生物安全防护技术指南(试行)

生物安全防护技术指南(试行)一、适用范围本指南适用于各级疾病预防控制机构、医疗机构、病原微生物实验室、动植物检疫机构、海关口岸查验站点、进口货物/冷链食品处置单位、突发生物安全事件处置队伍等涉及生物安全风险的各类主体，用于规范日常操作、风险处置过程中的生物安全防护行为，防范生物安全事件发生。二、生物安全风险分级与防护等级匹配（一）风险分级根据操作对象的致病性、传播风险、暴露后果，将生物安全风险划分为4个等级：1.一级风险（低风险）：操作对象为非致病性生物因子，无传播风险，暴露后不会引发健康损害。典型场景包括：BSL-1实验室开展非致病微生物实验；医疗机构普通门诊、预检分诊未接触疑似/确诊感染性病例的岗位；普通动植物检疫实验室开展非检疫性有害生物检测；未接触高风险生物因子的后勤保障岗位。2.二级风险（中风险）：操作对象为二类病原微生物（非高致病性）、常见检疫性有害生物，传播风险有限，暴露后可引发轻症或局部感染，不会造成大规模传播。典型场景包括：BSL-2实验室开展二类病原微生物实验活动；医疗机构发热门诊、常规核酸采样点、普通PCR实验室、普通隔离病房岗位；动植物检疫实验室开展常规检疫性有害生物检测；接触普通进口货物的采样、消毒岗位。3.三级风险（高风险）：操作对象为高致病性病原微生物、重大检疫性有害生物、境外输入高风险生物因子，传播能力强，暴露后可引发重症甚至死亡，存在大规模传播风险。典型场景包括：BSL-3实验室开展高致病性病原微生物实验活动；医疗机构甲类/按甲类管理的传染病隔离病房、重症监护室、阳性样本检测岗位；动物疫点开展高致病性禽流感、非洲猪瘟等重大动物疫病采样、处置岗位；入境高风险动植物产品检疫岗位；聚集性疫情现场流行病学调查、采样岗位。4.四级风险（极高风险）：操作对象为四级病原微生物、国内首次发现的新发传染病病原体、未知高风险生物因子，传播途径未知、致死率极高，极易引发大规模传播。典型场景包括：BSL-4实验室开展四级病原微生物实验活动；特别重大生物安全事件核心处置岗位；新发未知病原体现场处置岗位。（二）防护等级与风险匹配要求对应风险等级设置4级防护标准，严格遵循“高风险高防护、低风险低防护、无风险不冗余”的原则，不得随意提高或降低防护等级：1.一级防护：适配一级风险场景。装备配置为：干净工作服、一次性工作帽、符合YY0469-2011标准的医用外科口罩、一次性乳胶手套，必要时佩戴一次性鞋套。2.二级防护：适配二级风险场景。装备配置为：一次性工作帽、符合GB19083-2010标准的N95及以上级别医用防护口罩、护目镜/防护面屏、符合GB19082-2009标准的医用一次性防护服、内层一次性乳胶手套、外层耐穿刺丁腈手套、防水鞋套。3.三级防护：适配三级风险场景。在二级防护基础上，增加动力送风过滤式呼吸防护器、全面型防护面屏、防水高腰靴、双层鞋套，暴露于气溶胶传播高风险场景时需穿戴正压防护服。4.四级防护：适配四级风险场景。配置符合BSL-4实验室标准的正压防护服、配套生命支持系统、双重过滤呼吸防护装置、全包裹防水靴、3层以上防护手套，所有装备需经过气密性检测合格后方可使用。三、重点场景生物安全防护操作规范（一）生物实验室场景1.基础管理要求：所有实验室必须在入口显著位置标注生物安全等级、风险提示、准入要求，BSL-2及以上实验室实行准入登记制度，无关人员不得进入。实验区禁止饮食、吸烟、存放个人物品，禁止使用明火。2.分等级操作要求：（1）BSL-1实验室：实验结束后用500mg/L含氯消毒剂擦拭台面、门把手等高频接触部位，作用30分钟后用清水擦拭干净，接触实验材料后立即执行手卫生，实验产生的固体废弃物作为普通医疗废物处置。