量的89%。头部企业如海大、通威、新希望、广西百跃、广西粤海等已在发酵软颗粒饲料领域展开布局，在金鲳鱼、南美白对虾等养殖中已经大量使用，并取得显著成效。以广西百跃为例，其为广西最大的饲料和预混料生产基地之一，以专业生产中、高端畜禽和水产饲料为主营业务，年总产能可达80万吨，年产值40多亿元，并建有“生物饲料开发国家工程研究中心（广西分中心）”、“北部湾水产生物饲料与饵料创新中心”。当前“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”，是由北部湾大学研究团队研发，由广西百跃农牧发展有限公司生产、推广应用，在实际使用过程中效果良好，但目前市场缺乏该产品统一的质量标准和评价标准，导致产品质量得不到保证。主要表现在：1.批次发酵活菌数存在一定波动：由于发酵条件差异，企业生产的发酵饲料中枯草芽孢杆菌活菌数的要求各不相同，且缺乏统一的检测方法和质量控制标准；2.缺乏统一的饲料质量标准：卫生指标、理化指标等定量指标尚未形成行业共识，导致产品功效难以评估；3.对饲料的功能特性检测不明确：对于发酵软颗粒饲料的抗链球菌功能，缺乏检测方法和质量控制标准。这些问题的存在，不仅影响了该产品质量和市场信誉，还可能导致养殖户因使用低效产品而继续依赖抗生素，违背“减抗”政策目标。因此，亟须通过制定团体标准，规范产品质量指标和检测方法，保障产品功效和安全性。主要起草过程成立标准起草工作组团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》项目任务下达后，北部湾大学联合中国水产科学研究院珠江水产研究所、广西壮族自治区水产科学研究院、钦州市农产品质量安全检测中心、广西百跃农牧发展有限公司、广西粤海饲料有限公司等单位共同成立了标准起草工作组，并制定了起草方案与进度安排，明确任务职责，确定工作技术路线，开展标准研制工作。编制工作组下设三个组，分别是资料收集组、草案编写组、标准实施组。资料收集组主要负责国内外有关“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的文献资料的查询、收集和整理工作，查阅“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的研究和应用情况。草案编写组主要负责起草标准草案、征求意见稿及标准编制说明、送审稿及编制说明的编写工作，包括后期召开征求意见会、网上征求意见，以及标准的不断修改和完善。标准实施组主要负责团体标准发布后，组织相关单位开展标准宣贯培训会，对标准进行详细解读，让相关人员了解标准，并根据标准对“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的质量进行规范化试验操作，再对标准实施情况进行总结分析，不断对团体标准提出修正意见。收集整理文献资料标准起草工作组收集了国内有关“饲料”、“软颗粒饲料”相关文献资料。主要有：GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB/T6432饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T6434饲料中粗纤维的含量测定GB/T6435饲料中水分的测定GB/T6438饲料中粗灰分的测定GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T8381.2饲料中志贺氏菌的检测方法GB/T10468水果和蔬菜产品pH值的测定方法GB10648饲料标签GB13078饲料卫生标准GB/T13079饲料中总砷的测定GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法GB/T13081饲料中汞的测定GB/T13082饲料中镉的测定GB/T13091饲料中沙门氏菌的测定GB/T13092饲料中霉菌总数的测定GB/T14699饲料采样GB/T18246饲料中氨基酸的测定GB/T18823饲料检测结果判定的允许误差GB/T18869饲料中大肠菌群的测定GB/T23181微生物饲料添加剂通用要求GB/T26428饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测GB/T22919.1（所有部分）水产配合饲料NY/T1444微生物饲料添加剂技术通则NY/T2071饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱-串联质谱法NY/T2