生物制品可见异物检查指南（试行）

生物制品可见异物检查指南（试行）本指南适用于国内上市、申报上市的各类生物制品的放行检验、监督抽验、生产过程中间品质控环节的可见异物检查，覆盖范围包括重组单克隆抗体、双特异性抗体、抗体偶联药物、融合蛋白、多肽类生物制品、灭活/减毒疫苗、基因治疗制剂、细胞治疗制剂、血液制品、生物源性滴眼剂等所有生物制品种类，其他类药品的可见异物检查可参考本指南执行。本指南内容与《中华人民共和国药典》及国家药品监督管理局发布的强制性规范不一致的，以官方强制性要求为准。1规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》2025年版三部通则0904可见异物检查法USP<790>VisibleParticulatesinInjectionsEP2.9.20ParticulateContamination:VisibleParticulatesISO14644-1洁净室及相关受控环境第1部分：空气洁净度等级YY/T0864-2011医用灯检仪2术语和定义2.1可见异物：指在规定检查条件下，目视可观测到的不溶性物质，其等效粒径通常≥50μm，包括金属屑、玻璃屑、纤维、胶塞碎屑、蛋白聚集体、佐剂团聚块、核酸沉淀、外来杂质等各类不溶性物质。2.2目视检查法：指在规定照度、背景条件下，由具备资质的检验人员通过肉眼观测供试品中可见异物的检查方法，为可见异物检查的仲裁方法。2.3光散射检查法：指利用粒子通过光场时产生的散射光信号差异，自动识别供试品中可见异物的仪器检查方法，适用于大批量生物制品的初筛检查。2.4显微计数-鉴别法：指通过过滤富集供试品中的可见异物，结合显微镜观察、光谱/能谱分析，对异物进行定量统计和成分鉴别的方法，适用于不合格异物的溯源分析。2.5致命性可见异物：指可能对使用者造成严重健康风险的可见异物，包括金属屑、玻璃屑、最大长度≥2mm的纤维、等效粒径≥100μm的硬质块状异物。3检查人员要求3.1视力与健康要求：检查人员需经专业眼科检查，远视力/矫正视力≥5.0（对数视力表），无色盲、色弱、散光等影响视觉判断的眼部疾病，无肢体活动障碍。3.2培训与考核要求：检查人员上岗前需完成不少于40学时的专项培训，培训内容包括生物制品特性与常见异物特征、可见异物检查操作规范、缺陷判别标准、生物安全防护要求、阳性对照品辨识训练，培训后需通过理论+实操考核，实操考核中标准阳性样品检出率≥95%、误判率≤2%方可上岗。在岗人员每年需完成不少于16学时的复训，复训考核不合格者需暂停上岗权限，重新培训考核通过后方可恢复工作。3.3操作规范要求：检查人员操作时需穿戴无纤维脱落的洁净工作服、无粉丁腈手套，不得佩戴首饰、留长指甲，头发需全部包裹在工作帽内。连续检查工作时间不得超过30分钟，每工作30分钟需休息10分钟以上，避免视觉疲劳导致的检出率下降。涉及活病原体、血液来源生物制品检查的人员，需完成相应等级的生物安全培训并取得操作资质。4检查环境与设备要求4.1检查环境要求：检查室为独立密闭空间，墙面、天花板采用哑光中性灰色或白色材质，无反光、无积尘，室内无强直射光。静态环境下空气洁净度不低于ISO7级（D级），需开瓶操作的样品处理环节需在ISO5级（A级）层流洁净台内进行。静态下环境悬浮粒子监测要求：≥0.5μm粒子数≤352000个/m³，≥5μm粒子数≤2900个/m³，每季度开展一次环境监测，监测不合格需暂停使用并整改。检查室温度控制在20℃-25℃，相对湿度控制在45%-65%，避免供试品瓶身结露影响观察。4.2检查设备要求4.2.1目视灯检仪：采用无频闪冷白光光源，色温6500K±500K，照度调节范围0-10000lux，配备哑光黑色背景（反射率≤10%）和哑光白色背景（反射率≥85%），样品托架可稳定固定各类规格的供试品瓶/预充针。灯检仪照度每年校准1次，校准用照度计需经法定计量部门检定合格，照度测量误差≤±10%。