2026年卫生资格(中初级)-病理学技术(师)历年参考题库含答案解析

2026年卫生资格(中初级)-病理学技术(师)历年参考题库含答案解析一、选择题从给出的选项中选择正确答案（共100题）1、固定组织的最佳固定液是以下哪种？A.甲醛B.酒精C.乙醚D.丙酮E.氯仿2、HE染色中，苏木精染色后的分化液通常使用：A.盐酸酒精B.亚硫酸钠C.乙醇D.蒸馏水E.稀盐酸3、冰冻切片的常用冷冻剂是：A.液氮B.干冰C.正丁烷D.酒精E.石蜡4、石蜡切片制备过程中，透明剂的常用试剂是：A.二甲苯B.乙醇C.水D.甲醛E.丙酮5、免疫组织化学染色中，DAB显色产物的颜色为：A.蓝色B.红色C.棕黄色D.绿色E.紫色6、细胞核染色的铁苏木素法中，氧化剂的作用是：A.使染料结合DNAB.使染料形成不溶性沉淀C.增强染料亲和力D.防止染料沉淀E.调节pH值7、下列哪种固定液对脂质的固定效果最好：A.甲醛B.酒精C.锇酸D.苦味酸E.乙酸8、石蜡切片的厚度一般控制在：A.1-2μmB.2-4μmC.4-6μmD.6-8μmE.8-10μm9、Masson三色染色中，胶原纤维呈现的颜色是：A.红色B.蓝色C.黄色D.黑色E.绿色10、PAS染色主要用于显示：A.脂肪B.糖原C.蛋白质D.核酸E.粘多糖11、组织脱水过程中，最常用的脱水剂是：A.乙醇B.丙酮C.甲醇D.异丙醇E.丁醇12、石蜡切片脱蜡应使用：A.乙醇B.二甲苯C.水D.甲醛E.丙酮13、下列哪种染色方法用于显示网状纤维：A.Masson染色B.银染法C.PAS染色D.苏丹黑染色E.普鲁士蓝染色14、免疫荧光染色中，直接法的特点是：A.敏感性高B.特异性强C.操作步骤多D.非特异性荧光强E.需要两种抗体15、石蜡包埋时，包埋介质的熔点一般为：A.40-45℃B.52-58℃C.65-70℃D.75-80℃E.85-90℃16、下列哪种情况不适合做冰冻切片：A.术中快速诊断B.脂肪组织检查C.酶的显示D.糖原的显示E.病毒抗原检测17、组织自溶最常见于以下哪种情况：A.固定及时B.缺血时间过长C.温度过低D.固定液充足E.取材迅速18、下列哪种染色用于显示淀粉样物质：A.HE染色B.刚果红染色C.银染D.普鲁士蓝E.VG染色19、苏木素染色液成熟后应呈：A.红色B.蓝色C.紫蓝色D.绿色E.黄色20、下列哪种固定液含铬元素：A.甲醛B.酒精C.苦味酸D.重铬酸钾E.锇酸21、福尔马林是病理组织学最常用的固定液，其常用浓度是：A.10%B.20%C.30%D.40%E.50%22、石蜡包埋切片常规染色中最常用的染料是：A.革兰染色B.瑞氏染色C.苏木精-伊红染色D.抗酸染色E.银染色23、冰冻切片制作时，常用的冷冻剂是：A.液氮B.干冰C.丙酮D.石蜡E.乙醇24、HE染色中，分化液的作用是：A.去除多余染料使染色清晰B.固定组织结构C.使组织脱水透明D.封固切片E.着色细胞核25、组织固定液中，重铬酸钾的主要作用是：A.固定蛋白质B.氧化脂类物质C.固定核酸D.沉淀糖原E.硬化组织26、脱钙液中最常用的是：A.稀硝酸B.浓硫酸C.盐酸D.磷酸E.氢氟酸27、石蜡切片制作中，透明剂最常用的试剂是：A.乙醇B.甲醇C.二甲苯D.丙酮E.氯仿28、用于显示淀粉样物质的染色法是：A.H-E染色B.刚果红染色C.墨汁染色D.PAS染色E.银染色29、切片出现刀痕的常见原因不包括：A.组织内遗留砂砾或骨片B.切片刀不够锋利C.包埋面不平D.切片厚度调节不当E.蜡块温度过低30、PAS染色主要用于显示：A.脂肪B.糖原和黏液物质C.含铁血黄素D.钙盐E.胆色素31、免疫组织化学技术中，ABC法的全称是：A.亲和素-生物素-过氧化物酶复合法B.抗生物素-生物素-酶复合法C.抗体-生物素-过氧化物酶法D.亲和素-生物素-碱性磷酸酶法E.抗体-亲和素-生物素法32、冷冻切片中，最常用的组织固定液是：A.10%中性福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.Carnoy液E.Zenker液33、石蜡切片脱蜡最常用的溶剂是：A.乙醇B.二甲苯C.甲醇D.丙酮E.水34、组织脱水时，脱水剂由低浓度向高浓度逐渐过渡的主要目的是：A.