131饲料添加剂枯草芽孢杆菌NY/T3801饲料原料中酸溶蛋白的测定JJF1070定量包装商品净含量计量检验规则DB32/T4560固态发酵饲料生产工艺规程DB32/T4559发酵混合饲料生产技术规范T/CSWSL012-2019淡水鱼用发酵饲料中华人民共和国农业农村部公告第921号《饲料添加剂品种目录（2025）》中华人民共和国农业农村部公告第921号《饲料原料目录（2025）》中华人民共和国农业农村部公告第2625号《饲料添加剂安全使用规范》国家市场监督管理总局令第70号《定量包装商品计量监督管理办法》研讨确定标准主体内容、特色及创新点标准起草工作组在对收集的资料进行整理研究并经初步调研之后，2026年03月，召开了标准起草会议，对标准的整体框架结构进行了研究，并对标准的关键性内容进行了初步探讨。经过研究，标准的主体内容确定为“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的菌种和原料、技术要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存。其中：菌种和原料章节包括发酵菌种、发酵原料、菌种确证等内容；技术要求包括外观质量、理化指标（水分含量、干基粗蛋白、干基粗纤维、干基粗灰分、酸溶蛋白占粗蛋白比值、pH、干基赖氨酸）、功能特性（抗海豚链球菌性）、卫生指标等内容。标准的核心技术及创新点在于根据“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”产品的特定技术特点规定了抗海豚链球菌技术要求。调研及形成草案、征求意见稿2026年03月16日-年03月31日，标准起草工作组到中国水产科学研究院珠江水产研究所、广西壮族自治区水产科学研究院、钦州市农产品质量安全检测中心、广西百跃农牧发展有限公司、广西粤海饲料有限公司等单位进行了广泛实地调研工作，查阅了大量的文献资料，对“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的产品特性进行系统总结，经多次研讨，按照简化、统一等原则编制完成团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》（草案）。2026年04月01日-2026年04月15日，标准起草工作组开展试验验证，收集标准修改意见。标准起草工作组多次召开讨论会议，进一步修改完善标准草案，最终形成了团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》（征求意见稿）及其编制说明。制定标准的原则和依据，与现行法律、法规的关系，与有关国家标准、行业标准的协调情况（一）编制原则1.实用性原则本文件是在充分收集相关资料和文献，分析发酵生物饲料的当前现状，调研“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的市场情况，在现有国家标准、行业标准的基础上，结合起草单位多年研发、生产、检测、销售的经验总结起草的，具有较强的实用性和可操作性。2.协调性原则本文件编写过程中注意了与相关法律法规的协调问题，在内容上与现行法律法规、标准协调一致。3.规范性原则本文件严格按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求编写标准的内容，保证标准的编写质量。4.前瞻性原则本文件在兼顾当前区内“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”现实情况的同时，还考虑到了发酵生物饲料产业快速发展的趋势和需要，在标准中体现了个别特色性、前瞻性和先进性条款，作为对“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”产品发展的指导。（二）编制依据本标准严格按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规则起草，标准主要内容参考相关标准文件并结合起草单位多年的相关经验和实践验证情况总结进行起草。（三）与现行法律、法规的关系，与有关国家标准、行业标准的协调情况本编制工作组承诺本标准内容与各项指标不违反相关法律法规要求，且不低于国家强制性标准、推荐性国家标准和行业标准要求。本项团体标准未采用国际标准或国外先进标准，无对应的国际标准或国外先进标准。