4.2.2光散射检查仪：设备需具备异物大小识别、异物类型初筛功能，校准用标准微粒包括50μm、100μm、200μm聚苯乙烯微粒和100μm玻璃微粒，每次开机使用前需开展系统适用性试验：空白溶剂基线噪声≤0.5%，100μm标准微粒检出率≥95%，误判率≤2%，系统适用性不合格不得开展检查。设备每6个月开展一次全性能校准，校准合格后方可继续使用。4.2.3显微鉴别设备：光学显微镜放大倍数范围40-1000倍，配备成像系统、标尺校准功能，配套傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）、能量色散X射线光谱仪（EDS）可实现异物成分定性分析。所用微孔滤膜为孔径0.45μm的硝酸纤维素/聚碳酸酯滤膜，滤膜本身无可见异物。4.2.4辅助设备：冻干粉针溶解用振荡器转速调节范围0-200rpm，转速误差≤±50rpm，计时误差≤±1s；样品稀释用移液器为A级精度，每半年校准一次；涉及活病原体、血液制品操作的生物安全柜等级不低于二级，每年开展一次生物安全柜性能校准。5供试品准备5.1液体制剂（含注射液、预充针、生物源性滴眼剂、液体制剂疫苗）：供试品需在20℃-25℃环境下放置至少2小时，使样品温度与室温一致，避免温差产生的气泡干扰观察。冷藏储存的制剂需待瓶身结露完全挥发后再开展检查，检查前轻轻翻转供试品2-3次，避免剧烈振摇产生气泡。高粘度蛋白制剂（蛋白浓度≥100mg/ml）需放置5分钟待气泡完全消除后再检查。5.2注射用无菌粉末/冻干粉针：首先检查未开封供试品的瓶身完整性，观察粉末中是否有可见异物，随后按照说明书规定加入对应体积的稀释剂（注射用水或专用稀释液），垂直放置于振荡器上以80-100rpm转速振荡1-2分钟，确认粉末完全溶解后放置5分钟，待气泡完全消失后检查。5.3混悬型制剂（含铝佐剂疫苗、混悬型长效生物制剂、细胞治疗制剂）：按照说明书要求的振摇方式充分振摇，使混悬物均匀分散后立即检查。细胞治疗制剂需提前区分细胞团块与外来异物，细胞团块为半透明、形态均一的聚集体，不判定为可见异物。5.4基因治疗制剂：涉及病毒载体、核酸类制剂的供试品，检查时优先采用非破坏性的未开封检查方式，如需开瓶检查需全程在生物安全柜内操作，避免样本污染和人员暴露。6检查操作规范6.1目视检查法（仲裁法）6.1.1参数调整：根据供试品包装材质、剂型调整照度：无色透明玻璃包装的供试品照度为1000-1500lux；棕色玻璃、透明塑料包装的供试品照度为2000-3000lux；高粘度蛋白制剂、混悬型制剂照度为3000-4000lux；250ml及以上大体积输液制剂照度为2000-2500lux。6.1.2操作步骤：取供试品置于灯检仪样品托架上，供试品距离光源20-25cm，检查人员视线与供试品的距离为20-25cm，视线角度为水平向下15°。首先在黑色背景下，以0.5-1s/次的速度缓慢翻转供试品180°，连续翻转3次后静置1-2s，观察供试品中移动的可见异物；随后切换至白色背景，重复上述操作，观察白色纤维、透明玻璃屑等与黑色背景对比度低的异物。单支供试品检查时间：≤50ml规格的制剂不少于10秒，≥100ml规格的制剂不少于20秒。6.1.3复核要求：疑似存在可见异物的供试品需由2名及以上具备资质的检查人员独立复核，复核结果一致方可判定。6.1.4干扰排除：气泡为球形、可随静置向上移动、轻敲瓶身可破裂，不得判定为可见异物；半透明、振摇后可完全分散的可逆性蛋白聚集体、均匀分散的佐剂颗粒，不得判定为可见异物。6.2光散射检查法6.2.1系统适用性确认：每次开机后首先完成系统适用性试验，插入含100μm标准微粒的阳性对照品，检出率需达到100%，否则需重新调整设备参数。6.2.2参数设置：根据供试品规格调整参数：旋转速度100-150rpm，旋转时间2s，静置时间1s，采样时间2s；高粘度制剂可适当延长静置时间至3s，避免气泡干扰。