食品安全快速检测（第二版）课件 模块二 项目七 保健食品非法添加药物的快速检测

模块二项目七保健食品非法添加药物的快速检测食品安全快速检测技术模块介绍

近些年，掺伪现象也一直困扰着保健食品产业、市场及消费的良性发展，其中在保健食品中添加违禁药物是目前掺伪主要手段之一。在利益的驱动下，为了突出产品的功能效果，一些不法厂商在保健食品中滥加药物，并在广告中非法宣传疗效，欺骗和诱使消费者购买服用。不仅严重危害了消费者的身体健康，而且极大地损害了我国保健食品产业形象。我国保健食品中违禁药物的添加具有以下特点：(1)在保健食品中添加治疗药物、不用作治疗或已被淘汰的药物。(2)在保健食品中添加治疗用药的结构改造物。(3)在保健食品中混合添加多种治疗药物。(4)添加天然植物化学品。

建立高效准确、简便易行的方法进行保健食品的非法添加药物的检测，更适合基层检验部门及现场监督的实际需求。知识要求能力要求素质要求应用快速检测技术进行保健食品非法添加药物的检测；熟练分析保健食品非法添加药物快速检测结果。了解保健食品非法添加药物快速检测的优点及意义；了解保健食品非法添加药物快速检测技术的进展。树立高度的食品安全意识，保健食品非法添加药物的速测是保障食品安全的重要环节之一，通过相关检测，可以及时发现并排除潜在的安全隐患，提高消费者对保健品的信心；加强对食品安全相关法律法规与标准的学习，提高对食品安全风险的识别和评估能力，积极探索和应用先进的食品安全技术和管理方法，为保障食品安全做出贡献。任务一任务二任务三本项目内容保健食品非法添加降糖类药物的快速检测保健食品非法添加减肥类药物的快速检测保健食品非法添加壮阳类药物的快速检测保健食品非法添加降糖类药物的快速检测任务一任务案例：

2022民生领域案件查办“铁拳”行动典型案例（第七批）——四川省宜宾市江安县市场监管局查处江安镇盛琦食品店经营含“氨氯地平”“盐酸二甲双胍”等药品的食品案2021年12月2日，江安县市场监管局根据举报对江安县江安镇盛琦食品店进行检查，发现其正在销售113盒标称具有降压、降血糖功效的食品“金盛康牌福安之胶囊”“堂恒牌好康舒胶囊”和“净宝牌圣健元胶囊”，均无法查询到保健食品批准文号。经送检，上述产品检出药品“氨氯地平”和“盐酸二甲双胍”。经查，该店以微信联系的方式，在“168保健品网”推销以上产品，主要销售给有高血压、糖尿病等疾病治疗需求的老年群体。自2021年至案发，当事人共计购进470盒，已销售357盒，总货值10.17万元。2022年3月8日，四川省宜宾市江安县市场监管局依法对江安镇盛琦食品店经营非法添加药品“氨氯地平”、“盐酸二甲双胍”食品的违法行为进行查处，因当事人行为涉嫌构成犯罪，案件已移送公安机关。任务引入

任务描述

某检测实验室收到一批保健食品样品，客户要求采用胶体金免疫层析法对保健食品中罗格列酮和格列苯脲实施快速检测，并进行结果报告，请根据上述要求完成相应检测工作。任务解析一、常见安全问题

声称辅助降血糖（调节血糖）功能保健食品中可能非法添加的物质有：甲苯磺丁脲、格列苯脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲、马来酸罗格列酮、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍。

