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文档简介
一种利用大肠杆菌发酵重组人源化胶原蛋本发明公开了一种利用大肠杆菌发酵重组领域。本申请制备的重组人源化III型胶原蛋白杆菌发酵表达获得所述重组人源化III型胶原蛋白。本申请的人源化III型胶原蛋白能显著提升21.一种重组人源化III型胶原蛋白，其特征在于，所述胶原蛋白的氨基酸序列分别如2.一种编码权利要求1所述的重组人源化3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列分别如4.一种包含权利要求2_3任一项所述的5.一种包含根据权利要求4所述的重组表达载体或者表达权利要求1所述的胶原蛋白7.权利要求1所述的重组人源化III型胶原蛋白8.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括根据权利要求1任一所述的重组人源化III型胶原蛋白，或根据权利要求2_3中任一项所述的核酸分子编码的重组人源化III型胶10.权利要求8_9任一项所述的组合物在制备用于促进细胞黏附、促进细胞增殖和/或3一种利用大肠杆菌发酵重组人源化胶原蛋白的方胞内生物资源被大量占用的情况下，大肠杆菌必然会对异源性蛋白质表达进行相应的调因工程菌株对制备高质量的类人胶原蛋白具[0005]本发明所要解决的技术问题是利用基因工程技术重组表达一种新的重组人源化本发明提供一种重组人源化III型胶原蛋白，所述胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ4[0010]本发明还提供一种包含根据所述重组表达载体或者表达所述胶原蛋白的宿主细所述的核酸分子编码的重组人源化III型胶原蛋白，或由所述的重组表达载体表达的重组[0019]本发明提供了重组人源化III型胶原蛋白在制备用于促进细胞黏附、促进细胞增本发明的重组人源化III型胶原蛋白由多个重复单元串联形成，其重复单元来源5组人源化III型胶原蛋白具有良好的促进细胞黏附、促进细胞增殖和/或促进伤口愈合功含、由其组成和基本上由本文描述的必要元素和限制项以及本文描述的任一的附加的或任III型的序列是NCBI参照序列：KAI4037253.1(SEQIDNo.12)，参见https://MMSFVQKGSWLLLALLHPTIILAQQEAVEGGCSHLGQSYADRDVWKPEPCQICVCDSGSVLCDDIICDDQELDCPNPEIPFGECCAVCPQPPTAPTRPPNGQGPQGPKGDPGPPGIPGRNGDPGIPGQPGSPGSPGPPGICESCPTGPQNYSPQYDSYDVKSGVAVGGLAGYPGPAGPPGPPGPPGTSGHPGSPGSPGYQGPPGEPGQAGPSGPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGPAGIPGFPGMKGHRGFDGRNGEKGETGAPGLKGENGLPGENGAPGPMGPRGAPGERGRPGLPGAAGARGNDGARGSDGQPGPPGPPGTAGFPGSPGAKGEVGPAGSPGSNGAPGQRGEPGPQGHAGAQGPPGPPGINGSPGGKGEMGPAGIPGAPGLMGARGPPGPAGANGAPGLRGGAGEPGKNGAKGEPGPRGERGEAGIPGVPGAKGEDGKDGSPGEPGANGLPGAAGERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAPGPAGPRGAAGEPGRDGVPGGPGMRGMPGSPGGPGSDGKPGPPGSQGESGRPGPPGPSGPRGQPGVMGFPGPKGNDGAPGKNGERGGPGGPGPQGPP6GKNGETGPQGPPGPTGPGGDKGDTGPPGPQGLQGLPGTGGPPGENGKPGEPGPKGDAGAPGAPGGKGDAGAPGERGPPGLAGAPGLRGGAGPPGPEGGKGAAGPPGPPGAAGTPGLQGMPGERGGLGSPGPKGDKGEPGGPGADGVPGKDGPRGPTGPIGPPGPAGQPGDKGEGGAPGLPGIAGPRGSPGERGETGPPGPAGFPGAPGQNGEPGGKGERGAPGEKGEGGPPGVAGPPGKDGTSGHPGPIGPPGPRGNRGERGSEGSPGHPGQPGPPGPPGAPGPCCGGVGAAAIAGIGGEKAGGFAPYYGDEPMDFKINTDEIMTSLKSVNGQIESLISPDGSRKNPARNCRDLKFCHPELKSGEYWVDPNQGCKLDAIKVFCNMETGETCISANPLNVPRKHWWTDSSAEKKHVWFGESMDGGFQFSYGNPELPEDVLDVQLAFLRLLSSRASQNITYHCKNSIAYMDQASGNVKKALKLMGSNEGEFKAEGNSKFTYTVLEDGCTKH白或SEQIDNo.12中的其他序[0033]COL_HR_2：GSPGYQGPPGEPGQAGPSGPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGP[0034]COL_HR_3：GESGRPGPPGPSGPRGQPGVMGFPGPKGNDGAPGKNGERGGPGGPGPQGPPGKNGETGPQGPPGPTGPGGDKGDTGPPGPQGLQGLPGTGGPPGENGKPGEPGPKGDAGAPGAPGGKGDAGAPGER（SEQIDGQGPQGPKGDPGPPGIPGRNGDPGIPGQPGSPGSPGPPGICGQGPQGPKGDPGPPGIPGRNGDPGIPG[0036]COL_HR_111的DNA序列如下：GGCCAGGGCCCGCAGGGCCCGAAAGGCGATCCGGGCCCGCCGGGCATTCCGGGCCGCAACGGCGATCCGGGCATTCCGGGCCAGCCGGGCAGCCCGGGCAGCCCGGGCCCGCCGGGCATTTGCGGCCAGGGCCCGCAGGGCCCGAAAGGCGATCCGGGCCCGCCGGGCATTCCGGGCCGCAACGGCGATCCGGGCATTCCGGGCCAGCCGGGCAGCCCGGGCAGCCCGGGCCCGCCGGGCATTTGCGGCCAGGGCCCGCAGGGCCCGAAAGGCGATCCGGGCCCGCCGGGCATTCCGGGCCGCAACGGCGATCCGGGCATTCCGGGCCAGCCGGGCAGCCCGGGCAGC序列如下：GGTCAGGGTCCACAAGGCCCGAAAGGCGATCCTGGTCCGCCAGGCATTCCGGGCCGTAACGGTGATCCGGGCATCCCTGGCCAGCCGGGCTCTCCGGGTTCCCCTGGTCCGCCGGGTATTTGTGGCCAGGGTCCTCAGGGCCCAAAAGGTGATCCTGGTCCGCCTGGTATCCCGGGCCGCAACGGTGATCCTGGCATCCCGGGCCAGCCGGGTTCCCCGGGTTCCCCGGGCCCGCCAGGCATCTGCGGTCAGGGTCCACAGGGCCCAAAGGGTGACCCGGGTCCACCGGGTATTCCGGGTCGCAATGGTGATCCGGGTATTCCGGGCCAGCCAGGTTCTCCTGGCTCTCCGGGTCCGCCGGGTATCTGC7GSPGYQGPPGEPGQAGPSGPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGPAGIPGFPGMKGHRGSPGYQGPPGEPGQAGPSGPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGPAGIPGFPGMKGHRGSPGYQGPPGEPGQAGPSGPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGPAGIPGFPGMKGHR（SEQ[0039]COL_HR_222的DNA序列如下：GGCAGCCCGGGCTATCAGGGCCCGCCGGGCGAACCGGGCCAGGCGGGCCCGAGCGGCCCGCCGGGCCCGCCGGGCGCGATTGGCCCGAGCGGCCCGGCGGGCAAAGATGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCGCCCGGGCGAACGCGGCCTGCCGGGCCCGCCGGGCATTAAAGGCCCGGCGGGCATTCCGGGCTTTCCGGGCATGAAAGGCCATCGCGGCAGCCCGGGCTATCAGGGCCCGCCGGGCGAACCGGGCCAGGCGGGCCCGAGCGGCCCGCCGGGCCCGCCGGGCGCGATTGGCCCGAGCGGCCCGGCGGGCAAAGATGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCGCCCGGGCGAACGCGGCCTGCCGGGCCCGCCGGGCATTAAAGGCCCGGCGGGCATTCCGGGCTTTCCGGGCATGAAAGGCCATCGCGGCAGCCCGGGCTATCAGGGCCCGCCGGGCGAACCGGGCCAGGCGGGCCCGAGCGGCCCGCCGGGCCCGCCGGGCGCGATTGGCCCGAGCGGCCCGGCGGGCAAAGATGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCGCCCGGGCGAACGCGGCCTGCCGGGCCCGCCGGGCATTAAAGGCCCGGCGGGCATTCCGGGCTTTCCGGGCATGAAAGGC序列如下：GGCTCCCCAGGTTACCAGGGTCCGCCGGGCGAACCGGGTCAGGCAGGTCCATCTGGTCCACCGGGTCCGCCGGGTGCTATTGGTCCTTCCGGCCCGGCTGGTAAAGATGGCGAATCTGGCCGCCCTGGTCGTCCGGGCGAACGTGGTCTGCCGGGTCCGCCAGGTATCAAAGGTCCGGCGGGCATCCCGGGTTTCCCTGGTATGAAAGGCCATCGTGGTTCCCCAGGCTACCAGGGTCCTCCGGGTGAACCTGGTCAGGCGGGTCCATCTGGCCCGCCAGGCCCGCCTGGTGCTATCGGTCCGTCTGGTCCAGCTGGTAAAGACGGTGAATCTGGCCGTCCAGGCCGTCCTGGCGAACGCGGCCTGCCAGGCCCGCCAGGCATCAAGGGCCCGGCAGGCATTCCGGGCTTCCCGGGTATGAAGGGCCACCGTGGCTCCCCGGGTTACCAAGGCCCGCCGGGTGAACCGGGTCAGGCCGGCCCGTCTGGCCCGCCGGGTCCACCGGGCGCAATTGGTCCGTCCGGCCCAGCAGGCAAAGATGGCGAAAGCGGCCGTCCGGGCCGTCCGGGTGAGCGTGGTCTGCCGGGCCCGCCGGGCATGESGRPGPPGPSGPRGQPGVMGFPGPKGNDGAPGKNGERGGPGGPGPQGPPGKNGETGPQGPPGPTGPGGDKGDTGPPGPQGLQGLPGTGGPPGENGKPGEPGPKGDAGAPGAPGGKGDAGAPGERGESGRPGPPGPSGPRGQPGVMGFPGPKGNDGAPGKNGERGGPGGPGPQGPPGKNGETGPQGPPGPTGPGGDKGDTGPPGPQGLQGLPGTGGPPGENGKPGEPGPKGDAGAPGAPGGKGDAGAPGERGESGRPGPPGPSGPRGQPGVMGFPGPKGNDGAPGKNGERGGPGGPGPQGPPGKNGETGPQGPPGPTGPGGDKGDTGPPGPQGLQGLPGTGGPPGENGKPGEPGPKGDAGAPGAPGGKGDA[0042]COL_HR_333的DNA序列如下：GGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCCGCCGGGCCCGAGCGGCCCGCGCGGCCAGCCGGGCGTGATGGGCTTTCCGGGCCCGAAAGGCAACGATGGCGCGCCGGGCAAAAACGGCGAACGCGGCGGCCCGGGCGGCCCGGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCAAAAACGGCGAAACCGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCCCGACCGGCCCGGGCGGCGATAAAGGCGATACCGGCCCGCCGGGCCCGCAGGGCCTGCAGGGCCTGCCGGGCACCGGCGGCCCGCCGGGCGAAAACGGCAAACCGGGCGAACCGGGCCCGAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGCGCCGGGCGGCAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGAACGCGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCCGCCGGGCCCGAGCGGCCCGCGCGGCCAGCCGGGCGTGATGGGCTTTCCGGGCCCGAAAGGCAACGATGGCGCGCCGGGCAAAAACGGCGAACGCGGCGGCCCGGGCGGCCCGGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCAAAAACGGCGAAACCGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCCCGACC8GGCCCGGGCGGCGATAAAGGCGATACCGGCCCGCCGGGCCCGCAGGGCCTGCAGGGCCTGCCGGGCACCGGCGGCCCGCCGGGCGAAAACGGCAAACCGGGCGAACCGGGCCCGAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGCGCCGGGCGGCAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGAACGCGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCCGCCGGGCCCGAGCGGCCCGCGCGGCCAGCCGGGCGTGATGGGCTTTCCGGGCCCGAAAGGCAACGATGGCGCGCCGGGCAAAAACGGCGAACGCGGCGGCCCGGGCGGCCCGGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCAAAAACGGCGAAACCGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCCCGACCGGCCCGGGCGGCGATAAAGGCGATACCGGCCCGCCGGGCCCGCAGGGCCTGCAGGGCCTGCCGGGCACCGGCGGCCCGCCGGGCGAAAACGGCAAACCGGGCGAACCGGGCCCGAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGCGCCGGGCGGCAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGAA序列如下：GGTGAATCTGGTCGTCCGGGTCCACCGGGTCCATCTGGTCCTCGTGGTCAGCCGGGTGTGATGGGTTTCCCAGGTCCGAAAGGTAACGATGGCGCGCCGGGTAAAAACGGTGAACGTGGTGGTCCGGGTGGTCCTGGTCCACAAGGTCCGCCAGGTAAGAATGGTGAAACTGGCCCTCAAGGCCCTCCTGGTCCGACTGGTCCTGGTGGTGATAAGGGTGATACTGGTCCGCCTGGTCCGCAGGGTCTGCAAGGTCTGCCTGGCACCGGTGGTCCACCTGGTGAAAACGGCAAACCAGGCGAACCTGGTCCGAAGGGTGATGCAGGTGCTCCTGGCGCACCGGGTGGTAAAGGTGACGCTGGCGCTCCAGGTGAACGTGGTGAATCCGGTCGTCCGGGTCCGCCTGGTCCTTCTGGTCCACGTGGTCAGCCGGGTGTTATGGGTTTCCCGGGTCCGAAAGGCAATGATGGTGCTCCTGGCAAAAATGGTGAACGTGGTGGTCCAGGTGGCCCAGGTCCGCAAGGTCCTCCAGGTAAAAATGGTGAAACCGGTCCACAAGGTCCTCCAGGTCCAACTGGTCCGGGTGGTGACAAAGGTGACACTGGTCCGCCAGGTCCACAGGGTCTGCAGGGTCTGCCAGGTACTGGTGGCCCGCCTGGTGAAAACGGTAAACCGGGTGAACCGGGTCCTAAAGGCGATGCTGGTGCACCGGGTGCACCAGGTGGCAAAGGTGACGCTGGTGCCCCTGGTGAACGTGGTGAATCTGGTCGTCCAGGTCCACCGGGTCCAAGCGGTCCTCGTGGTCAGCCTGGCGTTATGGGCTTCCCGGGCCCAAAAGGTAACGACGGTGCGCCGGGTAAAAATGGTGAACGCGGCGGTCCTGGTGGTCCAGGTCCACAAGGTCCTCCTGGCAAAAACGGTGAAACCGGTCCACAGGGTCCACCTGGTCCGACTGGTCCGGGTGGTGATAAGGGCGATACTGGTCCTCCGGGTCCACAAGGTCTGCAAGGTCTGCCGGGTACTGGTGGTCCGCCTGGTGAGAACGGTAAACCTGGTGAACCAGGTCCTAAAGGTGATGCTGGTGCTCCAGGTGCTCCGGGTGGTAAAGGCGATGCAGGCGCCCCTGGTGAA[0044]本发明中重组人源化III型胶原蛋白COL_HR_123，为COL_HR_1和COL_HR_2、COL_GQGPQGPKGDPGPPGIPGRNGDPGIPGQPGSPGSPGPPGICGSPGYQGPPGEPGQAGPSGPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGPAGIPGFPGMKGHRGESGRPGPPGPSGPRGQPGVMGFPGPKGNDGAPGKNGERGGPGGPGPQGPPGKNGETGPQGPPGPTGPGGDKGDTGPPGPQGLQGLPGTGGPPGENGKPGEPGPKGD[0045]COL_HR_123的DNA序列如下：GGCCAGGGCCCGCAGGGCCCGAAAGGCGATCCGGGCCCGCCGGGCATTCCGGGCCGCAACGGCGATCCGGGCATTCCGGGCCAGCCGGGCAGCCCGGGCAGCCCGGGCCCGCCGGGCATTTGCGGCAGCCCGGGCTATCAGGGCCCGCCGGGCGAACCGGGCCAGGCGGGCCCGAGCGGCCCGCCGGGCCCGCCGGGCGCGATTGGCCCGAGCGGCCCGGCGGGCAAAGATGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCGCCCGGGCGAACGCGGCCTGCCGGGCCCGCCGGGCATTAAAGGCCCGGCGGGCATTCCGGGCTTTCCGGGCATGAAAGGCCATCGCGGCGAAAGCGGCCGCCCGGGCCCGCCGGGCCCGAGCGGCCCGCGCGGCCAGCCGGGCGTGATGGGCTTTCCGGGCCCGAAAGGCAACGATGGCGCGCCGGGCAAAAACGGCGAACGCGGCGGCCCGGGCGGCCCGGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCAAAAACGGCGAAACCGGCCCGCAGGGCCCGCCGGGCCCGACCGGCCCGGGCGGCGATAAAGGCGATACCGGCCCGCCGGGC9CCGCAGGGCCTGCAGGGCCTGCCGGGCACCGGCGGCCCGCCGGGCGAAAACGGCAAACCGGGCGAACCGGGCCCGAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGCGCCGGGCGGCAAAGGCGATGCGGGCGCGCCGGGCGAA序列如下：GGTCAGGGTCCGCAGGGTCCTAAGGGCGATCCAGGTCCGCCAGGCATTCCGGGCCGTAACGGCGATCCGGGTATCCCAGGTCAGCCGGGTTCTCCGGGTTCTCCGGGCCCACCGGGTATCTGCGGCTCTCCGGGTTACCAGGGTCCGCCGGGTGAACCGGGTCAGGCAGGTCCAAGCGGCCCGCCAGGCCCGCCGGGCGCTATTGGTCCGAGCGGTCCTGCCGGTAAAGACGGCGAATCCGGTCGCCCTGGTCGTCCAGGCGAACGTGGTCTGCCTGGCCCTCCGGGCATCAAAGGTCCTGCCGGCATTCCTGGCTTCCCGGGCATGAAGGGTCACCGTGGTGAGTCCGGCCGCCCAGGTCCGCCGGGTCCGTCCGGCCCGCGTGGTCAGCCAGGCGTTATGGGCTTCCCGGGTCCGAAAGGTAACGATGGCGCGCCGGGCAAAAACGGTGAACGTGGTGGTCCGGGTGGTCCGGGTCCACAGGGTCCGCCAGGCAAAAATGGTGAAACTGGTCCGCAAGGCCCGCCGGGTCCTACTGGTCCGGGTGGCGATAAAG
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