乙肝二对半定量检测临床应用

乙肝二对半定量检测临床应用检验科刘姮梅程实戴万荣乙肝二对半定量检测临床应用1/41乙肝二对半定量检测临床应用2/41一、乙肝二对半定量检测不但极大地提升了检测灵敏度和精密度,而且还能够用于评定注射乙肝疫苗后免疫效果乙肝二对半定量检测临床应用3/41

以乙肝病毒表面抗原为例,定性检测灵敏度是0.5～1.0ng/ml,定量检测灵敏度为0.05～0.1ng/ml。所以,乙肝二对半定量检测对低表示表面抗原和病毒发生变异也有很好检出率,对有效缩短急性乙型肝炎窗口期、了解输血前、术前和孕妇产前乙肝病毒感染情况和预防效果评价也有主要意义。乙肝二对半定量检测临床应用4/411.急性乙肝2.慢性乙肝3.乙肝病毒发生变异,表示量较低4.手术前、输血前和孕妇产前检验乙肝二对半定量检测临床应用5/415.高危人群防护和及时发觉治疗高危人群包含：①母亲是HBV感染者其所分娩儿女;②配偶、性伴侣是HBsAg阳性者;③HBsAg阳性者家庭组员;④医护人员和试验室工作人员、经常接收血液或血液制品者;⑤血透病人和器官移植者;⑥静脉内注射毒品者和性传输疾病者;⑦免疫功效低下者;⑧易发生外伤者等乙肝二对半定量检测临床应用6/41

这些人群多是长久少许感染,并刺激机体产生一定免疫力,可能呈低浓度感染,尤其应该引发人们足够重视,亲密关注并采取办法预防发展成乙肝或慢性携带者。乙肝二对半定量检测临床应用7/416.了解对HBV感染抵抗力情况和评定注射乙肝疫苗后免疫效果乙肝二对半定量检测临床应用8/41二、乙肝二对半定量检测能对乙肝患者诊疗、病程、治疗、预后起到一个全程动态监测和疗效观察作用乙肝二对半定量检测临床应用9/411.HBsAg定量检测主要临床意义⑴血清中HBsAg含量与肝组织内cccDNA水平有直接相关性，是HBV复制参考指标国内外学者研究表明，HBsAg含量与肝组织内乙肝病毒共价闭合环状DNA（HBVcccDNA)水平有直接相关性，用HBsAg定量能够间接反应HBV感染肝细胞内cccDNA水平。乙肝二对半定量检测临床应用10/41

乙肝病毒共价闭合环状DNA（HBVcccDNA)是HBV前基因组RNA转录产物最原始模板，也是乙肝病毒连续感染关键原因，所以，它是乙肝病毒复制最特异指标，其准确性超出当前惯用HBV-DNA检测。肝活检结果显示，肝内HBVcccDNA与血清HBsAg及血清HBV-DNA水平呈显著相关。在评定基线病毒学标志与治疗后病毒学应答相关性研究中，研究者发觉，血清HBsAg水平与HBVcccDNA有很好相关性，基线时低水平HBsAg可很好预测抗病毒治疗慢性乙肝（CHB)连续病毒学应答，这也反应了HBsAg定量检测主要性和可行性。所以HBsAg水平可作为衡量HBV感染肝细胞数量标志。更主要是，乙肝治疗降低HBsAg水平意味着可降低肝内cccDNA水平。乙肝二对半定量检测临床应用11/41⑵HBsAg水平与HBV感染自然史相关,与HBVDNA总体相关,但与HBeAg阴性CHB相关性较差

免疫耐受期免疫去除期非活动或低（非)复制期再活动期HBsAg水平最高开始下降最低再度升高，但升高倾

向低于免疫去除期乙肝二对半定量检测临床应用12/41⑶HBsAg去除是当前慢性乙肝治疗最高目标,也是乙肝自然恢复过程人体免疫系统控制HBV取得最正确效果和取得最靠近治愈状态指标。

当前临床上有许多指标用于检测慢性乙肝治疗应答,如ALT水平、HBV-DNA水平、HBeAg血清学转换率以及HBsAg去除率等,ALT正常化、HBV-DNA抑制至不可测、HBeAg血清学转换以及HBsAg去除便成为治疗慢性乙肝目标。其中HBsAg去除是乙肝自然恢复过程中人体免疫系统控制病毒取得最正确效果,也被认为是能够取得最靠近治愈状态,所以HBsAg去除成为慢性乙肝最高治疗目标。乙肝二对半定量检测临床应用13/41

一项309例代偿性肝硬化患者前瞻性队列研究，平均随访68个月，结果显示：32例患者到达HBsAg去除，其中3%HCC和死亡；而未发生HBsAg去除患者中，有11%发展为HCC.20%死亡。与未发生HBsAg去除患者相比，伴HBsAg去除患者HCC发生率显著降低，生存率显著延长，表明HBsAg去除可降低肝癌发生或肝病相关性死亡危险。乙肝二对半定量检测临床应用14/41