国家禁止在保健食品、中成药中添加降糖类药物，而不法商家为了达到疗效，赚取暴利，非法在健康类产品中添加降糖类物质。案例中宣称的降血糖功效产品，主要向老年群体销售，销售此类产品的卖家，往往宣称无添加、纯天然，骗取老年人信任。老年患者食用含有此类药品的食品，不但贻误疾病治疗，还会发生药品不良反应，严重时危害生命。因此，对保健食品中非法添加降糖药物的快速分析具有现实意义。任务解析二、检测依据GB16740-2014食品安全国家标准保健食品KJ201902保健食品中罗格列酮和格列苯脲的快速检测胶体金免疫层析法任务实施1、检测准备市售罗格列酮和格列苯脲胶体金免疫层析试剂盒，移液器、计时器、称量器，涡旋仪，罗格列酮标准溶液，格列苯脲标准溶液2、原理分析采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的罗格列酮和格列苯脲等物质经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中罗格列酮和格列苯脲成分进行定性判定。一、保健食品中罗格列酮和格列苯脲快速检测（胶体金法）3、操作步骤（1）样品处理液体样品充分混匀，固体样品充分粉碎混匀。（2）样品提取和净化①液体基质

量取0.5mL±0.02mL试样于15mL离心管中，加入4.0mL缓冲液（Tris碱-盐酸溶液：称取12.1gTris碱（三羟甲基氨基甲烷），加适量水溶解，混匀，用上述盐酸溶液调节pH至8.0，加入5.0g吐温-20搅拌均匀，定容至1000mL。），涡旋混合30s，作为待测液。②固体基质

准确称取试样0.5g±0.01g于15.0mL离心管中，加1.0mL甲醇，涡旋30s，4000rpm离心2min或静置2min。取250.0µL上清液于2.0mL离心管中，加入750.0µL缓冲液（Tris碱-盐酸溶液），涡旋混合30s，作为待测液。一、保健食品中罗格列酮和格列苯脲快速检测（胶体金法）（3）样品检测

检测卡与金标微孔测定步骤：吸取200.0µL上述待测液于金标微孔中，上下抽吸5-10次使混合均匀。室温温育5min，将反应液全部加入到检测卡的加样孔中，将金标微孔中全部溶液滴加到检测卡上的加样孔中，温育5min，进行结果判定。（4）质控试验

每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。

空白试验：准确称取固体空白试样0.5g±0.01g或量取液体空白试样0.5mL±0.02mL于15mL离心管中，按试样同法操作。

加标质控试验：准确称取固体空白试样0.5g±0.01g或量取液体空白试样0.5mL±0.02mL于15mL离心管中，加入适量罗格列酮标准溶液，使罗格列酮参考物质浓度为1.0µg/g或1.0µg/mL，与试样同法操作。

准确称取固体空白试样0.5g±0.01g或量取液体空白试样0.5mL±0.02mL于15mL离心管中，加入适量格列苯脲标准溶液，使格列苯脲参考物质浓度为1.0µg/g或1.0µg/mL，与试样同法操作。（5）结果判定无效：控制线（C线）不显色，表明不正确操作或试纸条无效。阴性（-）：控制线（C线）显色，检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当。阳性（+）：控制线（C线）显色，检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色明显浅或检测线（T线）不显色。

空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。（6）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

标准溶液批号

试剂盒名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

说明1.当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）本方法检出限为固体样品1.0μg/g，液体样品1.0μg/mL。灵敏度≥95%。特异性≥90%。（2）本方法参比标准为食品补充检验方法BJS201710《保健食品中75种非法添加化学药物的检测》、药品检验补充检验方法2009029《降糖类中成药中非法添加化学药品补充检验方法》。（3）本方法使用罗格列酮试剂盒可能与吡格列酮存在交叉反应；格列苯脲试剂盒可能与格列美脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、甲苯磺丁脲存在交叉反应；当结果判定为阳性应对结果进行确证。二、保健食品中双胍类药物的快速检测（仪器法）1、检测准备

市售双胍类药物快检试剂盒，移液器、计时器、称量器，离心管，称量纸，胶头滴管，过滤器，具有分光光度模块的快检综合分析仪。2、原理分析

双胍类药物经有机溶剂提取，碱溶液萃取后，其化学成分与亚硝酰铁氰化钠-铁氰化钾-氢氧化钠混合溶液反应生成氢氧化铁，显示红褐色，浓度越高显色越深。经仪器可进行半定量测定。3、操作步骤（1）样品处理

