痰、血、粪便标本采集操作指南

痰、血、粪便标本采集操作指南一、痰标本采集操作指南（一）标本类型及采集目的1.普通痰标本：用于普通细菌、真菌涂片及培养，明确呼吸道感染病原体，指导抗菌药物选择。2.痰结核菌标本：用于抗酸杆菌涂片、结核分枝杆菌培养及核酸检测，是肺结核诊断的金标准依据。3.痰脱落细胞学标本：用于检测呼吸道上皮细胞异常形态，辅助肺癌、间质性肺疾病等的诊断。4.痰寄生虫标本：用于检测肺吸虫、阿米巴滋养体等寄生虫感染，明确寄生虫病诊断。（二）采集前准备1.患者准备告知患者采集目的、方法、注意事项，取得知情同意。普通痰标本采集前1-2小时避免进食，用清水或生理盐水反复漱口3次，清除口腔内食物残渣及杂菌；若有义齿需提前取下，清洁义齿及口腔黏膜。痰结核菌采集无需刻意禁食，但需避免痰液被鼻咽部分泌物污染。痰脱落细胞学标本采集前3天避免使用支气管扩张剂、糖皮质激素雾化吸入，避免吸烟、饮酒，减少口腔上皮细胞脱落干扰。2.用物准备容器：一次性无菌螺旋盖痰盒，容积≥30ml，盒身标注清晰的患者姓名、性别、年龄、住院号/门诊号、标本类型、采集时间；怀疑高致病性病原体（如结核分枝杆菌、炭疽杆菌）时使用带防漏垫圈、生物安全标识的专用痰盒。辅助用物：生理盐水漱口液、一次性无菌镊子（挑取痰液用）、检验申请单、无菌手套、快速手消液、标本转运箱；诱导排痰需备超声雾化器、3%高渗盐水、吸氧装置、血氧监护仪。3.环境准备：独立采集空间，通风良好，避免交叉污染，采集时人员间距≥1米，必要时在负压采样间操作。（三）采集方法1.自然咳痰法指导患者坐直，上身微前倾，缓慢深呼吸3-5次，每次深吸气末屏气3-5秒，用力收腹咳嗽，借助胸肌力量将深部痰液咳出，直接吐入痰盒内，立即旋紧盒盖。合格标本要求：痰量≥1ml，外观为脓性、黏液脓性或血性痰，低倍镜下鳞状上皮细胞＜10个/视野，白细胞＞25个/视野，不合格标本需重新采集。普通细菌培养需连续采集3天晨起痰，提高阳性率；结核分枝杆菌检测需采集“即时痰、夜间痰、晨起痰”3份标本，每份痰量≥5ml，其中晨起痰为夜间积聚在肺部的深部痰液，阳性率最高。2.诱导排痰法适用于无痰、咳痰无力的患者，尤其是怀疑肺孢子菌肺炎、肺结核的免疫低下人群。操作流程：首先用生理盐水漱口3次，给予3%高渗盐水超声雾化吸入，氧流量5-8L/min，雾化时间10-15分钟，期间指导患者间歇咳嗽，若出现胸闷、血氧饱和度＜90%立即停止雾化，给予吸氧。雾化结束后指导患者用力咳嗽，收集痰液，若痰量不足可重复雾化1次，总雾化时间不超过30分钟。3.经人工气道吸痰法适用于气管插管、气管切开的患者，严格无菌操作。操作流程：操作者戴无菌手套，断开呼吸机接口（或通过密闭式吸痰通道），将一次性无菌吸痰管经气道插入，插入深度为超过人工气道末端1-2cm，负压控制在150-200mmHg（儿童80-120mmHg），边旋转边吸引，吸引时间＜15秒，将吸出的痰液收集于无菌痰盒内，避免混入气道滴入的生理盐水或雾化液。4.纤维支气管镜采集法适用于普通咳痰无法获取合格标本、疑似肺部病变位置较深的患者，由呼吸科医师操作。通过支气管镜直接到达病变部位，用无菌生理盐水灌洗后回收灌洗液，或用毛刷刷取病变部位分泌物，分别注入无菌容器送检，灌洗液量≥5ml，毛刷标本需浸泡于1-2ml生理盐水中送检。（四）标本转运及保存1.转运要求：标本采集后1小时内送达实验室，转运时保持痰盒直立，避免倾倒，放入密封生物安全袋，袋外标注生物安全标识，若怀疑高致病性呼吸道病原体，需放入三层包装，由专人转运，避免晃动。2.保存要求：普通痰标本若无法及时送检，可置于2-8℃冰箱保存，保存时间不超过24小时；结核分枝杆菌标本可室温保存2天，若需长期保存置于-20℃冰箱；痰脱落细胞学标本需立即送检，若无法及时送检可加入50%乙醇固定液，室温保存不超过7天。