医院实验室微生物菌种毒株发生意外应急预案

医院实验室微生物菌种毒株发生意外应急预案1.1编制依据为规范本院微生物实验室菌（毒）种意外事件的应急处置工作，最大程度降低菌（毒）种泄露、丢失、暴露等事件的危害，保障实验室工作人员、就诊患者及公众的健康安全，依据《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第424号）、《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2008）、《人间传染的病原微生物名录》（卫科教发〔2006〕15号）、《医疗机构临床实验室管理办法》（卫生部令第41号）、《医院感染管理办法》（卫生部令第48号）、《消毒技术规范（2002年版）》等法规标准，结合本院实验室运行实际制定本预案。1.2适用范围本预案适用于本院所有涉及病原微生物菌（毒）种保藏、运输、实验操作、销毁的场所，包括临床微生物实验室、感染性疾病科实验室、科研实验室、基因扩增（PCR）实验室等，以及所有参与菌（毒）种相关工作的人员。2应急组织体系及职责2.1应急指挥机构成立医院菌（毒）种意外事件应急处置指挥部，由医院生物安全委员会主任（院长）任总指挥，生物安全委员会副主任（分管医疗副院长）任副总指挥，成员包括医务部、医院感染管理科、检验科（微生物专业组）、保卫科、后勤保障部、感染性疾病科、急诊科、疾病预防控制科、设备管理科、宣传科、专职实验室生物安全管理员等部门及岗位负责人。指挥部办公室设在院感科，负责日常联络、预案修订、培训演练组织等工作。2.2指挥部核心职责统一领导、指挥、协调菌（毒）种意外事件的应急处置工作；判定事件等级，决定启动和终止对应级别应急响应；审定应急处置技术方案；统筹调度全院应急物资、人员、设备；按规定时限向上级部门报告事件进展；配合属地卫生健康行政部门、疾控中心、公安机关开展调查处置。2.3下设工作组及职责（1）现场处置组：由检验科微生物专业组负责人、实验室生物安全管理员、院感科消毒隔离专职人员组成，负责现场封控、溢洒清理、消毒灭菌、环境采样监测、菌（毒）种溯源盘点、实验设备核验等工作。（2）医疗救治组：由感染性疾病科、急诊科、皮肤科、眼科、预防保健科医护人员组成，负责暴露人员的紧急医学处置、暴露后预防用药、医学观察随访、感染病例诊断治疗等工作。（3）风险评估组：由院感科科长、检验科主任、感染性疾病科主任、疾控科负责人组成，负责开展事件风险等级判定、扩散风险评估、处置效果评价，提出防控措施调整建议。（4）后勤保障组：由后勤保障部、设备科、药学部组成，负责应急物资的供应配送、设备调试维护、消毒作业后勤支持、预防用药调配等工作。（5）信息上报组：由医务部、疾控科组成，负责事件信息的收集、整理、核实，按规定程序向上级部门报送信息，对接属地卫生健康行政部门、疾控中心，配合开展流行病学调查。（6）舆情管控组：由宣传科、院办组成，负责舆情监测、权威信息发布，回应社会关切，避免引发不必要恐慌。3事件分级根据事件涉及的菌（毒）种类别、危害程度、扩散范围、人员暴露情况，将菌（毒）种意外事件划分为四级：3.1特别重大事件（Ⅰ级）涉及第一类病原微生物菌（毒）种的丢失、泄露、溢洒；或发生实验室确诊感染病例，且有证据表明存在人际传播风险；或菌（毒）种泄露扩散至实验室外公共区域，可能造成社区传播。3.2重大事件（Ⅱ级）涉及第二类病原微生物菌（毒）种的丢失、泄露、溢洒；或发生第二类病原微生物实验室感染疑似/确诊病例，未发现人际传播证据；或菌（毒）种溢洒面积超过5平方米，存在气溶胶扩散风险。