通过检索与本项团体标准相关的“饲料”、“软颗粒饲料”的国内标准，发现与饲料相关标准主要为产品标准、试验标准、安全标准，与本项标准相关的标准主要有GB/T22919系列标准、DB35/T1767-2018《海水鱼软颗粒饲料通用技术条件》、T/QGCML3324-2024《虾蟹发酵软颗粒配合饲料》、T/CSWSL012-2019《淡水鱼用发酵饲料》、T/CSWSL002-2018《发酵饲料技术通则》。GB/T22919系列标准适用于针对特定鱼类，且未经发酵处理的常规水产配合饲料。本项团体标准的标准对象为“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”，是一种以枯草芽孢杆菌为主要添加剂，经微生物发酵制成的发酵软颗粒水产饲料，在满足水产动物对营养需求的基础上增加了抗鱼类海豚链球菌功能特性。DB35/T1767-2018《海水鱼软颗粒饲料通用技术条件》主要适用于大黄鱼、石斑鱼、鲆鲽类肉食性海水鱼类，对软颗粒饲料的定义为由粉状配合饲料与小杂鱼或者水按一定比例搅拌混合，经软颗粒机挤压成型的颗粒软饲料，而本项团体标准的标准对象是一种以抗海豚链球菌的枯草芽孢杆菌发酵全价鱼饲料制成的发酵软颗粒水产饲料，本项团体标准与与DB35/T1767-2018《海水鱼软颗粒饲料通用技术条件》相比标准对象不同，本项团体标准的标准对象不添加小杂鱼，添加了体外抑制海豚链球菌的枯草芽孢杆菌，并经过微生物发酵。T/QGCML3324-2024《虾蟹发酵软颗粒配合饲料》主要适用于以饲用微生物和酶制剂为发酵剂，以硬颗粒或膨化颗粒饲料为发酵底物，通过菌或菌酶协同发酵技术生产，制备得到的用于小龙虾养殖为主或虾蟹混养的饲料产品。而本项团体标准的标准对象是用于鱼类养殖为主的水产饲料产品，增加了发酵饲料和发酵菌种对海豚链球菌具有抑制作用。本项团体标准与T/QGCML3324-2024《虾蟹发酵软颗粒配合饲料》相比标准对象不同和功能特性不同。T/CSWSL012-2019标准适用于以饲用微生物和酶制剂为发酵剂，以两种或两种以上饲料原料为发酵底物，经发酵培养，制备得到的用于淡水鱼养殖的饲料产品，属于所有淡水鱼类的通用型标准。而本项团体标准明确针对“鱼类海豚链球菌病”这一特定疾病场景，养殖品种包括罗非鱼、鰤、鳗鲡、大泷六线鱼、杂交鲟等多种海水及淡水鱼类。本项团体标准与T/CSWSL012-2019《淡水鱼用发酵饲料》相比标准对象和功能特性不同，本项团体标准明确发酵菌种具有体外抑制鱼类海豚链球菌的功能特性。T/CSWSL002-2018标准适用于通过菌或菌酶协同发酵技术生产的发酵饲料原料产品，是用以制备发酵饲料原料和饲料添加剂的通用标准。而本项团体标准对象为枯草芽孢杆菌发酵全价鱼配合饲料产品，在T/CSWSL002-2018的基本指标上增加了菌种和活性要求、干基赖氨酸功能性指标。本项团体标准与T/CSWSL002-2018《发酵饲料技术通则》相比标准理化指标和功能特性不同，本项团体标准是经微生物发酵制成的发酵软颗粒水产饲料，具有抗鱼类海豚链球菌功能特性，增设了干基赖氨酸≥1.6%。综上所述，尚未发现有完全适用于“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的标准。本标准将在符合现行法律法规、强制性标准，与现行有关饲料标准相协调的基础上，纳入新技术完成标准的制定。主要条款的说明团体标准《含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料》主要内容包括菌种和原料、技术要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存。本文件主要内容及依据来源说明如下：术语和定义本章节主要就“发酵软颗粒饲料”、“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”进行了定义。其中：1.发酵软颗粒饲料：一种由全价配合饲料与水和发酵剂混合发酵而成的饲料；2.含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料：一种以体外抑制海豚链球菌的枯草芽孢杆菌为主要添加剂，经微生物发酵全价配合饲料制成的发酵软颗粒水产饲料。“发酵软颗粒饲料”的定义参考微生物饲料领域通用表述，结合水产软颗粒饲料的生产工艺，明确其由全价饲料、水与发酵剂混合发酵制成的属性。“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的定义依据产品的功能特性和核心添加剂种类，明确其以体外抑制海豚链球菌的枯草芽孢杆菌为主要添加剂、经微生物发酵制成的水产饲料属性，定义制定结合了NY/T2131《饲料添加剂枯草芽孢杆菌》对菌种的界定和菌种体外抗海豚链球菌活性的特殊功效。