加快脱水速度B.防止组织收缩变形C.节省脱水剂D.便于操作E.增加组织硬度35、Masson三色染色中，胶原纤维呈现的颜色是：A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色E.棕色36、切片出现皱褶的常见原因不包括：A.切片厚薄不均B.切片未充分展开C.展片水温不当D.组织过硬过脆E.染色时间过长37、用于显示网状纤维的染色法是：A.H-E染色B.普鲁士蓝染色C.六胺银染色D.苏丹Ⅲ染色E.刚果红染色38、HE染色中，分化后的脱色液通常使用的是：A.酸性酒精B.碱性酒精C.中性水D.丙酮E.乙醇39、用于骨髓穿刺涂片固定的最常用方法是：A.甲醛固定B.甲醇固定C.乙醇固定D.丙酮固定E.戊二醛固定40、组织石蜡包埋时，包埋剂熔点的选择主要依据是：A.组织来源B.切片厚度要求C.室温高低D.固定方式E.染色方法41、福尔马林固定液中最常用的浓度是？A.5%B.10%C.20%D.40%E.50%42、石蜡切片制作中，脱蜡最常使用的试剂是？A.乙醇B.二甲苯C.氯仿D.丙酮E.甲醇43、HE染色中，苏木精使细胞核染成什么颜色？A.红色B.黄色C.蓝色D.绿色E.棕色44、冰冻切片常用的冷冻剂是？A.液氮B.乙醇C.石蜡D.甲醛E.二甲苯45、Masson三色染色法中，胶原纤维被染成什么颜色？A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色E.棕色46、病理组织标本采集后，固定液与标本的体积比一般至少应为？A.1:1B.2:1C.3:1D.5:1E.10:147、PAS染色主要用于显示组织中的？A.脂质B.糖类物质C.蛋白质D.核酸E.含铁血黄素48、石蜡切片包埋时，常用的包埋介质是？A.石蜡B.冰C.明胶D.树脂E.凡士林49、免疫组织化学染色中，常用的抗原修复方法是？A.高温修复B.低温修复C.冷冻修复D.常温修复E.干燥修复50、油镜使用的浸油折射率一般约为？A.1.00B.1.20C.1.33D.1.51E.1.7051、特殊染色中，刚果红染色可用于检测？A.淀粉样物质B.淀粉C.黏液D.脂肪E.钙盐52、石蜡切片切片厚度一般应为？A.0.5～1μmB.2～4μmC.5～10μmD.10～20μmE.20～30μm53、HE染色中，分化步骤常用的试剂是？A.乙醇B.盐酸酒精C.二甲苯D.蒸馏水E.伊红54、脱钙常用的试剂是？A.稀盐酸B.浓硫酸C.浓硝酸D.乙酸E.磷酸55、细胞学涂片常用的固定液是？A.95%乙醇B.10%福尔马林C.甲醇D.丙酮E.二甲苯56、石蜡切片的染色方法中，最常用的染色是？A.HE染色B.PAS染色C.银染色D.免疫组化染色E.荧光染色57、组织脱水最常用的试剂是？A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.乙醚E.氯仿58、病理切片封片常用的封固剂是？A.中性树胶B.凡士林C.石蜡D.甘油E.乙醇59、病理组织在固定过程中，固定液渗透速度主要取决于？A.组织大小B.温度C.固定液浓度D.以上均是E.仅组织大小60、在病理制片过程中，透明的作用是？A.去除水分B.置换脱水剂并为石蜡渗入创造条件C.固定组织D.杀死细菌E.增加组织硬度61、石蜡切片制备过程中，组织固定最常用的固定液是A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.丙酮D.甲醇62、HE染色中，苏木精使细胞核染成什么颜色A.粉红色B.蓝色C.黄色D.绿色63、冰冻切片时常用的冷冻剂是A.液氮B.石蜡C.包埋胶D.水64、脱钙处理常用的脱钙液是A.稀盐酸或硝酸溶液B.生理盐水C.无水乙醇D.二甲苯65、切片出现皱褶的主要原因不包括A.切片刀不够锋利B.组织脱钙不充分C.切片厚度适中D.蜡块温度过低66、细胞学检查中最常用的染色方法是A.Papanicolaou染色B.HE染色C.特殊染色D.免疫细胞化学染色67、免疫组织化学染色中，DAB显色后呈现的颜色是A.红色B.蓝色C.棕黄色D.绿色68、抗原修复常用的方法是A.高温高压修复B.