3.3较大事件（Ⅲ级）涉及第三类病原微生物中高致病性菌株（如伤寒沙门菌、志贺菌、非保藏结核分枝杆菌、耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌CRE、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌CRAB等）的溢洒、容器破损，存在人员暴露风险；或菌（毒）种短时间失控（如保藏冰箱钥匙丢失、菌管掉落未即时找到），2小时内找回且未造成泄露；或发生第三类病原微生物人员暴露，暂无临床症状。3.4一般事件（Ⅳ级）涉及第四类病原微生物的溢洒、容器破损，无人员暴露；或第三类病原微生物微量溢洒（≤100μL），发生于生物安全柜内且无人员暴露，可即时处置完成。4风险识别与日常防控基础4.1本院菌（毒）种保藏基本情况本院目前未保藏第一类病原微生物菌（毒）种，未开展第二类病原微生物活病毒分离培养实验；经省级卫生健康行政部门审批保藏的第二类病原微生物菌株共12株，其中结核分枝杆菌临床分离株8株、布鲁氏菌临床分离株4株，均存放于临床微生物实验室BSL-2级区域的-80℃超低温冰箱专用保藏盒内，实行双人双锁管理，钥匙分别由微生物专业组组长和实验室生物安全管理员保管。保藏第三类病原微生物共195株，其中标准菌株28种（包括金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、伤寒沙门菌ATCC14028、白色念珠菌ATCC10231等）、临床分离保留株167株（包括多重耐药菌、罕见致病菌等）；短期保藏（≤3个月）存放于BSL-2实验室4℃专用冰箱，长期保藏（>3个月）存放于-20℃/-80℃专用冰箱，由专人管理，每月盘点。保藏第四类病原微生物共5种（包括枯草芽孢杆菌、酿酒酵母等），存放于普通实验区域4℃冰箱，由实验人员自行管理。4.2日常防控核心要求4.2.1菌（毒）种保藏管理：建立统一的菌（毒）种管理台账，详细记录菌（毒）种的编号、名称、来源、代次、保藏方式、保藏位置、进出库时间、数量、用途、经手人等信息，台账永久保存；第一、二类菌（毒）种实行双人双锁管理，第三、四类实行专人管理，每月进行账实核对，账物相符率需达100%；保藏菌（毒）种的冰箱、液氮罐等设备配备24小时温度监控报警装置，温度异常时1分钟内触发短信报警。4.2.2菌（毒）种运输管理：实验室内部运输菌（毒）种需使用带盖塑料离心管盒，内层铺垫吸水材料，由专人运送，运输过程中避免剧烈震荡；跨科室运输第三、四类菌（毒）种需经检验科主任审批，第二类菌（毒）种需经生物安全委员会副主任审批，采用三层包装体系（内层菌管+无菌吸水材料、中层密封防漏容器、外层耐压运输箱），符合UN3373分类要求，粘贴生物危害标识，由2名工作人员共同运送；严禁个人私自携带菌（毒）种离开实验室区域。4.2.3实验操作管理：所有涉及活菌（毒）种的操作均需在BSL-2级以上实验室的Ⅱ级生物安全柜内进行，操作人员穿戴二级防护装备（一次性工作帽、医用外科口罩/N95口罩、隔离衣、双层乳胶手套、护目镜）；涉及高致病性菌（毒）种或易产生气溶胶的操作（如吹打混匀、开盖离心、研磨等）需穿戴三级防护装备；操作前需检查生物安全柜风速、风压、运行状态，操作后对生物安全柜内表面进行擦拭消毒；严禁在生物安全柜外进行活菌（毒）种的开盖、转移等操作。4.2.4菌（毒）种销毁管理：废弃的菌（毒）种、菌液、培养基等需经高压灭菌处理（121℃，20分钟；涉及芽孢类菌（毒）种需121℃，30分钟），灭菌后作为感染性医疗废物交由有资质的第三方机构处置；菌（毒）种销毁需填写销毁记录，由2名工作人员共同签字确认，记录永久保存。