（五）注意事项1.严禁将唾液、鼻咽部分泌物、食物残渣作为痰标本送检，采集后需肉眼初步判断标本质量，不合格标本立即退回，告知患者重新采集。2.咯血患者采集痰标本时，需区分痰液与血液，告知患者尽量咳出气道内痰液，避免单纯血液送检影响检测结果。3.采集过程中指导患者避免对着他人咳嗽，痰液溅出后立即用0.5%含氯消毒剂擦拭消毒，做好职业防护。二、血液标本采集操作指南（一）标本类型及采集目的1.全血标本：用于血常规、血沉、凝血功能、血氨、血气分析、糖化血红蛋白、血培养等检测，了解血液细胞成分、凝血状态、病原体感染情况。2.血清标本：用于生化检测（肝肾功能、电解质、血脂、血糖、心肌酶）、免疫检测（传染病四项、肿瘤标志物、自身抗体）、药物浓度检测等。3.血浆标本：用于部分凝血因子检测、病毒核酸检测、特殊生化项目检测。（二）采集前准备1.患者准备告知患者采集目的、方法、可能的不适，取得配合。生化、血脂检测需空腹8-12小时，空腹期间可少量饮用白水，避免饮用含糖饮料、咖啡、酒精，避免剧烈运动。血气分析采集前需停止吸氧30分钟（若无法停氧需标注吸氧浓度），避免剧烈活动，静息5分钟以上。血培养采集前避免使用抗菌药物，若已使用需在检验申请单上标注药物名称、使用时间。凝血功能检测前避免服用抗凝、抗血小板药物，若需监测药物疗效则无需停药，需标注用药情况。2.用物准备采血针：成人使用21-22G静脉采血针，儿童、血管条件差者使用23G采血针，新生儿可使用足跟采血针。采血管：根据检测项目选择对应添加剂的采血管，管帽颜色符合国际通用标准：红色头盖：无添加剂，用于常规生化、免疫血清检测；黄色头盖：含促凝剂+分离胶，用于快速生化、免疫检测，可缩短血清分离时间；紫色头盖：含EDTA-K2抗凝剂，用于血常规、糖化血红蛋白、血型检测，抗凝剂与血液比例为1:10，即2ml管含EDTA-K23.6mg；蓝色头盖：含3.2%枸橼酸钠抗凝剂，用于凝血功能、血小板聚集功能检测，抗凝剂与血液比例严格为1:9，必须准确采集至管身刻度线；黑色头盖：含3.8%枸橼酸钠抗凝剂，用于血沉检测，抗凝剂与血液比例为1:4；绿色头盖：含肝素锂/肝素钠抗凝剂，用于血气分析、大部分生化急诊检测；灰色头盖：含氟化钠+草酸钾，用于血糖、乳酸检测，可抑制糖酵解，保证血糖浓度24小时内稳定。辅助用物：一次性止血带、碘伏或75%酒精消毒棉片、无菌干棉球、压脉带、检验申请单、手套、锐器盒、生物安全转运袋。血培养专用用物：成人需厌氧瓶、需氧瓶各1个，儿童仅用儿童需氧瓶，采血量成人每瓶8-10ml，儿童每瓶1-5ml，采集前需用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，消毒时间≥60秒，待干。3.环境准备：清洁、光线充足的采血区域，采血台面高度适宜，备有急救物品（肾上腺素、葡萄糖、血压计），预防晕血、过敏反应。（三）采集方法1.静脉采血法部位选择：优先选择肘部贵要静脉、肘正中静脉，其次为头静脉，避免选择水肿、感染、有瘢痕、正在输液的肢体，若患者有静脉留置针，需暂停输液5分钟后从对侧肢体采集。操作流程：1.核对患者信息，与申请单、采血管标签逐一核对，确认无误。2.患者取坐位或卧位，手臂伸直，掌心向上，在穿刺点上方5-7cm处扎止血带，止血带松紧以可插入1指、不影响动脉血流为宜，结扎时间＜1分钟，避免长时间结扎导致血液浓缩、凝血因子活性改变。3.用75%酒精以穿刺点为中心螺旋消毒，消毒范围直径≥5cm，消毒2次，待干后穿刺，严禁用手触碰消毒后的皮肤。4.持采血针穿刺，见回血后固定针梗，将采血管依次插入负压采血座，按照“无添加剂管→枸橼酸钠管→血清管→肝素管→EDTA管→血糖管”的顺序采血，避免抗凝剂交叉污染。