研究表明，发生HBsAg去除患者，肝脏炎症和肝纤维化程度显著改进。假如HBsAg去除发生于患者45岁以前，肝硬化发生之前或不存在丙肝病毒/丁肝病毒共同感染时，则其临床结果如肝硬化、肝癌及死亡发生率几乎为0，但假如HBsAg去除发生在45岁以后（感染时间长)、肝硬化或合并丙肝病毒/丁肝病毒感染时，仍有肝病并发症发生可能。所以HBsAg去除应该越早越好。乙肝二对半定量检测临床应用15/41⑷HBsAg可能是较HBV－DNA水平更能反应CHB患者病程程度一个间接指标病理研究提醒，HBsAg与炎症分期和肝脏纤维化程度呈负相关关系。伴随炎症和纤维化反应加重，HBsAg呈阶梯状下降，但HBV－DNA水平无显著改变，提醒HBsAg较HBV-DNA水平更能反应患者病理程度。轻-中度CHB:G2S1组38392.45±42747.74，

G2S2组32193.25±41322.70重度CHB:G3S4组7214.52±8517.78，

G4S4组17091±32428.95乙肝二对半定量检测临床应用16/41

⑸HBsAg定量检测是指导慢性乙肝患者抗病毒治疗新工具①基线HBsAg较低水平患者取得连续应答敏感性增强。基线HBsAg定量水平小于10000IU/ml和疗程中HBsAg降幅﹥1log10IU/ml和疗程结束时HBsAg低于10IU/ml都有较持久免疫应答

乙肝二对半定量检测临床应用17/41②治疗12周时低水平HBsAg可预测治疗有良好应答。治疗12周时HBsAg﹤1200IU/ml或12周时HBsAg定量下降至＜60%基线预测治疗有良好应答，且是治疗后HBeAg血清学转换独立预测原因。乙肝二对半定量检测临床应用18/41③治疗24周时HBsAg下降显著者,可取得更高持久免疫控制。24周时HBsAg含量较基线下0.5～1logIU/ml或24周时HBsAg含量＜1500IU/ml患者可预测治疗后六个月、1年、2年有良好连续应答和对未来HBsAg去除有高度预测作用。乙肝二对半定量检测临床应用19/41④治疗48周HBsAg定量低水平者,停药后可取得更高持久免疫控制。48周HBsAg水平﹤10IU/ml可取得停药后有较48周时HBsAg自基线下降﹥100IU/ml好HBsAg去除率乙肝二对半定量检测临床应用20/41应用HBsAg定量预测有没有良好或持久治疗应答方法①自基线和治疗中不一样时间HBsAg水平预测有没有良好或持久应答

基线水平＜10000IU/ml，治疗至12周或24周HBsAg水平＜1200～1500IU/ml和48周＜10IU/ml

②用HBsAg水平自基线降低幅度预测有良好或持久应答12周时下降至＜60%基线水平，24周时下降幅度＞0.5～1logIU/ml、48周时自基线下降＞100IU/ml乙肝二对半定量检测临床应用21/41⑤延长治疗提升持久免疫控制聚乙二醇干扰素规范治疗48周，至24周时HBsAg定量下降≥10%，17%患者在停药后1年维持应答；聚乙二醇干扰素规范治疗96周，至24周时HBsAg定量下降≥10%，58%患者在停药后1年维持应答；乙肝二对半定量检测临床应用22/41⑹监测拉米夫定等核苷酸类药品治疗中耐药突发

当乙肝病毒出现YMDD（酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸)突变出现时候，通常在生化指标出现异常之前血清HBsAg浓度和HBVDNA滴度增加。在YMDD突变出现之后，血清HBVDNA连续升高，然而HBsAg增加是瞬间，与ALT升高相同。在大部分病人中，血清HBsAg增加是因为HBVDNA增加。然而在一些病人中，血清HBsAg在HBVDNA增加几个月之前便增加。所以，在用拉米夫定等核苷酸类药品抗病毒治疗时，除了监测HBVDNA水平之外，同时监测血清HBsAg浓度或许能够有利于较早地发觉在拉米夫定治疗中耐药突变。乙肝二对半定量检测临床应用23/412.乙肝病毒表面抗体（抗-HBs）定量检测主要临床意义

抗-HBs定量检测能够对是否真正含有中和HBV免疫力作出正确评价,对乙肝高危人群预防起监督和指导作用。

抗-HBs即乙肝抗体,是乙肝保护性抗体,是受乙肝病毒感染后痊愈或治愈象征。抗-HBs浓度越高,保护力越强,连续时间也就越长。乙肝二对半定量检测临床应用24/41

当前普遍认为普通人群抗-HBs浓度值＞10IU/ml，就有足够保护作用;高危人群抗-HBs浓度值＞100IU/ml，含有足够保护作用;肝移植、血液透析以及免疫抑制等病人应定时检测抗-HBs浓度值，每次检测值＞100IU/ml为宜。乙肝二对半定量检测临床应用25/41抗-HBs浓度测定还能够用于评定注射乙肝疫苗后免疫效果。⑴无应答者：抗体浓度＜1mIU/ml，无保护性抗体，非特异性结合反应，约占接种者5%，继续加大剂量或更换疫苗厂家全程（3针)免疫注射；⑵低应答者：抗体浓度为1～10mIU/ml，保护作用比较弱，必须加强2针疫苗注射；⑶中应答者：抗体浓度为10～100mIU/ml，已经有一定保护力，约占接种者65%，须加强1针疫苗注射；⑷高应答者：抗体浓度＞100mIU/ml，免疫效果最好，约占接种者20%，不需要加强注射。乙肝二对半定量检测临床应用26/41对意外接触HBV感染者血液和体液后,可按照一下方法处理①血清学检测