（2）BSL-2实验室：所有涉及感染性材料的操作必须在Ⅱ级生物安全柜内进行，生物安全柜使用前开启风机运行10分钟，使用后用75%酒精擦拭内壁，继续运行10分钟后关闭。离心机配备密封转子，样本装载、卸载必须在生物安全柜内进行，离心后静置30分钟再开盖，避免气溶胶泄漏。实验废液需经121℃、0.1MPa高压灭菌20分钟，或添加含氯消毒剂至终浓度5000mg/L、作用2小时后方可排入市政污水管网。实验动物尸体、组织样本需双层黄色垃圾袋封装，高压灭菌后移交有资质的医疗废物处置机构处理。（3）BSL-3实验室：实行双人准入制度，进入前需登记人员姓名、进入时间、操作内容、离开时间。所有实验操作必须在Ⅱ级B2型生物安全柜内进行，样本传递必须通过双门互锁传递窗，传递后立即用1000mg/L含氯消毒剂对传递窗内壁消毒。实验结束后对实验区进行终末消毒，采用3%过氧化氢雾化消毒，用量20mL/m³，作用1小时后通风30分钟。人员离开半污染区前必须淋浴，更换所有个人衣物后方可进入清洁区。（4）BSL-4实验室：严格执行单人单舱准入制度，所有操作必须在Ⅲ级生物安全柜内进行，人员穿戴的正压防护服使用后立即用1000mg/L含氯消毒剂擦拭表面消毒，所有废弃物、实验材料必须经双层高压灭菌处理，检测合格后方可移出实验室。（二）医疗机构场景1.普通门诊/预检分诊：工作人员采取一级防护，每4小时更换1次医用外科口罩，遇污染立即更换。每日对台面、分诊台、候诊椅用500mg/L含氯消毒剂擦拭3次，保持候诊区通风，每2小时通风1次，每次不少于15分钟。2.发热门诊/核酸采样点：工作人员采取二级防护，每采1名受检者后用速干手消毒剂消毒双手，作用时间不少于1分钟。采样点每4小时消毒1次，医疗废物每4小时清运1次，空气消毒采用紫外线灯照射（1.5W/m³，照射距离≤1m，时间≥30分钟）或3%过氧化氢雾化消毒。接诊疑似感染性病例后立即对诊室进行终末消毒，物体表面用1000mg/L含氯消毒剂擦拭，作用30分钟。3.隔离病房/重症监护室：工作人员采取二级防护，接触呼吸道传染病患者时加戴全面型防护面屏，进入隔离病房前由专人检查防护装备密闭性。病房每日通风3次，每次不少于30分钟，患者排泄物、分泌物用含氯消毒剂至终浓度10000mg/L，搅拌均匀后作用2小时再排入污水处理系统。患者转出/死亡后对病房进行终末消毒，采用6%过氧化氢雾化消毒，用量20mL/m³，密闭作用2小时后通风。4.临床PCR实验室：样本接收、处理必须在生物安全柜内进行，阳性样本使用后立即高压灭菌，实验区每日开展空气采样监测，菌落总数≤4CFU/（15min·直径9cm平皿）为合格。（三）动植物检疫场景1.动物疫病监测采样：采样人员采取二级防护，采集高致病性禽流感、非洲猪瘟等重大动物疫病样本时采取三级防护。采样器械使用后立即高压灭菌，动物尸体、病料组织需双层封装后高压灭菌，再进行无害化处理。2.入境动植物检疫：查验人员采取二级防护，接触疑似携带检疫性有害生物的货物时采取三级防护，查验后对查验场地、器械用1000mg/L含氯消毒剂消毒，检出阳性的货物严格按要求进行熏蒸、销毁等处置，处置过程全程录像，留存记录不少于3年。3.外来入侵物种处置：处置人员采取三级防护，接触有毒有害外来物种时加戴防穿刺手套、防割护臂，处置后的废弃物必须焚烧或高压灭菌，不得随意丢弃，防范物种扩散风险。（四）突发生物安全事件现场处置场景1.流行病学调查：进入疫点的流调人员采取三级防护，调查时与病例保持1米以上距离，调查结束后在指定区域脱卸防护装备，所有使用后的纸笔、记录设备用75%酒精擦拭消毒。2.现场消毒：消毒人员采取三级防护，消毒前划定警戒区域，无关人员不得进入。空气消毒采用3%过氧化氢喷雾，用量30mL/m³，作用1小时后通风。