自身免疫病及免疫检验（免疫学检验课件）

IMMUNOLOGY自身免疫病及免疫检验从免疫失衡到精准检验授课对象医学专业本科生课程导览01自身免疫病总论概念界定、分类框架与流行病学特征02发病机制与检验原理免疫耐受破坏与自身抗体产生03常用免疫学检验核心方法原理与结果判读04临床应用与进展检验策略选择与前沿方向CHAPTER01自身免疫病总论免疫系统为何攻击自身从概念界定到分类框架，建立自身免疫病的整体认知什么是自身免疫病自身免疫病是指机体免疫系统对自身成分发生免疫应答，导致组织损伤或功能障碍的一类疾病。认识自身免疫病的核心特征与判定标准免疫耐受的打破是自身免疫病发生的根本前提核心特征体内可检出自身抗体或自身反应性T细胞病程多呈慢性迁延，反复发作与缓解交替病变可局限于单一器官，也可累及全身多系统判定标准存在针对自身抗原的免疫应答免疫应答与组织损伤有因果关系去除自身抗原或抑制免疫应答可缓解病情自身免疫病的分类根据病变累及范围，自身免疫病可分为两大类。器官特异性自身免疫病病变局限于特定器官，自身抗体针对器官特异性抗原。疾病主要靶器官桥本甲状腺炎甲状腺1型糖尿病胰岛β细胞重症肌无力神经肌肉接头自身免疫性溶血性贫血红细胞系统性自身免疫病病变累及全身多个器官系统，自身抗体针对广泛分布的自身抗原。疾病主要靶抗原系统性红斑狼疮核抗原、DNA类风湿关节炎变性IgG干燥综合征核抗原CHAPTER02发病机制与检验原理失衡的免疫应答免疫耐受的崩溃是自身免疫病发生的核心环节免疫耐受是如何被打破的免疫耐受的破坏是自身免疫病发生的核心环节，涉及中枢耐受和外周耐受两方面的异常。中枢耐受缺陷2项阴性选择不充分胸腺与骨髓中自身反应性T、B细胞的阴性选择不充分淋巴细胞逃逸自身反应性淋巴细胞逃逸至外周，成为潜在致病因素外周耐受缺陷4项Treg功能低下调节性T细胞（Treg）数量减少或功能低下免疫忽视被打破免疫忽视被打破，隐蔽抗原暴露APC异常活化抗原提呈细胞异常活化，共刺激信号失调AICD机制受损活化诱导的细胞死亡机制受损遗传易感性与环境诱因

遗传易感性家族聚集性疾病发生具有明显的家族聚集性HLA基因多态性HLA基因多态性与多种自身免疫病密切相关双生子共患单卵双生子共患率显著高于双卵双生子，提示遗传贡献🌍

环境触发因素感染病原体通过分子模拟、旁路激活等途径诱发免疫应答药物某些药物可诱导自身抗体产生性激素多数自身免疫病女性发病率显著高于男性其他紫外线、吸烟、应激等自身抗体为何成为检验靶点自身抗体是自身免疫病的重要血清学标志，也是免疫学检验的核心检测对象。自身抗体的病理意义2类直接致病型如重症肌无力的抗乙酰胆碱受体抗体，直接阻断神经传导间接致病型通过形成免疫复合物、活化补体等途径造成组织损伤作为检验靶点的优势3项出现早于临床症状，具有预警价值与疾病活动度、器官受累相关，可辅助病情监测部分抗体具有高度疾病特异性，诊断价值明确CHAPTER03常用免疫学检验从抗体到诊断掌握核心检验方法的原理、操作要点与结果判读间接免疫荧光法第1步加样加入患者血清血清加至固定有抗原基质的玻片。第2步结合抗体特异性结合血清中自身抗体与基质抗原特异性结合。第3步荧光标记加入荧光标记抗体加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白抗体。第4步判读显微镜下观察荧光显微镜下观察荧光模式与强度。ELISA与免疫印迹法ELISA与免疫印迹法在自身抗体检测中承担

定量

与

确认

的不同角色。定量筛查与定性确认互补，ELISA与免疫印迹法共同支撑自身抗体检测。“定量筛查+定性确认，两种方法互补支撑自身抗体检测。”酶联免疫吸附试验（ELISA）原理抗原包被于固相载体，血清抗体结合后经酶标二抗显色优点可定量、通量高、易于自动化、可检测单一靶抗原用途抗dsDNA抗体、抗CCP抗体等特异性抗体的定量检测免疫印迹法（Westernblot/Lineblot）原理提取抗原经电泳分离转膜后，与血清反应检测特异性条带优点可同时检测多种抗原，区分靶抗原分子量用途ENA抗体谱的确认与分型抗体谱检测与综合判读单一抗体阳性常缺乏诊断特异性，抗体谱联合检测才能提升诊断价值检抗体谱联合检测流程ANA筛查阳性后进一步检测抗dsDNA、抗ENA谱ENA谱包括抗Sm、抗RNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70等类风湿抗CCP联合类风湿因子判结果判读三原则原则一筛查试验高敏感性，确认试验高特异性原则二抗体滴度与疾病活动度相关，需动态监测原则三检验结果必须结合临床症状，不能孤立解读免疫沉淀与放射免疫法免疫沉淀法基于抗原抗体特异性结合分离靶抗原，放射免疫法以放射性标记实现高灵敏定量，两者在特定检测场景中具有不可替代的价值。方法检测原理主要特点典型应用免疫沉淀法抗原抗体特异性结合后沉淀分离靶抗原特异性强，能区分靶抗原蛋白互作与靶抗原鉴定放射免疫法放射性标记抗原抗体竞争结合敏感性高，通量大微量物质高灵敏定量检测筛查优先选择敏感性高、通量大的方法确认优先选择特异性高、能区分靶抗原的方法临床实验室常采用

筛查确认联合策略CHAPTER04临床应用与进展检验赋能精准诊疗让免疫学检验真正服务于临床诊断与疾病管理免疫学检验的诊断路径1临床线索触发根据症状体征选择筛查项目2初筛试验如ANA、类风湿因子等敏感性高的项目3确认试验对初筛阳性者检测特异性抗体4动态监测评估疾病活动度与治疗效果检验申请要点临床线索检验项目关节肿痛抗CCP、类风湿因子面部红斑、多系统受累ANA、抗dsDNA、补体口干眼干抗SSA、抗SSB肌无力抗乙酰胆碱受体抗体常见疾病检验指标解读解读检验报告的关键在于识别特征性抗体谱，它指向疾病的本质。疾病标志性自身抗体临床意义系统性红斑狼疮抗dsDNA抗体、抗Sm抗体抗dsDNA抗体与疾病活动度相关，抗Sm抗体为高度特异性标志类风湿关节炎抗CCP抗体、类风湿因子抗CCP抗体特异性高，有助于早期诊断与预后判断干燥综合征抗SSA抗体、抗SSB抗体抗SSB抗体特异性较强，两者阳性支持诊断系统性硬化症抗Scl-70抗体与弥漫性皮肤受累及间质性肺病相关原发性胆汁性胆管炎抗线粒体抗体（AMA）AMA为该病高度特异性的标志性抗体解读要点标志性抗体阳性具有高诊断价值解读要点抗体滴度变化反映疾病动态解读要点阴性结果不能完全排除疾病前沿进展与学习展望自身免疫检验正朝着高通量、精准化、个体化方向快速发展“免疫学检验是连接基础免疫学与临床诊疗的桥梁”技术演进方向多重微珠技术单次检测同时完成数十种抗体谱分析全自动免疫分析平台缩短周转时间，提升可重复性液相芯片