细胞生物学实验技师考试试卷及答案

细胞生物学实验技师考试试卷及答案细胞生物学实验技师考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.吉姆萨染液常用于______染色。2.台盼蓝染色中，______细胞会被染成蓝色。3.离心机转速的常用单位是______。4.PCR反应的基本步骤包括变性、退火和______。5.细胞培养中最常用的血清类型是______血清。6.显微镜分辨率公式中的数值孔径英文缩写是______。7.Westernblot中转膜的常用方式有湿转和______。8.细胞冻存液中DMSO的主要作用是______。9.流式细胞仪通过检测细胞的______信号进行分析。10.原代培养是指从______直接分离细胞进行培养。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.下列哪种试剂常用于DNA染色？（）A.伊红B.苏木精C.龙胆紫D.溴化乙锭2.细胞培养中CO₂培养箱的CO₂浓度通常为？（）A.1%B.5%C.10%D.15%3.分离细胞核常用的离心机转速范围是？（）A.1000-3000rpmB.5000-8000rpmC.10000-15000rpmD.20000rpm以上4.Westernblot中一抗的作用是？（）A.标记蛋白B.结合目标蛋白C.显色D.转膜5.荧光显微镜中，激发光波长与发射光波长的关系是？（）A.激发光波长更长B.发射光波长更长C.两者相等D.无固定关系6.细胞计数板计数时，通常数几个大格？（）A.1B.2C.4D.87.冻存细胞复苏时应迅速放入哪个温度？（）A.4℃B.25℃C.37℃D.60℃8.PCR退火温度主要取决于引物的？（）A.长度B.GC含量C.浓度D.来源9.细胞传代时常用的消化酶是？（）A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.纤维素酶D.溶菌酶10.流式细胞仪的荧光信号来源于？（）A.细胞自身荧光B.标记的荧光染料C.激发光反射D.以上都对三、多项选择题（共10题，每题2分）1.细胞培养的无菌操作包括（）A.超净工作台消毒B.操作时戴手套C.培养基过滤灭菌D.培养箱定期清洁2.常用的细胞固定剂有（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.生理盐水3.Westernblot的主要步骤包括（）A.蛋白提取B.SDS电泳C.转膜D.免疫检测4.影响PCR扩增效率的因素有（）A.引物设计B.退火温度C.Mg²+浓度D.模板浓度5.显微镜维护的正确方法有（）A.镜头用擦镜纸擦拭B.避免阳光直射C.不用时盖防尘罩D.随意调整物镜6.细胞凋亡检测的常用方法有（）A.TUNEL法B.AnnexinV/PI双染C.流式细胞术D.台盼蓝染色7.原代培养的基本步骤包括（）A.组织取材B.消化分散C.接种培养D.传代8.离心机使用时的注意事项有（）A.平衡离心管B.盖紧离心机盖C.转速逐渐升高D.随意停止离心机9.常用的荧光标记染料有（）A.FITCB.PEC.DAPID.吉姆萨10.细胞培养中常见的污染类型有（）A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染四、判断题（共10题，每题2分）1.台盼蓝染色时，活细胞会被染成蓝色。（）2.PCR反应需要耐高温的DNA聚合酶。（）3.细胞冻存时应快速降温以减少细胞损伤。（）4.Westernblot转膜时，蛋白从凝胶转移到硝酸纤维素膜。（）5.荧光显微镜可以观察活细胞的动态变化。（）6.细胞计数时，应数计数板上四个大格的细胞总数。（）7.CO₂培养箱的主要作用是维持培养基的pH稳定。（）8.DMSO是细胞冻存液中的常用成分，且无毒性。（）9.流式细胞仪可以对细胞进行分选和计数。（）10.原代细胞比传代细胞更易保持分化特性。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述细胞计数的步骤。2.简述Westernblot的原理。3.简述细胞冻存的操作要点。4.简述荧光显微镜的使用步骤。六、讨论题（共2题，每题5分）1.讨论细胞培养中污染的预防措施。2.讨论PCR实验中假阳性的原因及解决方法。答案：一、填空题1.染色体2.死3.rpm4.延伸5.胎牛6.NA7.干转8.防止细胞结冰损伤9.荧光10.活体组织二、单项选择题1.D2.B3.A4.B5.B6.C7.C8.B9.B10.D三、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABC6.ABC7.ABC8.ABC9.ABC10.ABCD四、判断题1.错2.对3.错4.对5.对6.对7.对8.错9.对10.对五、简答题1.取细胞悬液与台盼蓝1:1混合，滴加至计数板，盖盖玻片。显微镜下计数四个大格活细胞（未染色），计算浓度：（总活细胞数/4）×10^4×稀释倍数。注意悬液均匀，避免重复计数。2.通过SDS分离蛋白，转移至固相膜，用特异性抗体结合目标蛋白，二抗和显色系统检测。可定性定量分析蛋白，是蛋白质研究常用技术。3.对数期细胞消化离心，用含10%DMSO和20%血清的培养基重悬。分装后依次4℃30min、-20℃1h、-80℃过夜，再移至液氮。DMSO缓慢加入，避免细胞损伤。4.预热电源，选滤光片。放标本，低倍镜找目标，切换高倍镜。开激发光调焦，观察后关激发光和电源，清洁镜头盖防尘罩。避免长时间照射以防荧光淬灭。六、讨论题1.超净台紫外消毒30min，操作戴手套口罩。培养基过滤灭菌，培养箱定期清洁换水。传代严格无菌，避免交叉污染。定期检测支原体，用一次性耗材。操作后