5重点意外事件处置流程5.1菌（毒）种溢洒/容器破损事件处置5.1.1生物安全柜内溢洒处置（1）微量溢洒（≤100μL）且为第三、四类病原微生物：操作人员立即停止操作，保持生物安全柜处于运行状态，用浸有对应有效浓度消毒液的吸水纸完全覆盖溢洒区域；细菌繁殖体、病毒类用有效氯2000mg/L消毒液作用30分钟，芽孢类用有效氯5000mg/L消毒液作用60分钟；作用期满后从边缘向中心擦拭清理，清理物装入双层高压灭菌袋，操作完成后更换手套，对手套及生物安全柜台面再次消毒；记录事件发生时间、溢洒量、菌种类别、处置措施，24小时内报实验室生物安全管理员备案。（2）大量溢洒（>100μL）或涉及第二类病原微生物：操作人员立即停止操作，将污染的移液器、培养皿等放入盛有消毒液的耐腐容器中，用浸有对应浓度消毒液的吸水布覆盖溢洒区域，关闭生物安全柜玻璃门，保持风机运行；立即撤离至缓冲间，脱去污染防护装备，手消毒后报告实验室生物安全管理员；由现场处置组按三级防护要求穿戴装备后进入生物安全柜内处置，清理完成后对生物安全柜内表面进行擦拭消毒，同时开启紫外线消毒30分钟；消毒完成后在生物安全柜内采集10个以上点位的棉拭子样本进行目标菌培养，确认消毒合格后方可重新使用生物安全柜。5.1.2生物安全柜外溢洒处置（1）当事人立即停止操作，尽量保持原地不动，避免走动造成污染扩散，第一时间呼喊附近工作人员协助报告实验室生物安全管理员及保卫科。（2）当事人立即撤离至缓冲间，脱去污染的防护服、手套、鞋套等，放入高压灭菌袋，进行手卫生及皮肤消毒；如有皮肤、黏膜暴露，同步按人员暴露流程开展紧急处置。（3）保卫科接到报告后10分钟内到达现场，划定警戒区域（溢洒点周围半径5米内），设置“生物危害禁止入内”警示标识，禁止无关人员进入；同时关闭事发区域的回风系统，开启排风过滤装置，避免气溶胶扩散。（4）现场处置组穿戴三级防护装备后进入现场，先使用超低容量喷雾器对警戒区域进行空气消毒（用0.5%过氧乙酸溶液，按20mL/m³的用量喷雾，作用60分钟）；再对溢洒区域的地面、台面等从外围向中心喷洒消毒液，覆盖范围为溢洒点周围3米；随后用吸水材料完全覆盖溢洒物，倒上足量消毒液，作用规定时间后，从边缘向中心清理；所有清理物均装入双层黄色医疗废物袋，鹅颈结封口，粘贴“感染性废物-生物危害”标识，经高压灭菌后交由有资质的机构处置。（5）对污染的设备、家具等表面用消毒液擦拭两遍，作用30分钟后用清水擦拭干净；对地面用拖布蘸取消毒液拖拭两遍，作用30分钟后用清水拖净。（6）消毒完成后，由院感科牵头开展环境监测，在溢洒区域、周边地面、台面、门把手、开关等处采集至少15份棉拭子样本，进行目标病原微生物培养，连续3次采样阴性（每次间隔24小时）方可解除警戒。5.2菌（毒）种丢失/被盗事件处置5.2.1发现人一旦发现菌（毒）种账实不符或保藏设备被破坏、锁具被撬动等情况，立即报告实验室负责人、保卫科及院感科，同时保护好现场，不得翻动现场任何物品。5.2.2实验室负责人接到报告后，立即组织本实验室人员暂停所有实验操作，封控实验室所有出入口，所有在场人员不得离开，配合调查。5.2.3保卫科接到报告后15分钟内到达现场，调取事发前后24小时内实验室出入口、走廊的监控录像，排查出入人员，开展初步调查；如涉嫌被盗，立即向属地公安机关报案。5.2.4实验室安排2名以上与菌（毒）种管理无直接利害关系的工作人员共同盘点菌（毒）种台账及实物，确认丢失菌（毒）种的种类、数量、编号、代次、致病性、传播途径、包装情况等，形成书面盘点报告。5.2.5风险评估组根据丢失菌（毒）种的危害等级、数量、传播途径等开展风险评估，提出防控措施建议；如丢失的为第二类病原微生物，立即由信息上报组在2小时内报告属地卫生健康行政部门及疾病预防控制中心，配合上级部门开展调查处置。