2026年实验室生物安全废弃菌种灭活处理试题及参考答案

2026年实验室生物安全废弃菌种灭活处理试题及参考答案【一、单项选择题（每题2分，共40分）】1.依据2024年修订的《病原微生物实验室生物安全管理条例》，第二类高致病性病原微生物废弃菌种灭活处置前，需完成的前置审批流程是（）A.实验室负责人签字即可操作B.经实验室生物安全委员会审批，报属地县级以上卫生健康/农业农村主管部门备案C.报所在单位后勤部门审批即可D.无需审批，操作人员按常规流程处理2.按照GB19489-2023《实验室生物安全通用要求》，盛装液态废弃菌种的容器最大装填量不得超过容器容积的（）A.60%B.70%C.80%D.90%3.常规灭活无芽孢细菌繁殖体、普通真菌、非包膜病毒时，高压蒸汽灭菌的最低参数要求是（）A.115℃10minB.121℃15minC.121℃30minD.134℃10min4.炭疽芽孢杆菌废弃菌种采用高压蒸汽灭菌法灭活的最低参数要求是（）A.121℃15minB.121℃30minC.134℃10minD.134℃30min5.朊病毒污染的废弃菌种灭活的标准操作参数是（）A.121℃30minB.1mol/LNaOH浸泡30min后121℃30minC.1mol/LNaOH浸泡60min后134℃30minD.5000mg/L含氯消毒剂浸泡30min6.高压蒸汽灭菌效果验证所用的标准生物指示剂是（）A.枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢B.嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢（ATCC7953）C.大肠杆菌（ATCC25922）D.金黄色葡萄球菌（ATCC25923）7.采用含氯消毒剂灭活结核分枝杆菌废弃菌种时，消毒剂的最低有效浓度和作用时间是（）A.500mg/L，15minB.1000mg/L，30minC.2000mg/L，30minD.5000mg/L，60min8.废弃菌种灭活后产生的医疗废物，在实验室内的临时存放时间最长不得超过（）A.24hB.48hC.72hD.7天9.病原微生物废弃菌种灭活处置全流程记录的最低保存期限是（）A.5年B.10年C.30年D.永久10.从事第三类病原微生物废弃菌种灭活操作的人员，最低需具备的实验室操作资质是（）A.无资质要求，只要是实验室工作人员即可B.经过生物安全培训合格，掌握BSL-2实验室操作规范C.持有高级生物安全操作证D.具备中级以上专业技术职称11.冻干废弃菌种安瓿瓶的预处理操作，正确的是（）A.直接放入高压灭菌器灭菌B.在生物安全柜内用75%酒精擦拭表面后，用砂轮划破安瓿，浸入消毒剂中30min后再高压C.在普通实验台上打碎后收集处理D.直接放入医疗废物袋转运12.液氮保藏的废弃菌种融化预处理时，操作场所要求是（）A.普通实验台B.通风橱内C.对应等级生物安全柜内D.冷库内13.高致病性病原微生物废弃菌种灭活操作时，个人防护装备等级要求是（）A.白大褂、一次性口罩、乳胶手套B.防水防护服、N95及以上级别口罩、护目镜/面屏、双层手套、防水鞋套C.仅需戴手套和口罩D.正压防护服14.高压蒸汽灭菌时，化学指示卡放置的最优位置是（）A.灭菌器顶部B.灭菌器侧壁C.灭菌器最冷点（通常为下层排气口上方）D.灭菌器门内侧15.下列不属于废弃菌种范畴的是（）A.实验剩余的菌液B.过期保藏的菌株C.污染的菌毒种样本D.购买的未开封标准菌株16.微波灭活法处理固态废弃菌种的最低参数要求是（）A.功率≥800W，温度≥100℃，作用10min以上B.功率≥500W，温度≥90℃，作用5min以上C.功率≥1000W，温度≥121℃，作用15min以上D.功率≥600W，温度≥95℃，作用8min以上17.灭活后的废弃菌液排入市政污水管网前，需满足的条件是（）A.无可见菌落即可B.灭活效果验证合格，中和残留消毒剂，符合《医疗机构水污染物排放标准》C.只要经过高压灭菌即可排放D.用消毒剂浸泡后即可排放18.下列哪种菌种的废弃处置需要额外进行粉碎预处理（）A.大肠杆菌菌液B.放线菌菌丝块C.流感病毒培养液D.酵母菌悬液19.废弃菌种灭活操作过程中发生少量溢洒时，第一步操作是（）A.立即用抹布擦拭B.立即离开现场，等待专业人员处理C.立即覆盖浸有有效浓度消毒剂的吸水布，作用规定时间后再处置D.立即开紫外灯消毒20.