菌种和原料“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的发酵菌种、发酵原料、菌种确证是保障产品基础质量和功能有效性的核心前提，也是贯彻落实国家关于饲料安全方面规定的必须，经标准起草工作组充分讨论确定标准应规定发酵菌种、发酵原料、菌种确证的要求。发酵菌种要求的制定主要依据《饲料添加剂品种目录（2025）》、NY/T1444《微生物饲料添加剂技术通则》、《饲料添加剂安全使用规范》、GB/T23181《微生物饲料添加剂通用要求》等法规和标准的要求，同时结合枯草芽孢杆菌的菌种特性，从生产资质、生物学特征、安全属性、保存管理等方面提出要求，如菌种需由具备饲料添加剂生产许可证的企业生产、无抗生素耐药性、有完整保藏档案等，确保菌种的合法性、安全性和稳定性。发酵原料要求的制定主要遵循GB/T22919（所有部分）的要求，同时提出“在适宜的存放条件和保质期内，无变质”的宜选要求，兼顾原料的合规性和生产的持续性，从源头把控原料质量，避免因原料问题影响发酵效果和产品安全性。菌种验证要求按NY/T2131《饲料添加剂枯草芽孢杆菌》、GB/T26428《饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测》的规定执行。技术要求本章节作为核心技术内容，分为外观质量、理化指标、功能特性、卫生指标、净含量五部分，全方位规定了“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的质量要求，指标设定结合产品发酵工艺、功能定位和水产养殖的使用需求，经试验验证和行业实际调研确定，兼顾科学性和可行性。1.外观质量依据发酵饲料的通用感官特征，结合水产软颗粒饲料的物理特性，确定外观质量应包括色泽、气味、杂质、质地，并对抽检了5家不同企业“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”外观质量进行了抽检，抽检数据如表2。根据抽检结果确定了“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的外观质量要求，见表3。表2“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”外观质量抽检数据汇总企业色泽气味杂质质地企业1颜色一致，具有发酵底物特有色泽具有发酵特有气味，无异味无异物无霉变、均匀一致、颗粒状企业2颜色一致，具有发酵底物特有色泽具有发酵特有气味，无异味无异物无霉变、均匀一致、颗粒状企业3颜色一致，具有发酵底物特有色泽具有发酵特有气味，无异味无异物无霉变、均匀一致、颗粒状企业4颜色一致，具有发酵底物特有色泽具有发酵特有气味，无异味无异物无霉变、均匀一致、颗粒状企业5颜色一致，具有发酵底物特有色泽具有发酵特有气味，无异味无异物无霉变、均匀一致、颗粒状表3外观质量项目要求色泽颜色一致，具有发酵底物特有色泽气味具有发酵特有气味，无异味杂质无异物质地无霉变、均匀一致、颗粒状2.理化指标理化指标参考国家相关饲料的标准，并结合“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的特性，确定了水分含量、干基粗蛋白、干基粗纤维、干基粗灰分、酸溶蛋白占粗蛋白比值、pH、干基赖氨酸7项指标。为保证锁定各项指标，抽检了5家不同企业“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的应符合GB/T22919中对应水产动物配合饲料的规定共50批次数据，检测结果汇总表4。根据抽检结果确定了“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的理化指标要求，见表5。表4“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”理化指标抽检数据序号检验项目粗蛋白%粗纤维%粗灰分%水分含量%pH10%水溶液酸溶蛋白占粗蛋白比/(%)干基赖氨酸/%企业批次1企业1129.876.8910.2130.255.1217.291.832232.567.1312.2529.875.0818.131.793330.916.7510.5732.055.3416.752.124434.207.3111.4930.695.1717.871.815531.536.9710.9129.535.0517.091.746633.507.2512.7331.375.3818.871