应马上检测HBVDNA.HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、ALT和AST，并在3和6个月内复查。②主动和被动免疫

如已接种过乙型肝炎疫苗，且已知抗-HBs≥10mIU/mL者，可不进行特殊处理。如未接种过乙型肝炎疫苗，或虽接种过乙型肝炎疫苗，但抗-HBs<10mIU/mL或抗-HBs水平不详者，应马上注射HBIG200~400IU，并同时在不一样部位接种一针乙型肝炎疫苗(20μg)，于1和6个月后分别接种第2和第3针乙型肝炎疫苗(各20μg)。乙肝二对半定量检测临床应用27/413.乙肝二对半定量检测HBeAg和抗-HBe主要临床意义HBeAg：①是乙肝患者传染性强标志之一，HBeAg阳性表明体内有大量HBV-DNA复制;②也是乙肝由急性发展为慢性指标;③慢性肝炎中HBeAg连续高浓度提醒HBV连续感染，而且发展肝硬化概率比较高;④孕妇高浓度HBeAg可能增加母婴垂直传输机会乙肝二对半定量检测临床应用28/41抗-HBe:①抗-HBe主要存在于HBsAg阳性携带者及迁延稳定或恢复期乙型肝炎患者血清中，普通认为抗-HBe也是乙肝病情稳定标志②HBeAg阳性慢性肝炎，定量检测能明确HBeAg向抗-HBe转化时期，即表现为HBeAg浓度下降和抗-HBe浓度升高过程③抗-HBe阳性慢性肝炎主要由前C基因突变株HBV感染所致，也称异型慢性肝炎。一直不出现HBeAg，但HBV-DNA进行性复制。HBsAg亦在高浓度处变动。与前者HBeAg阳性慢性肝炎中转化期比较，两对半定性检测均表现为小三阳，但后者主要表现在高HBsAg浓度，忽高忽低ALT值和HBV-DNA一直阳性。这类病人往往对干扰素、拉米夫定治疗效果不佳。乙肝二对半定量检测临床应用29/41⑴血清HBeAg水平不一样慢性乙型肝炎患者临床病理特点改变不一样众多研究发觉,在HBeAg阳性CHB病人中,不论血清HBV-DNA水平,低、中浓度HBeAg组炎症活动度及纤维化分级均较高浓度HBeAg严重且均呈负相关,而与HBeAg阴性CHB有更相同临床特征乙肝二对半定量检测临床应用30/41⑵定量检测HBeAg和抗-HBe是乙肝患者抗病毒治疗起点和终点选择目标治疗监测和随访治疗前应检验：病毒血清学，包含HBsAg、HBeAg、抗-HBe和HBVDNA基线状态和水平;抗病毒治疗三大治疗终点之一就是HBeAg/抗-HBe血清学转化。HBeAg或HBeAb血清转换是患者接收治疗后发生免疫应答结果，是当前公认治疗终点，是较高抗病毒治疗目标。乙肝二对半定量检测临床应用31/41⑶定量检测HBeAg是有效监测和评定抗病毒药品疗效主要指标之一

假如患者HBVDNA,尤其是HBeAg定量展现逐步和进行性下降时,判断可能出现HBeAg血清转换有主要意义。已经有一定程度下降,提议继续观察治疗3个月,再依据患者应答情况决定是否调整改疗方案。乙肝二对半定量检测临床应用32/41HBeAg定量预测价值优于HBVDNA定量预测价值

治疗24周HBeAg水平72周时HBeAg转换率﹤10PEIU/ml52%10～100PEIU/ml20%﹥100PEIU/ml4%乙肝二对半定量检测临床应用33/41基线HBeAg水平和治疗24周HBeAg水平下降幅度也可有效预测远期HBeAg血清学转换率HBeAg基线≤500PEIU/u52周时HBeAg血清学转换率57.1%12周时HBeAg水平较基线52周时HBeAg血清学转换率88.5%降低超出1logPEIU/ul乙肝二对半定量检测临床应用34/41

所以,在对慢性乙肝患者抗病毒治疗监测和预测或判断是否出现连续应答时,应依据HBV-DNA和HBeAg定量检测动态改变进行综合分析,对在治疗过程中HBeAg和HBsAg浓度显著下降患者应勉励继续治疗,以取得更加好疗效。乙肝二对半定量检测临床应用35/41