固体剂型：取一次服用量充分碾碎混匀，准确称取0.1g，加入提取液（有机溶剂，根据试剂盒要求现配）2mL，振荡1min，静置2min。取一套注射器拔出活塞，注射器下端置于5mL离心管口。向注射器中倒入样品提取液上清，加上活塞挤压收集滤液至5mL离心管中。完毕，向此离心管中加入1.8mL纯净水，盖上管盖，上下颠倒混合数次，静置5min分层。上层液体待测。

水剂：直接取100L样品液于2mL提取液（有机溶剂）中混匀，静置1min，加入1.8mL纯净水，盖上管盖，上下颠倒混匀数次，静置5min分层，上层液体待测。

软胶囊剂：若内含物为液体则同水剂一样处理；若内含物为半固体型则同固体剂型一样处理。空白对照：直接向2mL提取液中加入1.8mL纯净水，上下颠倒混匀数次，静置分层。上层液体待测。（2）样品检测

对照测试：取一个2mL离心管，用胶头滴管吸取空白对照上清液至2mL刻度线。加入100L显色剂（亚硝酰铁氰化钠-铁氰化钾-氢氧化钠混合溶液，根据试剂盒要求现配），摇匀，反应5min。上机进行对照检测。

样品测试：取一个2mL离心管，用胶头滴管吸取样品待测上清液至2mL刻度线。加入100L显色剂（亚硝酰铁氰化钠-铁氰化钾-氢氧化钠混合溶液，根据试剂盒要求现配），摇匀，反应5min。上机进行样品检测。（3）结果判定样品中双胍类的含量（mg/kg）：固体剂型：仪器所示的浓度值×36.7

液体剂型：仪器所示的浓度值×22（4）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

试剂盒名称/编号

仪器名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

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说明

检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）部分样品显色过程中会出现明显褪色现象，此类样品则可在加入显色剂后2min左右即倒入比色皿进行显色。如蜂胶糖脂舒软胶囊。（2）部分保健食品提取液过滤后若仍然浑浊，则考虑接上过滤器后过滤。（3）显色剂需现配现用，如出现沉淀或者变色，请勿使用。（4）在显色剂制备过程中，可以进行样品的前处理。（5）显色剂配制瓶可洗净后重复利用，如显色剂配置时温度较低，可选择在20~40℃的温度下加速其变色反应。

（6）试剂用完后，应旋紧瓶盖，密封至塑料袋中丢弃。如遇到试剂沾染皮肤或误入眼中，应立即用大量清水冲洗。三、保健食品中磺酰脲类药物的快速检测（仪器法）1、检测准备

市售磺酰脲类药物快检试剂盒，移液器、计时器、称量器，离心管，注射器，过滤器，铅笔，紫外灯。2、原理分析

利用样品中的磺酰脲类（格列齐特、格列吡嗪）在层析纸上固定相和流动相间产生的吸附作用不同，通过与标准溶液在层析纸上比移值的差异来直接判断是否存在磺酰脲类。3、操作步骤（1）样品处理

试剂盒中提供的试剂A瓶中已存在用于药品提取的有机溶剂。

颗粒、片剂、丸剂、硬胶囊：压碎成粉末或直接称取0.5g于试剂A瓶中；

软胶囊：用剪刀剪开胶囊壳，挤出后直接称取0.5g内容物于试剂A瓶中。

液体制剂：直接取0.5mL于试剂A瓶中。拧紧试剂A瓶瓶盖，振荡1min，使试剂和样品充分混匀，静置2~3min使上层液澄清。用注射器取少量上清液，经过滤器过滤，滤液待测。2）样品检测