.857728.757.6910.3930.015.1116.201.908832.217.0511.0730.855.1317.611.799931.296.8311.8529.795.0917.371.75101032.637.6711.5531.775.1218.251.8311企业2132.157.0111.1330.575.1517.532.4512229.796.8510.8128.935.0718.071.8713334.767.5912.6131.755.2316.891.8114431.056.7110.6530.195.0317.151.7415532.537.1712.3730.915.1817.931.7916631.376.9310.3429.675.0616.671.6717733.877.3311.8531.415.2717.811.8718828.896.6710.4730.335.1317.272.2119932.377.0911.2130.755.1817.791.75201031.656.8110.7329.815.0818.151.7121企业3131.936.9511.6430.395.1317.351.8922232.597.2111.4132.075.1818.211.8323331.177.7410.6129.755.0616.711.7524433.817.7512.5731.335.2617.891.8525531.626.9110.8330.115.1017.111.8126632.337.1311.2930.895.1817.971.7727728.866.6910.5329.595.0416.311.9328834.597.2712.6531.455.2418.751.8929931.456.8710.7930.555.1617.491.94301032.197.0711.1530.975.1718.051.7531企业4132.077.0311.0930.715.1617.671.7732231.696.8310.7728.895.0918.112.0733332.737.2511.5331.295.2216.931.8334431.236.7310.6930.255.1217.231.8835532.477.1512.3330.955.1217.851.7936631.556.9110.9129.635.0516.771.7937734.957.7112.7728.375.1718.371.8738829.836.6510.4930.075.1017.391.9439932.297.0911.1730.675.2917.751.75401031.776.8710.8529.975.0818.091.7841企业5131.816.9110.8930.455.1517.412.2442232.567.1911.3931.115.1418.171.8143331.096.7510.6329.715.0716.811.8544432.857.8311.5931.845.2617.831.8545531.576.8910.8130.175.1117.171.7146632.397.1111.2530.935.1917.911.7747730.916.6710.5128.555.0416.631.9248828.697.2711.6331.475.2418.971.8949931.416.8510.7730.595.1517.531.89501032.147.0511.1330.995.1718.031.75根据抽样检测结果，对“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的理化指标分析如下：（1）水分含量由表4可知，抽检数据中水分含量最大值为32.07%，最小值为28.37%，平均值为30.48%，各含量阶段占比如下：——水分含量≤32%的占比为96％；——水分含量≤31%的占比为76％；——水分含量≤30%的占比为28％。结合产品实际检测结果规定了水分含量为≤32%，且96%的企业都能达到该要求。（2）干基粗蛋白由表4可知，抽检数据中粗蛋白最大值为34.95%，最小值为28.69%，平均值为31.84%，各含量阶段占比如下：——粗蛋白≥34%的占比为8％；——粗蛋白≥31%的占比为82％；——粗蛋白≥28%的占比为100％。根据所用罗非鱼配合饲料原料的国家标准GB/T22919.10—2024之规定，干基粗蛋白质28.0-36.0％，结合发酵饲料实际检测结果，规定了发酵饲料干基粗蛋白标准为28.0-36.0％，且100%的企业都能达到该要求。