5.2.6如丢失的为呼吸道传播病原微生物，立即启动全院呼吸道感染防控预警，在门急诊、住院部设置体温监测点，排查发热、咳嗽等症状人员，对近7天出入实验室的人员进行每日健康监测；如丢失的为消化道传播病原微生物，加强全院饮用水、食堂食品的卫生管理，开展腹泻病例主动监测。5.2.7丢失菌（毒）种找回后，由现场处置组在生物安全柜内检查包装完整性，采样检测是否有泄露、污染；如包装完好、无泄露，经75%酒精擦拭消毒后可重新入库登记；如包装破损、已泄露，按溢洒事件处置流程对污染区域进行彻底消毒。5.2.8事件处置完成后7天内，由风险评估组形成事件调查报告，上报医院生物安全委员会。5.3人员暴露事件处置根据暴露途径不同，分类开展紧急处置，所有处置过程均需做好记录：5.3.1皮肤暴露（1）完整皮肤接触菌（毒）种：立即用流动清水冲洗接触部位至少5分钟，再用75%酒精或0.5%碘伏消毒3分钟，更换污染的手套、防护服，登记暴露情况，进行3天健康监测，如有异常及时到感染性疾病科就诊。（2）破损皮肤/针刺/锐器伤暴露：立即从近心端向远心端挤压伤口，尽可能挤出损伤处的血液，避免挤压伤口局部，防止病原体入血；然后用流动清水或生理盐水冲洗伤口至少10分钟，再用0.5%碘伏或75%酒精消毒伤口，包扎后到感染性疾病科进一步处置。根据暴露的菌（毒）种种类采取暴露后预防措施：HIV暴露需在暴露后2小时内（最迟不超过24小时）启动抗逆转录病毒暴露后预防治疗，分别在暴露后即刻、4周、8周、12周、6个月进行HIV抗体检测（采用四代检测试剂可缩短至3个月）；布鲁氏菌暴露需口服多西环素100mgbid联合利福平600mgqd，连续预防用药21天，随访8周；结核分枝杆菌暴露需做PPD试验及胸部CT检查，PPD硬结直径<5mm者给予异烟肼300mgqd预防治疗6个月，每3个月复查PPD及胸部CT。5.3.2黏膜暴露（1）眼部暴露：立即到洗眼器处，用流动清水或生理盐水冲洗眼部至少15分钟，冲洗时翻开上下眼睑，转动眼球，确保穹隆部、结膜囊均得到充分冲洗；冲洗后到眼科就诊，根据菌（毒）种种类给予相应的眼用抗菌药物预防感染，随访7天。（2）口腔/鼻腔暴露：立即用生理盐水反复漱口、冲洗鼻腔，佩戴医用外科口罩，到耳鼻喉科就诊，根据病原种类给予预防用药，监测咽痛、鼻塞、流涕等相关症状。5.3.3呼吸道暴露（1）立即脱离污染环境，到通风良好的区域，佩戴N95医用防护口罩，用生理盐水漱口、清理鼻腔分泌物。（2）评估暴露的病原微生物种类及防护情况，如为呼吸道传播的第二类病原微生物且未佩戴有效防护口罩，需立即报告，按要求进行隔离医学观察，根据病原种类给予预防用药；结核分枝杆菌暴露按5.3.1相关要求处置，新型冠状病毒暴露按国家最新防控方案要求处置。（3）医学观察期间每日监测体温及呼吸道症状，如有发热、咳嗽、乏力等症状，立即到发热门诊就诊，主动告知医生暴露史。5.3.4食入暴露立即用清水漱口，刺激咽部催吐，必要时到急诊科进行洗胃、导泻等处置；根据食入的菌（毒）种种类给予相应的抗菌药物预防治疗，监测腹痛、腹泻、呕吐、发热等消化道症状，随访7天。5.3.5所有暴露人员均需填写《实验室职业暴露登记表》，建立个人健康监测台账，由感染性疾病科专人负责随访，直至度过对应病原微生物的最长潜伏期；发生严重暴露或确诊感染病例的，立即上报属地疾控部门，配合开展流行病学调查。6应急响应与终止6.1响应启动根据事件分级，实行分级响应机制：（1）Ⅳ级事件：由实验室生物安全管理员启动现场处置，处置结束后24小时内报院感科及医务部备案。（2）Ⅲ级事件：由院感科科长启动应急响应，组建临时处置小组，开展处置工作，每日向分管副院长报告进展。