用铅笔在硅胶板上距离底端约0.5cm轻轻画一条线，然后在线上点两个小点。

用毛细管吸取反应管中的液体（2~3s），将毛细管对准硅胶板所画小点，垂直与反应板接触（2~3s）；再用毛细管吸取参照品中的液体（2~3s），将毛细管对准硅胶板所画小点，垂直与反应板接触（2~3s），待点样液挥干；将试剂B倒在小烧杯中，将硅胶板竖直插入小烧杯中，爬板时间为90s。最后使用紫外灯在阴暗环境下近距离照射硅胶板。（3）结果判定使用紫外灯在阴暗环境下近距离照射的硅胶板，若位置A或B有点存在即说明有磺酰脲类物质（除A和B位置之外，其他位置的点与本次测试无关）。样品中磺酰脲类检出限1g/kg。磺酰脲类检测结果判定图（4）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

标准溶液批号-试剂盒名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

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说明1、保证爬板均匀，若点爬歪需重新点板。2、若样品在A或B点处不出现，但在A或B点上下2mm之内出现，需重新点板确定。检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）部分样品显色过程中会出现明显褪色现象，此类样品则可在加入显色剂后2min左右即倒入比色皿进行显色。如蜂胶糖脂舒软胶囊。（2）部分保健食品提取液过滤后若仍然浑浊，则考虑接上过滤器后过滤。（3）显色剂需现配现用，如出现沉淀或者变色，请勿使用。（4）在显色剂制备过程中，可以进行样品的前处理。（5）显色剂配制瓶可洗净后重复利用，如显色剂配置时温度较低，可选择在20~40℃的温度下加速其变色反应。（6）试剂用完后，应旋紧瓶盖，密封至塑料袋中丢弃。如遇到试剂沾染皮肤或误入眼中，应立即用大量清水冲洗。保健食品中非法添加减肥类药物快速检测任务二任务案例：“百日行动”微商热卖减肥保健食品竟含违禁药物2022年2月，浦东警方成功侦破一起销售有毒有害保健食品案。“不节食不运动，只需要每天一粒，就能轻松月瘦30斤。”这款在朋友圈热卖的减肥保健食品，竟然含有违禁添加物“西布曲明”，让不少希望拥有“完美身材”的女性深陷其中。犯罪嫌疑人张某喜、徐某云等人于2020年起以非法牟利为目的，通过各互联网平台建立销售网络、招募销售代理，销售含有违禁添加物“西布曲明”的减肥类保健食品。这些减肥“神药”实际上就只是些木薯粉、荷叶粉、面粉等混合了一定比例的“西布曲明”，虽有一定减肥效果，但对身体的危害却是实实在在的。据专家表示，长期服用会扰乱人的内分泌，增加严重心脑血管风险，对神经系统、肝肾功能都有严重危害。。任务引入

任务描述

某检测机构承担一批保健食品样品检测任务，使用快速检测方法筛查该批宣称有助于控制体内脂肪保健食品中是否含有非法添加药物西布曲明，并进行结果报告。请根据上述要求完成相应检测工作。任务解析一、常见安全问题减肥类保健食品因具有保健和美体双重功效在各类保健产品中独领风骚，成为热销的重要品类。纵观减肥类保健食品市场种类多样，包括各类减肥茶、减肥咖啡、减肥饼干及各品已成为近些年发展最快的朝阳产业。正是由于这些巨额利润的驱使，一些不法厂商铤而走险，利用消费者急于减肥的心理，置国家法律法规于不顾，在减肥类保健食品中添加许多化学药物。在保健食品中非法添加化学药物随意性大，剂量不准确，且标签上未作说明，往往导致消费者长期、超量服用引起毒性反应，严重甚至危及生命。任务解析二、检测依据GB16740-2014食品安全国家标准保健食品T/JSAIA010-2023食品中非法添加物西布曲明的快速检测任务实施1、检测准备市售西布曲明胶体金免疫层析试剂盒（苏州诚检生物科技有限公司），称量器，移液器，计时器，离心机，西布曲明标准溶液。2、原理分析本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中西布曲明经提取后，西布曲明与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原—BSA偶联物的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中西布曲明进行定性判定。一、保健食品中西布曲明的快速检测（胶体金法）3、操作步骤（1）样品提取称取0.2g（mL）待测样品于15mL离心管中，加入2.0mL配套提取剂（Tris碱-盐酸溶液），充分震荡混匀30s，4000rpm离心3min；吸取离心后上清液0.1mL于1.5mL离心管中，加入0.9mL配套提取剂，手摇混匀，此混合液体即为待检液。3、操作步骤（2）样品检测