（3）干基粗纤维由表4可知，抽检数据中粗纤维最大值为7.83%，最小值为6.65%，平均值为7.04%，各含量阶段占比如下：——粗纤维≤8%的占比为100％；——粗纤维≤7%的占比为52％；——粗纤维≤6%的占比为0％。根据所用罗非鱼配合饲料原料的国家标准GB/T22919.10—2024之规定，干基粗纤维≤8%，结合发酵饲料实际检测结果，规定了发酵饲料干基粗纤维标准为≤8%，且100%的企业都能达到该要求。（4）干基粗灰分由表4可知，抽检数据中粗灰分最大值为12.77%，最小值为10.21%，平均值为11.22%，各含量阶段占比如下：——粗灰分≤13%的占比为100％；——粗灰分≤12%的占比为84％；——粗灰分≤11%的占比为46％。根据所用罗非鱼配合饲料原料的国家标准GB/T22919.10—2024之规定，干基粗灰分≤13%，结合发酵饲料实际检测结果，规定发酵饲料干基粗灰分标准为≤13%，且100%的企业都能达到该要求。（5）酸溶蛋白占粗蛋白比/(%)由表4可知，抽检数据中总酸最大值为18.97%，最小值为16.20%，平均值为17.59%，各含量阶段占比如下：——酸溶蛋白占粗蛋白比/(%)≥15%的占比为100％；——酸溶蛋白占粗蛋白比/(%)≥17%的占比为78％；——酸溶蛋白占粗蛋白比/(%)≥18%的占比为32％。结合产品实际检测结果规定了酸溶蛋白占粗蛋白比/(%)范围为≥15%，且100%的企业都能达到该要求。（6）pH由表4可知，抽检数据中pH最大值为5.38，最小值为5.03，平均值为5.14，各含量阶段占比如下：——5.3≤pH≤6.0的占比为4％；——5.15≤pH＜6.0的占比为48％；——4.5≤pH＜6.0的占比为100％。结合产品实际检测结果规定了pH范围为4.5～6.0，且100%的企业都能达到该要求。（7）干基赖氨酸由表4可知，抽检数据中 干基赖氨酸最大值为2.45%，最小值为1.67%，平均值为1.85%，各含量阶段占比如下：——干基赖氨酸≥2.0%的占比为10％；——干基赖氨酸≥1.8%的占比为60％；——干基赖氨酸≥1.6%的占比为100％。结合产品实际检测结果规定了干基赖氨酸为≥1.6%，且100%的企业都能达到该要求。表5理化指标项目指标水分含量/%≤32干基粗蛋白/%应符合GB/T22919中对应水产动物配合饲料的规定干基粗纤维/%应符合GB/T22919中对应水产动物配合饲料的规定干基粗灰分/%应符合GB/T22919中对应水产动物配合饲料的规定酸溶蛋白占粗蛋白比值/(%)≥15pH/（10%水溶液）5.0～6.0干基赖氨酸/%≥1.63.功能特性结合“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”特性，经试验验证，确定发酵饲料和发酵菌种对海豚链球菌具有抑制作用，具体试验验证方法如下：发酵饲料和发酵菌种抗海豚链球菌性能a）种子液制备将活化的枯草芽孢杆菌菌液、鼠李糖乳杆菌菌液和酿酒酵母菌液分别以体积百分比为5%接种比例接入枯草芽孢杆菌发酵培养基、鼠李糖乳杆菌发酵培养基或酿酒酵母发酵培养基中得到相应的种子液；种子液中，枯草芽孢杆菌的活菌数量不低于1×109CFU/mL：鼠李糖乳杆菌和酿酒酵母活菌数量不低于1×108CFU/mL。其中：枯草芽孢杆菌发酵培养基成分为：胰蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，pH6.8～7.2，纯水1L：发酵温度为30℃，发酵时间为3d;酿酒酵母发酵培养基成分为：胰蛋白20g，酵母粉10g，氯化钠20g，葡萄糖20g，pH6.5～7.2，纯水1L;鼠李糖乳杆菌发酵培养基为MRS肉汤培养基，购买自广东环凯微生物科技有限公司。b）混合制备初始发酵液将步骤a）的种子液以如下体积比得到初始发酵液：枯草芽孢杆菌：鼠李糖乳杆菌：酿酒酵母=l:0:0枯草芽孢杆菌：鼠李糖乳杆菌：酿酒酵母=3:1:0枯草芽孢杆菌：鼠李糖乳杆菌：酿酒酵母=3:1:1c）制备软颗粒饲料将步骤b）的初始发酵液与灭菌水按照1:9混合均匀后得到软颗粒发酵液，然后将软颗粒发酵液加入基础饲料中待基础饲料将软颗粒发酵液完全吸收、混合后分装于单向通气发酵袋中，抽真空后封口，30°C下发酵12d，即得到三组发酵软颗粒饲料（1:0:0组、3:1:0组、3:1:1组）即得到相应的软颗粒饲料：其中，基础饲料与软颗粒发酵液的料液比为1:0.3～0.4。