干热灭菌法灭活废弃玻璃器皿表面污染的芽孢时，最低参数要求是（）A.160℃2hB.121℃30minC.180℃30minD.100℃4h【二、多项选择题（每题3分，共30分，多选、少选、错选均不得分）】1.下列属于需要专项审批才能处置的废弃菌种的是（）A.第一类病原微生物菌株B.第二类病原微生物菌株C.第三类病原微生物中的耐药菌株D.第四类病原微生物菌株2.高压蒸汽灭菌效果验证的必备内容包括（）A.物理参数验证（温度、压力、时间）B.化学指示物验证C.生物指示剂验证D.装载量核查3.化学灭活法的适用场景包括（）A.不耐高温的废弃菌液B.实验室台面溢洒的废弃菌种C.大型设备表面污染的废弃菌种D.可耐高温的固态废弃菌种4.废弃菌种灭活全流程记录需包含的内容有（）A.菌种名称、危害等级、保藏编号、数量B.灭活方式、操作参数、操作时间、操作人员C.效果验证结果、复核人员签字D.转运去向、处置单位回执5.处理第一类病原微生物废弃菌种时，禁止的操作包括（）A.在BSL-2实验室操作B.单人独立操作C.用普通塑料袋包装转运D.灭活后直接作为生活垃圾处置6.下列病原微生物中，采用常规121℃20min高压蒸汽灭菌无法实现完全灭活的有（）A.朊病毒B.炭疽芽孢杆菌C.结核分枝杆菌D.口蹄疫病毒7.废弃菌种包装的要求包括（）A.双层防水、防穿刺包装B.每层包装均张贴生物危害标识C.标注菌种危害等级、处置方式、操作日期D.密封后表面用有效浓度消毒剂擦拭消毒8.发现灭活效果不合格时，需采取的处置流程包括（）A.立即封存同批次所有废弃物，重新开展灭活操作B.溯源查找不合格原因，优化灭活参数C.上报实验室生物安全委员会，开展风险评估D.对接触过不合格废弃物的人员开展健康监测9.废弃菌种灭活操作人员需定期接受的培训内容包括（）A.相关法规、标准要求B.灭活操作规范、个人防护装备穿戴要求C.溢洒、暴露等事故应急处置流程D.灭活效果验证方法10.下列属于常用废弃菌种灭活方法的有（）A.高压蒸汽灭菌法B.化学消毒剂浸泡法C.干热灭菌法D.微波灭活法【三、判断题（每题1分，共15分，对的打√，错的打×）】1.BSL-1实验室的废弃大肠杆菌菌液可以直接倒入下水道。（）2.含氯消毒剂需现配现用，存放时间最长不得超过24h。（）3.高致病性病原微生物废弃菌种可以带出对应等级生物安全实验室后再进行灭活。（）4.高压灭菌时装载的废弃物总容积不得超过灭菌器腔体容积的80%。（）5.干热灭菌的生物指示剂采用嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢。（）6.操作人员手部有开放性伤口时，不得从事高致病性废弃菌种的灭活操作。（）7.灭活后的废弃菌种医疗废物可以交给任意垃圾清运单位处置。（）8.冻干废弃菌种安瓿瓶打开前需在75%酒精中浸泡10min消毒表面。（）9.灭活效果验证仅需每年开展一次即可，无需每批次操作都验证。（）10.处理废弃的活性疫苗株时，灭活参数需比普通菌株提高一个等级。（）11.甲醛熏蒸法适用于空间内污染的废弃气溶胶态菌种的灭活，浓度要求为10%甲醛，作用时间≥12h。（）12.废弃的丝状真菌菌落无需预处理，可直接高压灭菌。（）13.液态废弃菌种高压灭菌前需拧紧容器盖子，防止溢出。（）14.病原微生物菌毒种销毁审批单需实验室负责人、生物安全负责人双人签字方可生效。（）15.发生高致病性废弃菌种大量溢洒事故时，需立即封锁现场，上报属地生物安全主管部门。（）【四、简答题（每题5分，共20分）】1.简述第二类高致病性病原微生物废弃菌种灭活处置的全流程。2.列出3种常用的废弃菌种灭活方法，分别说明其适用范围、操作参数和注意事项。3.高压蒸汽灭菌法处理废弃菌种的效果验证要求有哪些？4.简述高致病性废弃菌种灭活操作过程中发生溢洒事故的应急处置流程。【五、案例分析题（每题12.5分，共25分）】1.某高校BSL-2实验室操作人员王某，处理12份废弃的伤寒沙门氏菌（第二类病原）菌株，将每份15ml的菌液装入50ml离心管，装填量约为离心管容积的90%，拧松盖子1/4圈后直接放在普通高压灭菌篮中，送至公共平台高压灭菌器，设置参数为121℃10min，未放置化学指示卡和生物指示剂，灭菌结束后直接将离心管装入普通垃圾袋，交给后勤人员作为生活垃圾清运。请列出该操作中存在的所有违规问题，并说明正确操作要求。2.某动物疫苗研发实验室需销毁20份保藏的口蹄疫病毒（第一类病原）毒种，以及5份污染朊病毒的小鼠脑组织样本，请分别说明两类废弃样本的灭活方案、操作场所要求、个人防护要求。