物体表面消毒用1000mg/L含氯消毒剂擦拭或喷洒，作用30分钟。3.现场采样：采样人员采取三级防护，样本采集后放入三层密封包装，外层标注“感染性样本”标识，由2名专人护送转运，不得委托公共交通承运。（五）进口货物与冷链食品处置场景1.采样检测：采样人员采取二级防护，接触高风险冷链食品外包装时加戴防水围裙、橡胶手套。每采1份样本后手消，采样结束后所有采样器械高压灭菌，医疗废物双层封装后消毒转运。2.货物消毒：消毒人员采取二级防护，冷链食品外包装消毒用500mg/L含氯消毒剂喷洒，作用30分钟，普通进口货物外包装用250mg/L含氯消毒剂喷洒，作用15分钟，消毒过程做好记录，留存消毒凭证不少于2年。四、防护装备选用与穿脱规范（一）装备选用标准所有防护装备必须符合国家强制标准，不得使用无资质、过期、破损的装备：1.医用外科口罩：符合YY0469-2011标准，细菌过滤效率≥95%，颗粒过滤效率≥30%。2.医用防护口罩：符合GB19083-2010标准，N95及以上级别，颗粒过滤效率≥95%，吸气阻力≤343.2Pa，呼气阻力≤245Pa。3.医用防护服：符合GB19082-2009标准，过滤效率≥70%，抗渗水性≥1.67kPa，表面抗湿性≥3级。4.防护面屏/护目镜：符合GB14866-2006标准，透光率≥90%，具有防飞溅、防冲击功能。5.手套：乳胶手套符合GB10213-2006标准，丁腈手套符合GB24786-2009标准，无破损、无渗漏。（二）穿戴操作流程1.一级防护穿戴：七步洗手法洗手→佩戴一次性工作帽→佩戴医用外科口罩→穿工作服→佩戴一次性手套→检查所有装备贴合度，进入工作区域。2.二级防护穿戴：手卫生→佩戴一次性工作帽→佩戴医用防护口罩→执行密合性测试（负压测试：双手捂住口罩用力呼气，口罩微微隆起无漏气；吸气时口罩微微凹陷，无空气从边缘泄漏）→穿内层防护服→佩戴内层手套→穿外层防护服→佩戴外层手套（将手套袖口包裹在防护服袖口外侧）→佩戴护目镜/防护面屏→穿防水鞋套→由专人检查所有装备无暴露部位后，进入污染区。3.三级/四级防护穿戴：在二级防护基础上，依次佩戴动力送风呼吸装置/正压防护服，检测气密性合格后，进入高风险区域。（三）脱卸操作流程防护装备脱卸必须在指定区域进行，污染区脱卸污染面朝外的装备，半污染区脱卸内层装备，每脱卸1件装备后立即执行手卫生，全程避免接触装备污染面：1.二级防护脱卸：（1）污染区：摘除外层手套→手消→摘除护目镜/防护面屏（双手提拉后侧系带摘除，避免接触正面）→手消→脱外层防护服、外层鞋套（由上向下卷脱，污染面朝内）→手消，进入半污染区。（2）半污染区：脱内层防护服→手消→摘除内层手套→手消→摘除一次性工作帽→手消→摘除医用防护口罩（双手提拉后侧系带摘除，避免接触口罩正面）→手消，进入清洁区。（3）清洁区：七步洗手法洗手，更换干净工作服，完成脱卸。2.三级/四级防护脱卸：在专人指导下进行，正压防护服使用后先消毒表面再脱卸，所有脱下的装备立即放入医疗废物垃圾袋，密封消毒。（四）装备使用注意事项1.医用外科口罩佩戴时间不超过4小时，医用防护口罩佩戴时间不超过6小时，遇潮湿、污染、破损时立即更换。2.防护服出现破损、渗漏时立即停止操作，按规范脱卸更换，更换前不得离开污染区。3.手套破损时立即摘除，执行手卫生后更换新的手套，污染的手套不得接触清洁物品。4.可重复使用的护目镜、面屏使用后用1000mg/L含氯消毒剂浸泡30分钟，冲洗晾干后备用。五、核心操作技术要求（一）手卫生规范1.手卫生执行时机：接触感染性材料前后、穿脱防护装备前后、接触清洁物品前、接触污染物品后、离开污染区前、如厕前后、饮食前必须执行手卫生。2.