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文档简介
高考生物课本原话(5-选修3)选修3生物技术与工程大题常考的“植物组织培养、单克隆抗体、PCR技术”就在这本书;学生觉得不易掌握的“基因工程”也在这本书。这本书重在理解性记背。P5
传统发酵技术是直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵,制作食品的技术。
乳酸菌(乳酸链球菌、乳酸杆菌……):是厌氧细菌,在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸,可用作乳制品的发酵、泡菜的腌制…。P6
酵母菌是兼性厌氧微生物,在有氧时进行酵母菌的繁殖;无氧条件下能进行酒精发酵,可用于酿酒、制作馒头和面包等。P7
醋酸菌是好氧细菌,当氧气、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸;缺少糖源时,则直接将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸。P9
研究和应用微生物的前提:防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物。
微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌,真菌、病毒🦠。P10
在培养乳酸杆菌,在培养基中添加维生素;
在培养霉菌,将培养基调至酸性;
在培养细菌时,将培养基调至中性或弱碱性;
在培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件。
生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。eg:有的微生物能够寄生于多种细菌体内,使细菌裂解,因此可以用它们来净化污水、污泥。P11
消毒方法:
化学药物法:酒精擦拭双手、氯气消毒水源。
紫外线进行消毒:杀死微生物。照射前,适量喷洒苯酚,可加强消毒效果。
湿热灭菌:高压蒸汽灭菌效果最好。(培养基)
干热灭菌:如玻璃器皿、培养皿、金属用具……P12
平板划线法:培养单菌落🧫。P17
稀释涂布平板法:分离微生物、统计样品中活菌的数目。
原理:
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生成的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
一般选菌落数30~300的平板进行计数。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目少:因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
显微镜直接计数:统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。
血细胞计数板,常用于相对大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。
细菌计数板:可对细菌等小的细胞进行计数。P20
在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红与纤维素形成红色复合物。P23
发酵产品为微生物细胞本身:过滤、沉淀等将菌体分离和干燥。
代谢物:提取、分离、纯化。
发酵的中心环节:发酵罐内发酵。
积累谷氨酸:在中性和弱碱性条件下。P24
主发酵:酵母菌的繁殖、糖的分解和代谢物的生成。
后发酵:低温、密闭环境中进行,形成澄清、成熟的啤酒。P27
微生物肥料的作用:
利用微生物代谢产生的有机酸:增进土壤肥力,改良土壤结构,促进植株生长。
固氮菌:抑制土壤中病原微生物的生长,减少病害的发生。
单细胞蛋白(即微生物细胞):通过发酵获得的大量的微生物菌体。(不是蛋白质)P30
鉴别大肠杆菌(本身为深紫色):伊红—亚甲蓝琼脂培养基。P35
植物组织培养:先脱分化形成愈伤组织,再再分化诱导生芽、生根。
口诀“生长素/细胞分裂素,高根,低芽,中愈伤。”P36
植物组织培养实验:用酒精消毒30s,立即用无菌水清洗2~3次,再用次氯酸钠溶液处理30min,立即用无菌水清洗2~3次。
诱导愈伤组织期间一般不需要光照。
植物体细胞杂交之前,必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁,获得原生质体。
人工诱导原生质体融合的方法:
物理法:电融合法、离心法化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高PH融合法(植物特有)
意义:打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种。P40
脱毒苗(病毒极少,甚至无病毒)但是!不等于抗病毒。P42
初生代谢:生物所必须的代谢活动。比如:糖类、脂质、蛋白质和核酸。
次生代谢物:不是生物生长必需的。(也可以理解为对人类有好处的)比如:紫草宁、紫杉醇、人参皂苷、三七……P44
动物细胞培养的条件:营养;无菌、无毒的环境;温度、PH和渗透压;气体环境。
加5%CO2:维持PH。
动物组织需要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理。P48
灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏他们的抗原结构。
动物细胞融合方法:PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法(动物特有)
制备单克隆抗体:(要抗体检测呈阳性的)第1次筛选:筛选出杂交瘤细胞第2次筛选:筛选出能分泌所需抗体的细胞P50
单克隆抗体的优点:能准确地识别抗原的细微差异;与特定抗原发生特异性结合;可大量制备。
抗体:导向作用;药物:治疗作用;接头:运输车,连接作用。P53
动物体细胞核移植:卵母细胞体外培养到M期。用电融合法融合细胞。用Ca2+载体激活重构胚。P54
动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法:显微操作法。P56
精子可在获能液(肝素、Ca2+载体……)中获能(获得受精的能力)。P58
受精的标志:观察到两个极体或观察到雌、雄原核。
囊胚孵化后,发育形成原肠胚。P61
动物胚胎移植:同期发情→超数排卵(用促性腺激素)→人工授精→胚胎检查→胚胎移植
→妊娠检查
。
P62
胚胎分割:将内细胞团均等分割。P63
取滋养层:可做DNA分析,鉴定性别。P71、72
重组DNA技术
切割DNA分子的工具:限制酶(限制性内切核酸酶)
连接DNA片段:DNA连接酶
将外源基因送入细胞:质粒(具有自我复制能力的环状双链DNA分子)
质粒上常有特殊的标记基因:如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等,便于重组DNA分子筛选。P77
PCR反应的条件:含Mg2+的缓冲液、DNA模版、2种引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶。
引物长度通常为20~30个核苷酸。P78
PCR反应过程:变性(90°C)→复性(50°C)→延伸(72°C)P80
基因表达载体的组成包括:启动子、终止子、目的基因、标记基因、复制原点、限制酶切割位点。P81
将目的基因导入受体细胞:植物:花粉管通道法、农杆菌转化法
农杆菌细胞内含有Ti质粒,当Ti质粒侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T—DNA转移到被侵染的细胞,并且将T—DNA整合到农杆菌细胞的染色体DNA上。P82
动物:显微注射法
原核生物(大肠杆菌):Ca2+处理法(使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态)。——25年河南高考大题
检测目的基因:
分子水平的检测:是否转录出mRNA:PCR技术检测是否翻译出蛋白:抗原—抗体杂交
个体生物学水平的鉴定:是否具备抗性:通过采摘抗某某的叶片饲喂某某来确定。P84
DNA分子越大,电泳“跑”的越慢。
凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。P85
为避免外援DNA等因素的污染,PCR实验中中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理。(没有微量移液器)P90
乳腺生物反应器/乳房生物反应器:科学家将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控原件重组在一起,通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵中,由这个受精卵发育成的转基因动物在进入到泌
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