T-CVMA 153-2024 猫肠道线虫虫卵检查 粪便饱和盐水漂浮法

CCSB41T/CVMA153—2024猫肠道线虫虫卵检查粪便饱和盐水漂浮法2024-4-26发布2024-4-26实施中国兽医协会发布IT/CVMA153—2024前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任本文件由由勃林格殷格翰动物保健（上海）有限公司提出。本文件由中国兽医协会归口。本文件起草单位：勃林格殷格翰动物保健（上海）有限公司、南京农业大学动物医学院、东西志览国际文化发展无锡有限公司。本文件主要起草人：李桥、周振雷、张俭伟、卢娜、王智、赖晓云、韩庆宇。T/CVMA153—20241猫肠道线虫虫卵检查粪便饱和盐水漂浮法本文件规定了猫肠道线虫虫卵检查的粪便饱和盐水漂浮法的技术规范。本文件适用于全国各级动物诊疗机构的工作人员对猫肠道线虫虫卵的检查。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1肠道线虫病intestinalnematodosis由寄生在宿主肠道内的线虫引起以呼吸道和消化道症状为主的疾病。3.2猫蛔虫病felinetoxocariasis由弓首科的线虫寄生在猫小肠中引起的寄生虫病。3.3猫钩虫病felineancylostomiasis由钩虫科的线虫寄生在猫小肠而引发的肠道感染的寄生虫病。3.4猫鞭虫病felinetrichuriasis由毛尾科毛尾属（也称毛首科毛首属）的线虫寄生于猫盲肠和结肠引起的寄生虫病。3.5饱和盐水漂浮法saturatedsalineflotationmethod将粪便样本放入饱和盐水搅拌均匀，由于比重的不同，粪便中比重较小的虫卵会与比重较大的粪残渣分开，浮于液体表面，收集表面悬浮物进行光学显微镜观察的方法。2T/CVMA153—20244猫肠道线虫虫卵的粪便饱和盐水漂浮检查法4.1材料准备4.1.1主要试剂10%甲醛溶液、饱和盐水和生理盐水。4.1.2主要耗材一次性无菌棉签或一次性无菌取粪勺、烧杯、玻璃棒、试管、0.25mm铜筛、50mL离心管、巴氏吸管、载玻片和盖玻片。4.1.3主要仪器光学显微镜。4.2猫粪便的采集使用棉签通过猫的直肠直接采集适量粪便或使用取粪勺采集约2g24h内排出的新鲜未被污染的粪便。4.3猫粪便的保存粪便如不能立即检查，应将待检粪便暂存于4℃,不得超过12h。如需转寄至别处检查时，粪便可浸于等量的10%甲醛溶液中。4.4猫粪便虫卵的饱和盐水漂浮法检测步骤4.4.1饱和盐水配制将1000mL沸水中加入食盐约380g，冷却后，如有食盐晶体析出即成饱和溶液，其相对密度为1.18。4.4.2粪便虫卵收集4.4.2.1被动粪检漂浮法取2g粪便将其置于小玻璃烧杯内，加入50mL饱和盐水，用玻璃棒搅拌均匀。用铜筛过滤，滤液注入试管中，补加饱和盐水使试管充满。试管将满时，可改用巴氏吸管，滴加至液面略高于瓶口但不溢出为止。取一洁净载玻片，盖在试管口上，使液体与玻片接触，其间不留气泡，直立静置15min。4.4.2.2粪便离心漂浮法取2g粪便将其置于小玻璃烧杯内，加入50mL饱和盐水，用玻璃棒搅拌均匀。用铜筛过滤，滤液注入50mL离心管中，置于离心机，配平，3000rpm，离心5min。取出50mL离心管，可改用巴氏吸管，沿边缘缓慢滴加饱和盐水至液面略高于离心管但不溢出为止。取一洁净载玻片，盖在离心管管口上，使液体与玻片接触，其间不留气泡，直立静置10min。4.4.3镜检取下载玻片，并迅速翻转，盖上盖玻片后进行显微镜检查。也可以直接用盖玻片盖在试管口，取下盖玻片后覆于载玻片上进行镜检。4.5检测注意事项T/CVMA153—20243检查时，速度要快，以防虫卵变形，必要时在制片时可加上一滴清水，以防样本干燥和盐结晶析出，影响镜检。盐水漂浮液应饱和，且保存在不低于13℃的环境下才能保证较高的密度，否则效果难以保证。镜检时，所看的视野按照一定顺序进行移动，以免漏检，造成诊断失误。4.6结果判定通过上述粪便饱和盐水漂浮法获取虫卵，然后进行显微镜观察鉴定，从而确诊为肠道线虫感染阳性。猫体内寄生虫中常见肠道线虫病（猫蛔虫病、猫钩虫病和猫鞭虫病）的病原体主要形态特征见附录A，虫卵形态图见附录B。其他肠道线虫病的病原体形态及形态图参考有关资料。4.7结果报告判定结果，出具报告。T/CVMA153—20244猫常见肠道线虫的特征描述猫常见肠道线虫的主要特征见表A.1。表A.1猫常见肠道线虫的主要特征（Ancylostomaceylanicum）体长约10mm虫体体长均为45~75mm成虫虫体前端两侧有向后延展的颈翼虫体前端如箭镞状，食道与肠管连虫体前1/3与中1/3交体色呈白色，成虫虫体的前端处有一口囊，口囊边缘附成虫虫体呈乳白色，前部细长为头和食道部，后部亚球形，卵壳厚，表面有许多点状凹陷外壳薄而光滑，当虫卵脱落腰鼓状，卵壳厚，两端有极度消瘦、被毛粗糙干燥。皮肤症状：第三期幼虫对皮肤的侵入可导致腿部和腹部上出现鳞屑覆盖的丘疹性病变。这些发炎部位会发痒，病变部位会被感染并发展成脓皮病。常见疾病为浅表性肠道疾病症状：成虫会引起充血性或出血性肠炎，腹泻与便秘交替发生，粪便中带肠道症状：感染引发充血性或出血性结肠炎，导致T/CVMA153—20245猫肠道常见线虫虫卵的形态示意图猫肠道常见线虫虫卵的形态示意图见图B.1~图B.4。图B.1猫弓首蛔虫虫卵图B.2狮弓蛔虫虫卵图B.3锡兰钩口线虫虫卵T/CVMA153—20246图B.4狐毛尾线虫虫卵T/CVMA153—20247参考文献[1]张长生,彭智伟,史沁欣等.东北虎圈养环境土壤中蛔虫虫卵的