使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温（20℃-30℃），水平放置于观察者正面；吸取待检液120.0µL(滴管约5滴)于金标微孔中，用滴管轻柔吹打30s，完全溶解金标微孔底部红色物质，水平静置，等待反应2分钟，吸取金标微孔内红色溶液，轻柔吹打10s后，全部滴加到检测卡加样孔（S）中，加样后开始计时。结果应在5-8min读取，其它时间结果判读无效。（3）质控试验

每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。

空白试验：直接利用配套提取剂（Tris碱-盐酸溶液），按待检液同法操作。

加标质控试验：吸取西布曲明标准溶液0.1mL于离心管中，加入配套提取剂（Tris碱-盐酸溶液）适量，使西布曲明浓度为20.0mg/kg，按待检液同法操作。（4）结果判定无效：质控区（C）未出现紫红色条带。阴性（-）：两条紫红色条带出现。

阳性（+）：T线显色比C线浅或T线无显色

空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。（5）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

标准溶液批号

试剂盒名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

说明1.当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）本方法西布曲明检测卡检出限为20.0mg/kg，检测卡请在保质期内一次性使用。（2）尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面.（3）自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。1、检测准备

市售酚酞胶体金免疫层析试剂盒（苏州诚检生物科技有限公司），称量器，移液器，计时器，离心机，2、原理分析

本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中酚酞经提取后，酚酞与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原—BSA偶联物的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中酚酞进行定性判定。二、保健食品中酚酞的快速检测（胶体金法）3、操作步骤（1）样品提取颗粒、片剂、丸剂：压碎成粉末称取0.2g于5mL离心管中；硬胶囊：旋开胶囊壳，称取0.2g内容物于5mL离心管中；软胶囊：用剪刀剪开胶囊壳，挤出后直接称取0.2g内容物于5ml离心管中。液态药物：移取0.2mL待测样于5mL离心管中。向上述5mL离心管中加入配套稀释液4.0mL，剧烈振荡混匀1min（振幅为：120次/min），4000rpm离心3min，此离心管中的上清液即为待检液。（2）样品检测

使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温（20℃-30℃），水平放置于观察者正面；用吸取4-5滴（或120uL）待检液于金标微孔中，用滴管轻柔吹打30s，完全溶解金标微孔底部红色物质，水平静置，等待反应2min，吸取金标微孔内红色溶液，轻柔吹打10s后，全部滴加到检测卡加样孔（S）中，加样后开始计时。结果应在5-8min时读取，其它时间结果判读无效。（3）质控试验每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。空白试验：直接利用配套提取剂，按待检液同法操作。

加标质控试验：吸取酚酞标准溶液0.1mL于离心管中，加入配套提取剂适量，使酚酞浓度为0.5mg/kg，按待检液同法操作。（4）结果判定无效：质控区（C）未出现紫红色条带。阴性（-）：两条紫红色条带出现。

阳性（+）：T线显色比C线浅或T线无显色。

空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。（5）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

标准溶液批号

试剂盒名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

说明1.当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）本方法检测限为0.5mg/kg，2℃~30℃常温避光保存，切勿冷冻。检测卡需在保质期内一次性使用。（2）尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面。（3）自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。（4）要注意保证样品的新鲜，要注意避免因变质而造成的失效或污染。出现阳性结果时应按法定程序分瓶封装样品用于确证法检测。保健食品中非法添加镇静类药物快速检测任务三任务案例：上海市嘉定区查获一批非法添加西地那非的食品、保健品2023年8月，上海市嘉定区市场监管部门接到市民投诉举报，称在马陆镇某市场内某店购买了保健食品食用后心跳加速，感觉不舒服。监管部门立即对涉事商家开展现场监督执法。现场对涉事商家销售的老中医补肾丸、肾白金、植物草本伟哥、肾黄金四款食品进行“西地那非”快检，结果显示异常，遂对这四款食品予以扣押，并委托第三方机构进行检测。经检测，四款送检食品均含有西地那非成分，违反了《中华人民共和国食品安全法》的规定，已立案调查。任务引入