（3）Ⅱ级事件：由分管副院长（生物安全委员会副主任）启动应急响应，指挥部所有成员15分钟内到位，各工作组按职责开展工作，2小时内上报属地卫生健康行政部门及疾控中心。（4）Ⅰ级事件：由院长（生物安全委员会主任）启动应急响应，全院进入应急状态，立即上报属地政府、卫生健康行政部门、疾控中心，配合上级部门开展处置工作。6.2响应调整根据事件发展态势、风险评估结果，及时调整应急响应级别：如事件危害扩大、扩散风险增加，立即提升响应级别；如事件得到有效控制、风险持续降低，可相应降低响应级别。6.3响应终止满足以下全部条件的，经风险评估组评估确认后，由响应启动人宣布终止应急响应：（1）Ⅳ级事件：现场处置完成，消毒效果合格，无人员暴露，菌（毒）种账实相符。（2）Ⅲ级事件：污染区域消毒合格，环境监测阴性，暴露人员无异常症状，菌（毒）种找回或确认无外泄风险。（3）Ⅱ级事件：所有污染区域消毒合格，连续3次环境监测阴性，所有暴露人员度过最长潜伏期无发病，无二代病例，菌（毒）种全部找回或确认无扩散风险。（4）Ⅰ级事件：由上级卫生健康行政部门或疾控中心评估确认后宣布终止。7应急物资储备与管理7.1储备清单按照“平战结合、按需储备、保障供应”的原则，在微生物实验室应急物资柜及医院应急物资库储备以下物资：（1）个人防护用品：N95医用防护口罩100只、一次性医用防护服50套、护目镜30个、一次性防护面屏30个、双层乳胶手套200副、一次性鞋套100双、一次性工作帽100个、防水靴10双，按有效期分类摆放，取用方便。（2）消毒药械：含氯消毒粉（有效氯含量80%）50kg、75%医用酒精20L、0.5%碘伏5000mL、过氧乙酸消毒液10L、超低容量喷雾器2台、背负式喷雾器2台、移动紫外线消毒灯5台、高压灭菌指示卡/指示胶带各100片、生物安全柜熏蒸消毒套装1套。（3）应急处置工具：一次性吸水纸巾20包、医用脱脂棉10包、双层黄色医疗废物包装袋（100cm×80cm）100个、生物危害警示标识20个、禁止入内警示标识20个、便携式应急照明灯5个、无菌洗眼液10瓶。（4）检测试剂：结核分枝杆菌核酸检测试剂20人份、HIV抗体快速检测试剂50人份、布鲁氏菌抗体检测试剂30人份、常见肠道致病菌检测试剂20人份、多重耐药菌核酸检测试剂20人份，所有试剂均按要求温度储存，定期检查有效期。（5）预防用药：异烟肼片100片、利福平胶囊100粒、多西环素片100片、头孢克肟胶囊50粒、左氧氟沙星片50片、奥司他韦胶囊30粒，存放在感染性疾病科药房，按需领用，定期补充。7.2管理要求明确专人负责应急物资的管理，建立物资台账，每月盘点一次，记录物资的名称、规格、数量、有效期、领用情况等，对有效期不足3个月的物资及时补充更换；每季度检查一次设备状态，确保喷雾器、紫外线灯等设备正常运行；应急物资仅供菌（毒）种意外事件处置使用，不得挪作他用，紧急情况使用后48小时内完成补充。8培训与演练8.1培训每季度组织一次实验室工作人员生物安全专项培训，内容包括菌（毒）种保藏管理规范、意外事件的识别与报告、溢洒处置操作、个人防护装备穿脱、职业暴露处置、消毒灭菌技术等，培训后进行闭卷考核，合格率需达到100%，考核不合格者暂停实验操作，补考合格后方可上岗；新入职、转岗的实验室工作人员必须经过不少于16学时的生物安全岗前培训，考核合格后方可进入实验室工作。每年对全院医护人员开展一次生物安全知识普及培训，提高全院人员的风险防范意识和报告意识。8.2演练每半年组织一次菌（毒）种意外事件桌面推演，由指挥部成员、各工作组负责人参加，模拟不同类型的意外事件场景，推演处置流程、部门协同、信息上报等环节，检验各部门的协调配合能力；每年组织一次实战演练，模拟菌（毒）种溢洒