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文档简介
抗体工程研发工程师考试试卷及答案抗体工程研发工程师考试试卷及答案一、填空题(共10题,每题1分)1.抗体的基本结构由两条重链和______组成。2.单克隆抗体技术的发明者是Kohler和______。3.抗体可变区的英文缩写是______。4.人源化抗体的核心技术是______移植。5.双特异性抗体可同时结合______个不同的抗原表位。6.抗体Fc段可介导ADCC和______等效应功能。7.噬菌体展示技术中常用的载体是______。8.嵌合抗体的可变区来自鼠源,恒定区来自______。9.ELISA中常用的酶标记物有HRP和______。10.抗体亲和力成熟的常用方法包括易错PCR和______。填空题答案:1.两条轻链2.Milstein3.V区4.CDR5.两6.CDC7.噬菌体8.人9.AP10.链改组二、单项选择题(共10题,每题2分)1.血清中含量最高的抗体类型是()A.IgGB.IgAC.IgMD.IgE2.杂交瘤技术中融合的细胞是B细胞与()A.T细胞B.骨髓瘤细胞C.成纤维细胞D.巨噬细胞3.人源化抗体相比鼠源抗体的最大优势是()A.亲和力更高B.免疫原性更低C.产量更高D.稳定性更好4.噬菌体展示技术筛选抗体的原理基于()A.抗原抗体特异性结合B.核酸杂交C.酶促反应D.细胞融合5.用于抗体亲和力成熟的技术是()A.RT-PCRB.链改组C.实时定量PCRD.限制性内切酶酶切6.抗体CDR区位于()A.重链恒定区B.轻链恒定区C.重链和轻链可变区D.铰链区7.介导ADCC效应的细胞是()A.B细胞B.T细胞C.NK细胞D.巨噬细胞8.嵌合抗体的恒定区来源于()A.小鼠B.人C.大鼠D.兔9.检测抗体特异性的常用方法是()A.WesternblotB.质谱C.测序D.流式细胞术10.双特异性抗体的设计目的是()A.提高亲和力B.同时结合两个靶点C.延长半衰期D.降低成本单项选择题答案:1.A2.B3.B4.A5.B6.C7.C8.B9.A10.B三、多项选择题(共10题,每题2分)1.抗体的功能区包括()A.VHB.CH1C.CH2D.CH32.单克隆抗体的特点有()A.特异性强B.纯度高C.可大量制备D.均一性好3.人源化抗体的方法包括()A.CDR移植B.表面重塑C.框架区突变D.全人源化4.抗体工程常用的表达系统有()A.大肠杆菌B.酵母C.哺乳动物细胞D.昆虫细胞5.影响抗体亲和力的因素有()A.抗原表位性质B.CDR区序列C.温度D.pH6.抗体的效应功能包括()A.ADCCB.CDCC.中和作用D.调理作用7.噬菌体展示技术中常用的外壳蛋白有()A.pIIIB.pVIIIC.pIID.pIV8.杂交瘤技术的关键步骤包括()A.免疫动物B.细胞融合C.阳性克隆筛选D.克隆化培养9.影响抗体稳定性的因素有()A.温度B.pHC.盐浓度D.蛋白酶10.双特异性抗体的构建方式有()A.化学偶联B.基因工程融合C.杂交瘤融合D.噬菌体展示多项选择题答案:1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.AB8.ABCD9.ABCD10.AB四、判断题(共10题,每题2分)1.抗体轻链分为κ和λ两种类型。()2.全人源抗体不会引起人体免疫反应。()3.杂交瘤细胞可无限增殖并分泌特异性抗体。()4.噬菌体展示技术只能筛选抗体可变区。()5.ADCC效应需要补体参与。()6.抗体亲和力越高,特异性越强。()7.嵌合抗体的可变区来自鼠源。()8.哺乳动物细胞表达的抗体可正确折叠和糖基化。()9.双特异性抗体只能结合两个相同的抗原表位。()10.抗体Fc段决定其效应功能。()判断题答案:1.√2.×3.√4.×5.×6.×7.√8.√9.×10.√五、简答题(共4题,每题5分)1.简述单克隆抗体的制备流程。2.什么是人源化抗体?其优势是什么?3.简述噬菌体展示技术筛选抗体的基本原理。4.抗体亲和力成熟的常用方法有哪些?简答题答案:1.单克隆抗体制备流程:①免疫动物:用抗原免疫小鼠,刺激B细胞产生特异性抗体;②细胞融合:将免疫后的B细胞与骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞;③筛选:用HAT培养基筛选融合成功的杂交瘤细胞;④克隆化:通过有限稀释法获得单克隆细胞株;⑤鉴定:检测抗体特异性和效价;⑥制备:体内腹水或体外培养获得单克隆抗体。2.人源化抗体是将鼠源抗体的CDR移植到人类抗体框架区的抗体。优势:①免疫原性显著降低,减少排斥反应;②半衰期较长,延长体内作用时间;③能更好介导ADCC、CDC等效应功能;④临床应用更安全,副作用少。3.噬菌体展示技术原理:将抗体基因片段插入噬菌体外壳蛋白基因,使抗体片段与外壳蛋白融合展示在噬菌体表面。将噬菌体库与目标抗原孵育,筛选结合的噬菌体,洗脱后扩增再筛选,重复几轮得到高亲和力抗体片段。4.抗体亲和力成熟常用方法:①易错PCR:引入随机突变构建突变库;②链改组:重链和轻链基因随机组合;③CDR区定向突变:优化结合位点;④噬菌体展示筛选:从突变库中筛选高亲和力变体。六、讨论题(共2题,每题5分)1.抗体工程在肿瘤治疗中的应用及面临的挑战。2.比较不同表达系统在抗体生产中的优缺点。讨论题答案:1.抗体工程在肿瘤治疗中的应用:①单克隆抗体:如利妥昔单抗,介导ADCC/CDC杀伤肿瘤;②双特异性抗体:如blinatumomab,同时结合肿瘤和T细胞激活杀伤;③ADC:如曲妥珠单抗-DM1,精准递送细胞毒性药物。挑战:①肿瘤异质性导致靶向不足;②耐药性产生;③生产成本高;④免疫原性问题。需优化抗体设计提高疗效。2.不同表达系统优缺点:①大肠杆
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