d）功能验证发酵菌种抗海豚链球菌性能：以海豚链球菌为指示菌，采用牛津杯法（琼脂扩散法）（GB/T38483-2020）抑菌实验对待测菌株D7-HSJ9进行抑菌实验检测。具体操作为：先在平板中倒一层LB固体培养基，待凝固后将活化好的海豚链球菌病原菌液（OD600=0.5-0.65）吸取500μL加入到平板上，再倒入未凝固的LB固体培养基将指示菌液混匀；用无菌镊子夹取灭菌牛津杯放入未凝固的培养基上进行打孔，待培养基凝固后，用无菌镊子拔出牛津杯，无菌接种环挑出孔内琼脂块。将200μL枯草芽孢杆菌D7-HSJ9菌液放入牛津杯中，以无菌PBS作为阴性对照，将加完样的培养基正置培养于28℃培养箱12～16h，测量抑菌圈的直径。根据抑菌圈直径计算抑制率。结果如表6所示。表6发酵菌种对海豚链球菌的抑制活性统计实验分组抑菌圈直径（mm）抑制率（I）1发酵菌种14.581.3%215.188.8%314.783.8%空白对照8.0将步骤c)制备的三组软颗粒饲料，烘干研碎后各称取30g，以过量乙酸乙酯（料液比=1:3～4）进行有机萃取，萃取时间为2d，萃取结束后以滤纸进行固液分离；取有机相进行旋蒸浓缩，得到浓缩液，将浓缩液进行定容后得到浓缩标准液；以普通商品饲料同条件得到的萃取浓缩液为对照组。以两组萃取液进行抑菌实验，指示菌为海豚链球菌，以乙酸乙酯作为空白对照，50μg/mL氯霉素作为阳性对照，以滤纸片法进行抑菌实验，检测三组发酵软颗粒饲料对海豚链球菌的抑菌活性。滤纸片法抑菌实验具体操作为：取活化好的海豚链球菌100μL，涂布于LB固体平板，将灭菌滤纸片贴在涂有海豚链球菌的LB固体平板上，将待测样品滴加到滤纸片上（每个滤纸片上样5μL），倒置于28°C培养箱中，培养12h，测量抑菌直径。结果如表7所示。表7“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”对海豚链球菌的抑制活性统计实验分组抑菌圈直径mm1:0:0组143:1:0组93:1:1组11商品饲料0乙酸乙酯0氯霉素11由表7可以看出，三组发酵软颗粒饲料经萃取后，得到的活性物质浓缩液对海豚链球菌均有抑菌活性，且（1:0:0）组抑菌效果高于50μg/mL的氯霉素对海豚链球菌的抑菌活性，表明抗鱼类链球菌发酵软颗粒饲料含有对海豚链球菌有抑菌效果的活性物质。进一步地将制备的抗鱼类链球菌发酵软颗粒饲料投喂鱼类进行养殖实现，具体方法如下：将以上三组发酵软颗粒饲料用于饲喂罗非鱼，具体的养殖试验为：试验用鱼为尼罗罗非鱼，初始体重为5.24g+0.26g，设置3组平行，每组60尾鱼，养殖试验为28d，试验结束后，对各组罗非鱼用海豚链球菌进行攻毒，检测各组罗非鱼抗病效果。其中，实验组为发酵软颗粒饲料包括1:0:0组、3:1:1组和3:1:0组，对照组为普通商品饲料。在养殖实验结束后，每组取30尾鱼进行海豚链球菌攻毒实验，检测发酵软颗粒饲料对罗非鱼存活率的影响。具体方法为：将致病菌海豚链球菌进行三次活化，取第三次活化好的海豚链球菌（1×108CFU/ml）进行攻毒试验：实验分为五组：空白组（对照组鱼注射PBS）、阴性对照组（对照组鱼注射海豚链球菌）、（1:0:0）组、（3:1:1）组和（3:1:0）组，阴性对照组和三组发酵软颗粒饲料组注射海豚链球菌的量为50μL/条，空白组注射等量的无菌PBS，攻毒结束后统计7d内各组鱼的存活情况。结果如图1所示。通过图1可以看出，攻毒后7d内，三组发酵软颗粒均体现出对海豚链球菌的抗病能力，各发酵软颗粒饲料组罗非鱼存活率分别为（1:0:0）组60%、（3:1:1）组56.67%和（3:1:0）组40%，相比于对照组，免疫保护率分别提升了42.86%、38.10%和14.29%。表明发酵软颗粒饲料可以提高罗非鱼对海豚链球菌的抗病能力，并且以枯草芽孢杆菌沙漠亚种单独发酵对罗非鱼抗海豚链球菌效果最好。图1发酵饲料和发酵菌种抗海豚链球菌性能实验验证4.卫生指标按GB13078《饲料卫生标准》的要求设定黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、总砷、铅、汞、镉、霉菌总数、大肠菌群、致病菌等9项指标，具体指标要求见表8。为保证锁定各项指标，抽检了5家不同企业抗鱼类链球菌病发酵软颗粒饲料共50批次数据，检测结果汇总表9。