任务描述某检测机构协助承担某区保健食品专项监督抽检任务，需使用快速检测方法筛查该批宣称缓解疲劳类和改善睡眠类的保健食品中是否含有非法添加药物，并进行结果报告。请根据上述要求完成相应检测工作。任务解析一、常见安全问题

我国约有3亿人存在睡眠障碍问题。睡眠障碍会对人体造成不良影响，例如记忆力减退、免疫力低下；严重者，还会导致抑郁症、焦虑症、肥胖症等疾病的发生。因此，具有相应调理作用、副作用小、可长期服用的缓解疲劳类和改善睡眠类的保健食品受到消费者的青睐。

然而，品种较多，过热发展，使市场出现不法商家为牟利、追求效果，在保健食品中非法添加具有镇静安神作用的药物，消费者在不知情的情况下长期摄入，会对健康造成严重危害。任务解析二、检测依据GB16740-2014食品安全国家标准保健食品KJ201901保健食品中西地那非和他达拉非的快速检测胶体金免疫层析法KJ201903保健食品中巴比妥类化学成分的快速检测胶体金免疫层析法任务实施1、检测准备市售西地那非和他达拉非快速检测试剂盒，称量器，移液器，计时器，离心机，涡旋仪，西地那非标准溶液，他达拉非标准溶液。2、原理分析本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的西地那非和他达拉非等物质经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中西地那非和他达拉非成分进行定性判定。一、保健食品中西地那非和他达拉非的快速检测（胶体金法）3、操作步骤（1）样品处理液体样品充分混匀，固体样品充分粉碎混匀。（2）样品提取与净化

液体基质：量取0.5mL±0.02mL试样于15mL离心管中，加入4.0mL缓冲液（Tris碱-盐酸溶液：称取12.1gTris碱，加适量水溶解，混匀，用上述盐酸溶液调节pH至8.0，加入5.0g吐温-20搅拌均匀，定容至1000mL。），涡旋混合30s，作为待测液。（2）样品提取与净化固体基质：

检测西地那非：准确称取试样0.5g±0.01g于15mL离心管中，加1.0mL甲醇，涡旋30s，4000rpm离心2min或静置2min。取250.0µL上清液于2mL离心管中，加入750.0µL缓冲液（Tris碱-盐酸溶液），涡旋混合30s，作为待测液。

检测他达拉非：准确称取试样0.5g±0.01g于15mL离心管中，加1mL甲醇，涡旋30s，4000rpm离心2min或静置2min。取200.0µL上清液于15mL离心管中，加入3.0mL缓冲液（Tris碱-盐酸溶液），涡旋混合30s，作为待测液。（3）样品检测

吸取200.0μL上述待测液于金标微孔中，上下抽吸5-10次使混合均匀。室温温育5min，将反应液全部加入到检测卡的加样孔中，将金标微孔中全部溶液滴加到检测卡上的加样孔中，温育5min，进行结果判定。（4）质控试验

每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。

空白试验：准确称取固体空白试样0.5g±0.01g或量取液体空白试样0.5mL±0.02mL于15mL离心管中，与试样同法操作。

加标质控试验：准确称取固体空白试样0.5g±0.01g或量取液体空白试样0.5mL±0.02mL于15mL离心管中，加入适量西地那非标准溶液，使西地那非参考物质浓度为1.0µg/g或1.0µg/mL，与试样同法操作。