以下为参考答案------------------------------【一、单项选择题答案】1.B2.C3.B4.B5.C6.B7.D8.B9.C10.B11.B12.C13.B14.C15.D16.A17.B18.B19.C20.A【二、多项选择题答案】1.ABC2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD【三、判断题答案】1.×2.√3.×4.√5.×6.√7.×8.√9.×10.√11.√12.×13.×14.√15.√【四、简答题参考答案】1.第二类高致病性病原微生物废弃菌种灭活全流程如下：（1）前置审批：提交菌种销毁申请，注明菌种名称、危害等级、保藏编号、数量、来源、拟采用的灭活方案，经实验室生物安全负责人初审后，报实验室生物安全委员会审批，同步报属地县级以上卫生健康/农业农村主管部门备案，获批后方可操作；（2）预处理：在对应等级生物安全柜内完成废弃菌种的分装、包装，液态样品装填量不超过容器容积的80%，拧松盖子1/4圈后用耐高压密封袋双层包装，固态样品装入防穿刺容器后密封，所有包装表面用5000mg/L含氯消毒剂擦拭消毒，张贴生物危害标识；（3）灭活操作：按照备案的灭活方案开展操作，高压灭菌时放置物理、化学、生物三类指示物，严格控制操作参数；（4）效果验证：操作结束后先核查物理参数是否达标，再检查化学指示物变色情况，培养生物指示剂确认无菌生长，同时抽样开展目标病原分离培养，验证无残留活性；（5）转运处置：验证合格的废弃物装入专用医疗废物周转箱，交由具备高致病性病原微生物医疗废物处置资质的单位清运，索要处置回执；（6）记录存档：所有流程记录整理后存档，保存期限不少于30年。2.常用3种灭活方法如下：（1）高压蒸汽灭菌法：适用范围：所有耐高温、耐高压的液态、固态废弃菌种、污染耗材；操作参数：普通繁殖体、真菌、非耐药病毒121℃、103kPa、15-20min，芽孢、分枝杆菌121℃30min，朊病毒需预处理后134℃30min；注意事项：装填量不超过腔体容积80%，容器留透气缝隙，最冷点放置指示物，灭菌后待压力降至0再开舱门。（2）含氯消毒剂浸泡法：适用范围：不耐高温的废弃菌液、溢洒污染物、小型污染器材；操作参数：普通繁殖体用500mg/L浓度作用30min，分枝杆菌、耐药菌、包膜病毒用2000mg/L浓度作用30min，芽孢、朊病毒用5000-10000mg/L浓度作用60min以上；注意事项：现配现用，浸泡时完全浸没样品，去除样品表面有机物，灭活后中和残留消毒剂，检测达标后再排放。（3）微波灭活法：适用范围：固态废弃菌种、污染的土壤、动物组织样本；操作参数：频率2450MHz、功率≥800W，样品中心温度≥100℃，作用时间≥10min；注意事项：包装不得含金属材质，每批次样品厚度不超过10cm，同步放置温度传感器监测中心温度。3.高压蒸汽灭菌效果验证要求：（1）物理验证：每批次操作实时监测温度、压力、时间参数，打印记录存档，确保参数符合设定要求；（2）化学验证：每批次在灭菌器最冷点、上层、中层、边角位置分别放置化学指示卡/指示胶带，灭菌后检查变色情况，所有指示物均达到合格变色标准视为通过；（3）生物验证：每周至少开展1次生物指示剂验证，每处置高致病性废弃菌种时每批次均需放置生物指示剂，将嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢指示菌片与样品同步灭菌，灭菌后取出置于56℃培养48h，无菌生长视为合格；（4）空载热分布验证：每年开展1次，确认灭菌器内温度差≤±1℃，装载热分布验证每半年开展1次，验证不同装载模式下的温度均匀性。4.溢洒事故应急处置流程：（1）现场控制：操作人员立即停止操作，穿戴好额外防护装备，用浸有对应有效浓度消毒剂的吸水布完全覆盖溢洒区域，避免污染物扩散，若发生大量溢洒或高致病性病原溢洒，立即封锁现场，设置警示标识，禁止无关人员进入；（2）风险报告：第一时间上报实验室生物安全负责人，说明溢洒病原种类、数量、溢洒范围、人员暴露情况，高致病性病原溢洒需1小时内上报属地主管部门；（3）消毒处置：作用达到规定时间后，从污染边缘向中心逐步擦拭消毒，所有擦拭耗材、溢洒污染物全部收集后高压灭菌，污染的台面、地面用消毒剂反复擦拭3次，空间用紫外灯或过氧化氢熏蒸消毒；（4）人员管理：有暴露情况的人员立即开展医学隔离观察，根据病原种类开展预防服药或疫苗接种，安排定期健康监测；（5）溯源整改：查找溢洒原因，优化操作流程，对所有操作人员开展再培训，形成事故报告存档。【五、案例分析题参考答案】1.存在的违规问题：（1）第二类高致病性病原废弃菌种灭活未履行前置审