5.采集完毕后，先松开止血带，拔出针头，用干棉球按压穿刺点3-5分钟，凝血功能异常者按压时间≥10分钟，禁止揉搓穿刺点，避免皮下血肿。6.含抗凝剂的采血管采集后立即轻轻颠倒混匀8-10次，颠倒角度180度，动作轻柔，避免溶血；枸橼酸钠管需确认采血量达到刻度线，过多或过少均需重新采集。2.动脉采血法部位选择：优先选择桡动脉，其次为股动脉、肱动脉，桡动脉采血前需做Allen试验：按压桡动脉和尺动脉，让患者反复握拳松拳至手掌苍白，松开尺动脉，10秒内手掌恢复红润为Allen试验阳性，可进行桡动脉穿刺，避免穿刺后出现手部缺血。操作流程：1.患者取平卧位，穿刺侧手臂外展，腕部垫枕，充分暴露穿刺部位。2.消毒范围直径≥8cm，操作者戴无菌手套，触摸动脉搏动最明显处，左手固定动脉，右手持肝素化的血气针，与皮肤呈30-45度角进针（股动脉穿刺呈90度角），见动脉血自动涌入针管后，采集1-2ml血液，避免混入空气。3.拔针后立即用无菌纱布按压穿刺点5-10分钟，凝血功能异常者按压≥15分钟，确认无出血后用弹力绷带包扎。4.采血后立即排出针管内气泡，封闭针头，双手轻轻搓动针管5秒混匀抗凝剂，立即送检。3.皮肤采血法适用于新生儿、婴幼儿、严重烧伤无法静脉采血的患者，采集部位为足跟内侧/外侧（新生儿）、无名指指尖内侧（儿童及成人），避免采血部位水肿、冻疮。操作流程：消毒皮肤待干后，用一次性采血针快速刺入皮肤2-3mm，擦去第一滴血，用毛细管收集后续流出的血液，采集后按压穿刺点2分钟，避免挤压采血部位，防止组织液混入稀释标本。4.血培养采集法采集时机：患者出现寒战、发热初期，体温＞38.5℃或＜36℃时采集最佳，已使用抗菌药物者在下次用药前30分钟采集。采集要求：每套血培养采集2份标本（需氧+厌氧），2次采血间隔时间≤5分钟，采集部位不同，避免同一部位采血导致的污染；血培养污染率需控制在＜3%，若培养结果为凝固酶阴性葡萄球菌、类白喉杆菌等皮肤定植菌，需结合2套培养结果判断，仅1套阳性多为污染。（四）标本转运及保存1.转运要求：所有血液标本采集后放入密封生物安全袋，申请单与标本分开存放，避免污染，1小时内送达实验室；血气分析标本需30分钟内送检，若无法及时送检需置于冰浴中，保存时间不超过1小时，避免细胞代谢消耗氧气、降低pH值。2.保存要求：血常规标本2-8℃可保存24小时，室温保存不超过8小时；凝血功能标本室温保存不超过4小时，2-8℃保存不超过24小时；生化、免疫标本分离血清后2-8℃可保存7天，-20℃可保存3个月；血培养标本室温保存，严禁冷藏，避免低温抑制部分病原体生长。（五）注意事项1.严格执行三查七对制度，避免标本错采、错标，若出现标签信息不符，需重新采集，严禁修改标签。2.避免溶血：采血时消毒皮肤需待干，止血带结扎时间不宜过长，采血后避免用力摇晃采血管，分离血清时离心转速控制在3000-3500转/分钟，时间5-10分钟，溶血标本需重新采集，避免影响血钾、心肌酶、胆红素等项目的检测结果。3.避免脂血：若患者空腹后仍为严重脂血，需告知临床，必要时低脂饮食3天后重新采集，或采用高速离心、脂血处理试剂盒检测。4.职业防护：采血时若发生针刺伤，立即按照职业暴露流程处理：挤出伤口血液，用流动水冲洗，碘伏消毒，上报感染管理部门，根据暴露源情况采取预防干预措施。三、粪便标本采集操作指南（一）标本类型及采集目的1.常规粪便标本：用于粪便常规检测（性状、白细胞、红细胞、虫卵、隐血），辅助诊断消化道感染、出血、寄生虫病。2.粪便培养标本：用于细菌、真菌、病毒培养，明确肠道感染病原体，如沙门菌、志贺菌、诺如病毒、艰难梭菌等。3.粪便分子生物学标本：用于病毒核酸检测、肠道菌群基因测序、基因突变检测，辅助诊断病毒感染、遗传性肠道疾病、评估肠道微生态状态。