手卫生操作：速干手消毒剂揉搓双手，覆盖所有部位，作用时间不少于1分钟；手部有明显污染物时采用七步洗手法洗手，每步揉搓时间不少于15秒，总洗手时间不少于2分钟。（二）消毒灭菌技术要求1.空气消毒：常规消毒采用紫外线灯照射，1.5W/m³，照射距离≤1m，时间≥30分钟，每周用75%酒精擦拭紫外线灯管表面1次，检测灯管强度≥70μW/cm²为合格；终末消毒采用3%~6%过氧化氢雾化，用量20~30mL/m³，作用1~2小时后通风。2.物体表面消毒：常规消毒用500mg/L含氯消毒剂擦拭，作用30分钟；污染表面用1000~2000mg/L含氯消毒剂擦拭，作用30分钟；精密仪器表面用75%酒精擦拭消毒。3.感染性废液消毒：首选高压灭菌（121℃、0.1MPa，20分钟），无法高压灭菌的添加含氯消毒剂至终浓度5000mg/L，搅拌均匀后作用2小时，检测余氯≥250mg/L后方可排放。4.医疗废物消毒：感染性医疗废物用双层黄色垃圾袋封装，采用鹅颈结封口，外层喷洒1000mg/L含氯消毒剂，标识清楚“感染性废物”，暂存时间不超过48小时，移交有资质机构处置。（三）样本管理规范1.样本采集：双人核对样本信息，标识清晰，注明样本编号、采集时间、采集人、样本类型。感染性样本采集后放入密封采样管，避免泄漏。2.样本保存：常规样本4℃保存不超过24小时，-20℃保存不超过7天，-70℃长期保存，避免反复冻融。3.样本转运：高致病性病原微生物样本使用UN2814包装，普通感染性样本使用UN3373三层包装（内层防漏、中层缓冲、外层耐压防水），由2名专人护送，转运过程保持4℃低温，避免剧烈震动。六、生物安全事件应急处置（一）事件分级与报告根据《国家生物安全事件应急预案》，生物安全事件分为一般（Ⅳ级）、较大（Ⅲ级）、重大（Ⅱ级）、特别重大（Ⅰ级）4级。发现生物安全事件后，事件发现人必须第一时间报告单位生物安全管理部门，单位必须在2小时内上报属地卫生健康、农业农村、海关等主管部门，不得迟报、瞒报、漏报。（二）感染性材料泄漏处置1.少量泄漏（泄漏量≤10mL）：立即停止操作，用浸有2000mg/L含氯消毒剂的吸水纱布覆盖泄漏区域，作用30分钟后清理，清理后的废弃物按感染性废物处置，操作过程佩戴双层手套。2.大量泄漏（泄漏量>10mL）：立即停止操作，撤离所有人员，封闭实验区域，设置警示标识，报告生物安全管理部门，30分钟后由佩戴三级防护的人员进入现场，用2000mg/L含氯消毒剂喷洒消毒，作用1小时后清理，消毒后开展环境采样检测，检测合格后方可重新开放区域。3.气溶胶泄漏：立即撤离人员，封闭区域，采用3%过氧化氢雾化消毒，作用2小时后通风，采样检测合格后方可进入。（三）职业暴露处置1.皮肤针刺/切割伤：立即在伤口旁轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，避免挤压伤口局部，用流动水冲洗伤口5分钟，再用75%酒精或0.5%碘伏消毒，包扎伤口。2.黏膜暴露：立即用大量生理盐水反复冲洗暴露的黏膜，冲洗时间不少于15分钟。3.呼吸道暴露：立即脱离暴露环境，更换合格的医用防护口罩，开展医学观察。4.暴露后处置：立即报告单位生物安全员，根据暴露的生物因子类型，开展风险评估，必要时服用预防药物、接种疫苗，开展为期14~90天的医学监测，出现相关症状立即就医。其中暴露于HIV病毒的，必须在2小时内服用阻断药物，最长不超过72小时；暴露于乙肝病毒的，24小时内注射乙肝免疫球蛋白。七、人员管理与培训考核（一）人员准入与健康管理1.准入要求：从事BSL-2及以上实验室操作、高风险生物因子处置的人员，必须经过生物安全专业培训，考核合格后持证上岗；BSL-3、BSL-4实验室工作人员必须取得国家级生物安全岗位证书，无职业禁忌证（免疫缺陷、呼吸道疾病、过敏性疾