6.2.3样品检测：每批次供试品检测过程中需每20支插入1支阳性对照品，阳性对照检出率100%方可认定该批次检测有效。设备检出的所有阳性供试品需全部采用目视检查法复核，最终结果以目视检查法为准。6.2.4适用范围限制：混悬型制剂、蛋白浓度≥150mg/ml的高粘度制剂、带刻度线的塑料包装制剂不得采用光散射法作为初筛方法，避免基质散射、刻度线干扰导致的误判。6.3显微计数-鉴别法6.3.1样品富集：在A级层流环境下，用无菌注射器取供试品溶液，以1-2ml/min的速度通过0.45μm微孔滤膜过滤，随后用3倍滤膜体积的空白稀释液冲洗滤膜3次，去除残留的制剂基质。6.3.2观察统计：将滤膜置于载玻片上，采用100-400倍放大倍数观察，统计所有等效粒径≥50μm的异物数量，记录异物的形貌、大小、颜色。6.3.3成分鉴别：针对待溯源的异物，采用FTIR检测有机物成分、EDS检测无机物成分，与数据库比对确定异物来源：玻璃屑特征为含硅、钠元素，纤维素纤维特征为红外光谱1050cm-1、3300cm-1处有特征吸收峰，胶塞碎屑特征为含硅、碳元素，蛋白聚集体特征为红外光谱1650cm-1（酰胺I带）、1550cm-1（酰胺II带）有特征吸收峰。7结果判定标准7.1批次判定规则7.1.1注射用生物制品（含静脉、肌内、皮下注射制剂）：随机抽取20支（瓶）供试品检查，所有供试品均未检出可见异物，判定批次合格；若检出1支（瓶）含非致命性可见异物，另取40支（瓶）复试，复试所有供试品均未检出可见异物，判定批次合格；若初检检出致命性可见异物、或复试检出1支及以上可见异物、或初检+复试累计检出2支及以上含可见异物的供试品，判定批次不合格。7.1.2生物源性滴眼剂：随机抽取20支供试品检查，检出含可见异物的供试品≤1支且未检出致命性异物，判定合格；若检出2支及以上或检出致命性异物，另取40支复试，复试检出含可见异物的供试品≤2支且未检出致命性异物，判定合格，否则判定不合格。7.1.3混悬型制剂：不得检出玻璃屑、金属屑、外来纤维等非基质来源的可见异物，振摇后无法分散的佐剂团聚块、蛋白聚集体判定为可见异物，批次判定规则与注射用生物制品一致。7.1.4细胞治疗、基因治疗制剂：基于个体化制剂的特殊性，需逐支检查，任何一支检出致命性可见异物判定不合格，检出非致命性可见异物的需经风险评估后确定是否放行。7.2豁免判定情形：供试品中检出的可见异物符合以下情形的，可豁免判定为不合格：①等效粒径50-100μm的蛋白聚集体，每支数量≤2个，且经稳定性考察确认该聚集体不会随储存时间增加；②预充针制剂中检出的≤100μm的胶塞碎屑，每支数量≤1个，且经风险评估确认不会影响产品安全性。8异物溯源与整改要求8.1溯源流程：检出不合格可见异物后，第一时间留存不合格供试品，采用显微鉴别法确定异物成分，按照“检验环节-包装环节-生产环节-储运环节”的顺序排查来源：首先排查检验环境悬浮粒子数据、操作过程记录，排除检验引入的异物；随后排查包装材料的入厂检测报告、包材灯检记录，排除包材本身带有的异物；再排查生产过程的滤芯完整性测试记录、灌装设备维护记录、洁净环境监测数据、工艺参数记录，确认是否为生产过程引入；最后排查储运过程的温度记录、运输轨迹，确认是否为储运过程中碰撞、温度异常导致的异物。8.2常见异物整改措施：①玻璃屑：排查轧盖力度，优化轧盖参数，加强包材入厂检测，增加运输过程的缓冲防护；②纤维：优化生产环境洁净度，更换无纤维脱落的工作服和滤芯，加强人员操作规范培训；③胶塞碎屑：优化胶塞硅化工艺，调整灌装针头的穿刺角度和力度，更换硬度符合要求的胶塞；④蛋白聚集体：优化处方缓冲液pH、离子强度，调整纯化工艺的洗脱参数，优化储存运输温度。8.3整改验证：整改完成后需连续生产3批验证批次，可见异物不合格率≤0.1%，且连续3批稳定性考察6个月未见可见异物数量增加，方可认定整改有效。9生物安全与记录管理9.1生物安全要求：涉及活病原体、血液来源、基因治疗类生物制品的检查，需在对应等级的生物安全柜内操作，检查人员穿戴