4.特殊检测标本：用于粪便脂肪测定、粪便胆色素检测、幽门螺杆菌抗原检测、药物浓度代谢检测，评估消化道吸收功能、肝脏代谢功能、幽门螺杆菌感染情况。（二）采集前准备1.患者准备告知患者采集目的、方法、注意事项，取得配合。粪便隐血试验（化学法）检测前3天禁食动物血、肝脏、含铁丰富的食物、维生素C、铁剂、铋剂，避免出现假阳性或假阴性；免疫法隐血试验无需特殊饮食限制，但需避免大量摄入维生素C。粪便细菌培养前3天避免使用抗菌药物、益生菌制剂，若已使用需标注用药情况。采集前避免尿液、消毒剂、卫生纸污染粪便标本，女性患者避开月经期，避免经血混入。2.用物准备容器：一次性无菌带盖粪便盒，容积≥50ml，盒身标注患者信息，底部带小勺便于挑取标本；隐血试验专用采血管、肠道菌群采集管含保存液，采集后直接将标本放入保存液中混匀。辅助用物：清洁便盆、一次性无菌棉签、生理盐水、检验申请单、手套、生物安全转运袋；寄生虫检测需备透明胶带、载玻片。3.环境准备：独立卫生间，便盆清洁无消毒剂残留，避免交叉污染。（三）采集方法1.常规粪便标本采集指导患者将粪便排于清洁干燥的便盆内，避免混入尿液、污水。用无菌小勺挑取粪便的异常部分，包括脓血、黏液、稀水部分，若外观无异常则从粪便表面、深处、末端多个部位挑取，标本量黄豆大小（约5g），放入粪便盒内，立即旋紧盒盖。粪便常规检测需采集新鲜粪便，1小时内送检，若检测阿米巴滋养体，需在排便后30分钟内送检，冬季需将标本保温（25-37℃），避免滋养体失去活性。2.粪便培养标本采集尽可能在使用抗菌药物前、患者腹泻初期采集，优先采集脓血便、黏液便部分，标本量≥1g。若患者无法自主排便，可用无菌生理盐水润湿的直肠拭子插入肛门内4-5cm（幼儿2-3cm），轻轻旋转一周，沾取直肠黏膜表面的粪便，放入含Cary-Blair运送培养基的标本管内，密封送检。怀疑霍乱弧菌感染时，标本需置于碱性蛋白胨水运送培养基中，室温下2小时内送达实验室，若无法及时送检，2-8℃保存不超过24小时。3.粪便隐血试验标本采集化学法：采集新鲜粪便约5g，避免混入食物残渣，采集后1小时内送检，连续检测3天，提高阳性率。免疫法：用专用采便管的小勺挑取粪便50mg（约火柴头大小），放入含缓冲液的采便管中，充分混匀后送检，若粪便为稀水便，吸取200μl粪便悬液加入采便管中。若检测结果为阳性，需排除饮食、药物干扰，必要时结合肠镜检查明确出血原因。4.寄生虫及虫卵检测标本采集血吸虫卵、蛔虫卵等寄生虫卵检测：挑取黏液脓血部分约10g送检，若需提高检出率，可连续采集3天标本，合并送检。蛲虫卵检测：采用透明胶带法，在患者晨起未排便、未清洗肛周前，用透明胶带粘取肛周皮肤褶皱处的分泌物，将胶带贴于载玻片上，立即送检，连续检测3天，阴性预测值可达99%。绦虫节片检测：患者排便后，用镊子将排出的节片完整挑出，放入生理盐水中送检，避免节片破裂导致虫卵溢出。5.特殊标本采集粪便脂肪测定：患者保持每天摄入脂肪含量100g的饮食3天，收集72小时内的所有粪便，混合后称重，记录总重量，取约50g标本送检，检测粪便总脂肪含量，判断脂肪吸收功能。肠道菌群检测：用专用采集管挑取新鲜粪便0.5-1g，放入含核酸保护剂的采集管中，充分混匀后立即送检，若无法及时送检，可置于-20℃冰箱保存，-80℃可长期保存，避免反复冻融。幽门螺杆菌粪便抗原检测：采集新鲜粪便约1g，放入无菌盒内，2小时内送检，检测准确率可达90%以上，适用于儿童、无法耐受呼气试验的患者。6.灌肠或服泻药后粪便采集尽量不采集灌肠后的粪便，若必须采集，需标注为“灌肠后标本”，避免因标本被稀释影响检测结果；钡剂造影后3天内避免采集粪便标本，防止钡剂干扰检测。（四）标本转运及保存