准确称取固体空白试样0.5g±0.01g或量取液体空白试样0.5mL±0.02mL于15mL离心管中，加入适量他达拉非标准溶液，使他达拉非参考物质浓度为1.0µg/g或1.0µg/mL，与试样同法操作。（5）结果判定无效：控制线（C线）不显色。阴性（-）：控制线（C线）显色，检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当。

阳性（+）：控制线（C线）显色，检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色明显浅或检测线（T线）不显色。

空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。（6）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

标准溶液批号

仪器名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

说明1.当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）本方法检出限为固体样品1.0μg/g，液体样品1.0μg/mL。灵敏度≥95%。特异性≥90%。（2）本方法参比标准为食品补充检验方法BJS201710《保健食品中75种非法添加化学药物的检测》、药品检验补充检验方法2009030《补肾壮阳类中成药中PDE-5型抑制剂的快速检测方法》。（3）本方法使用西地那非试剂盒可能与那莫西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、伪伐地那非、伐地那非、硫代艾地那非存在交叉反应；他达拉非试剂盒可能与氨基他达拉非、去甲基他达拉非存在交叉反应；当结果判定为阳性应对结果进行确证。1、检测准备市售那非类快筛试剂盒（广东达元绿洲食品安全科技股份有眼公司），称量器，移液器，计时器，离心机，水浴锅。2、原理分析

本方法采用那非类药物与显色剂反应出现颜色变化，来进行补肾壮阳类中成药、抗疲劳类保健食品以及其他标示上述功能的健康产品中那非的快速检测。二、保健食品中那非类药物的快速检测（比色法）3、操作步骤（1）样品处理试剂A瓶中已放入那非类药物提取剂，不同类型的样品按以下方法加入到试剂A瓶内，拧紧瓶盖后剧烈振摇约1分钟(丸剂剧烈振摇2分钟)，静置30s，试剂A瓶中溶液即为待测样品。硬胶囊：旋开胶囊壳，取约1/2粒内容物。软胶囊：用剪刀剪开胶囊壳，挤出约1/2粒内容物。片剂：压碎成粉末，取约1/2片量。丸剂、散剂等：取每次服用量的1/8左右，尽量压碎或剪碎。

液体水剂等：取0.5mL水剂。（2）样品检测

试剂盒配套注射器接上过滤器，倒入试剂A瓶的上层溶液约1mL,用活塞挤压，收集约0.5mL过滤样品液至反应管中。

向反应管中过滤样品液滴加试剂B（基质干扰消除剂）,边滴边摇，至紫红色在15秒内颜色不变。继续振摇反应管至紫红色褪去呈无色或浅黄色。向反应管中滴加2滴试剂C（显色剂）和2滴试剂D（检测剂）,摇匀后，观察反应管变化。（3）结果判定

阴性结果：反应管中试剂D颜色退去呈无色或浅蓝色，透明无沉淀或反应管中出现黄色沉淀或浑浊，将该反应管用沸水浴1min，沸水浴后反应管中变色，或沉淀溶解。

阳性结果：反应管中出现黄色沉淀或浑浊，将该反应管用沸水浴1min，沉淀或浑浊不变色不溶解。（4）结果报告抽样单编号

样品名称

样品状态

检测依据

检测项目

检测地点

标准溶液批号-试剂盒名称/编号

环境条件

样品编号样品质控检验结论平行1平行2空白对照加标对照

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说明1.本方法仅供定性筛查用。2.若加入试剂B后长时间不褪色，可重新取样前处理后，不滴加试剂B直接进行检测。若加入试剂B后出现浑浊或沉淀，则将反应管离心至澄清后取上清检测。3.滴加试剂C后，需尽快观察显色，显色时间长，体系会变蓝。检测人员/日期：

复核人员/日期：4、注意事项（1）本方法的标准溶液检出限小于0.10mg/mL,胶囊样品检出限为4mg/g,水剂样品检出限为2mg/mL。

（2）试剂B是为了消除基质干扰，提取液颜色越深，消耗试剂B的量越多，