表8卫生指标项目指标黄曲霉毒素B1/（μg/kg）≤20.0玉米赤霉烯酮/（mg/kg）≤0.5总砷/（mg/kg）≤10.0铅/（mg/kg）≤5.0汞/（mg/kg）≤0.5镉/（mg/kg）≤1.0霉菌总数/（CFU/g）＜2.0×104大肠菌群/（MPN/100g）＜300致病菌不应检出表9“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”卫生指标抽检数据序号检验项目黄曲霉毒素B1μg/kg玉米赤霉烯酮mg/kg总砷mg/kg铅mg/kg汞mg/kg镉mg/kg霉菌总数CFU/g大肠菌群MPN/100g致病菌企业批次1企业113.30.122.151.360.110.23620086未检出225.20.081.690.920.070.18410053未检出332.70.153.061.750.140.319100124未检出447.30.060.880.630.050.09280037未检出551.90.214.222.180.190.4211300168未检出664.60.091.371.050.080.16570072未检出776.80.172.841.520.130.27790095未检出883.90.040.560.410.030.07190021未检出998.20.233.612.430.220.3613600193未检出10102.40.111.931.220.10.21480064未检出11企业214.40.071.240.870.060.14360049未检出1226.20.183.381.960.180.3310500142未检出1331.70.050.720.540.040.08210028未检出1447.70.132.461.410.120.24680081未检出1553.50.194.052.270.20.412700179未检出1665.90.081.530.980.070.17440058未检出1772.90.162.711.640.150.298300106未检出1889.30.030.480.360.020.06150016未检出1994.80.223.892.090.170.3511900157未检出20103.10.151.821.150.090.2530069未检出21企业315.40.142.281.320.110.22650078未检出2222.30.061.160.790.050.13320043未检出2337.10.213.542.310.190.3812100164未检出2441.50.090.950.670.080.1270034未检出2558.70.184.172.460.160.4114200201未检出2664.20.041.450.910.030.15400051未检出2773.70.122.631.580.10.26740092未检出2886.40.230.640.450.210.07180023未检出2992.80.073.121.790.060.39600131未检出30105.00.151.741.080.140.19590074未检出31企业413.50.112.041.270.090.21610083未检出3227.90.051.310.840.040.12340047未检出3334.50.23.762.140.180.3411200152未检出3442.20.080.830.590.070.09240031未检出3558.40.174.312.510.150.4313800196未检出3665.70.131.661.120.120.18510066未检出3773.10.062.951.690.050.288700113未检出3881.80.020.510.330.010.05140012未检出3996.70.243.432.030.20.3710800148未检出40104.30.091.871.190.080.22460061未检出41企业515.90.142.391.440.130.25690090未检出4222.60.071.210.810.060.14310041未检出4337.50.193.672.220.170.3611600161未检出4443.30.050.770.520.040.08220029未检出4559.10.204.092.380.190.413100185未检出4664.90.151.581.030.090.16430055未检出4773.90.162.771.610.140.287800102未检出4881.40.030.450.310.020.04130014未检出4996.20.123.241.840.110.319300126未检出50105.40.181.981.250.160.23550071未检出根据抽样检测结果，对“含海豚链球菌抑制活性芽孢杆菌发酵软颗粒饲料”的卫生指标分析如下：（1）黄曲霉毒素B1由表8可知，抽检数据中黄曲霉毒素B1最大值为9.3μg/k