冷冻保存C.石蜡包埋D.酒精脱水69、病理标本取材时，活检组织一般不应小于A.0.2cm×0.2cm×0.2cmB.1cm×1cm×1cmC.2cm×2cm×2cmD.3cm×3cm×3cm70、特殊染色中，Masson三色染色主要用于显示A.胶原纤维B.红细胞C.脂肪D.糖原71、病理切片的常规厚度一般为A.1-2μmB.4-6μmC.10-15μmD.20-30μm72、HE染色中，分化用的试剂是A.盐酸酒精B.蒸馏水C.乙醇D.二甲苯73、病理组织固定时间一般不少于A.6小时B.12小时C.24小时D.48小时74、切片飘片水温一般控制在A.30-35℃B.40-45℃C.55-60℃D.70-75℃75、病理切片的封片常用介质是A.中性树胶B.甘油C.水D.乙醇76、组织脱水最常用的试剂是A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.氯仿77、病理切片脱蜡常用试剂是A.二甲苯B.乙醇C.水D.甘油78、细胞固定液Carnoy液的成分是A.无水乙醇、氯仿、冰醋酸B.甲醛、乙醇、乙酸C.锇酸、甲醛D.丙酮、乙醇79、病理切片的烘片温度一般为A.30-35℃B.37-40℃C.56-60℃D.80-100℃80、特殊染色中，PAS染色主要用于显示A.糖原和黏液物质B.胶原纤维C.弹力纤维D.脂类物质81、病理切片染色时，苏木精染色时间一般为A.1-2分钟B.3-5分钟C.10-15分钟D.30分钟以上82、HE染色中，苏木精使细胞核呈什么颜色？A.红色B.蓝色C.黄色D.绿色83、石蜡切片时，组织脱水常用的试剂是？A.二甲苯B.酒精C.甲醛D.石炭酸84、冰冻切片时，常用的冷冻介质是？A.石蜡B.OCT化合物C.酒精D.甲醛85、下列哪种固定液常用于免疫组化染色？A.95%酒精B.10%中性缓冲福尔马林C.丙酮D.冰醋酸86、PAS染色主要用于检测组织中的？A.蛋白质B.脂肪C.糖原D.核酸87、Masson三色染色中，胶原纤维呈什么颜色？A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色88、Sudan黑B染色主要用于检测？A.糖原B.核酸C.脂类D.黏液89、TUNEL法可用于检测？A.细胞增殖B.细胞凋亡C.细胞坏死D.细胞分化90、抗酒石酸酸性磷酸酶染色主要用于诊断？A.急性白血病B.多毛细胞白血病C.淋巴瘤D.贫血91、组织切片中最常用的刀刃材料是？A.玻璃刀B.钢刀C.钻石刀D.陶瓷刀92、液氮温度约为多少摄氏度？A.-80℃B.-196℃C.-70℃D.-150℃93、DAB显色反应的颜色为？A.蓝色B.红色C.棕色D.绿色94、组织固定时间过长会导致？A.抗原性增强B.细胞形态更清晰C.抗原性减弱D.染色更深95、切片出现皱褶的主要原因是？A.刀片锋利B.组织过硬C.切片太薄D.切速过快96、免疫组化中，一抗孵育的常用温度和时间是？A.37℃，30分钟B.室温，1小时C.4℃过夜D.60℃，10分钟97、HE染色时，酸化乙醇的作用是？A.分化B.脱水C.固定D.透明98、下列哪种染液配制需用蒸馏水？A.福尔马林B.酒精C.二甲苯D.甲醇99、细胞学涂片固定液常用？A.10%中性缓冲福尔马林B.95%酒精C.甲醛气体D.丙酮100、组织包埋方向错误会导致？A.切片厚薄不均B.染色过深C.脱蜡困难D.切片脱落

参考答案及解析1.【参考答案】A【解析】10%中性缓冲甲醛溶液是病理组织固定最常用的固定液，具有良好的穿透力和固定的组织形态，可长期保存组织标本。其他选项要么固定效果不佳，要么会导致组织收缩或硬化。2.【参考答案】A【解析】苏木精染色后需用1%盐酸酒精进行differentiation（分化），以去除多余的染料，使细胞核着色清晰。这是HE染色的关键步骤之一，过度或不足都会影响染色效果。3.【参考答案】C【解析】正丁烷是冰冻切片最常用的冷冻剂，因其冷却温度适中（约-90℃），不会使组织过脆，切片质量较好。液氮温度过低易使组织碎裂，干冰次之。4.【参考答案】A【解析】二甲苯是最常用的组织透明剂，可将脱水后的组织中的酒精置换出来，并使组织透明，便于石蜡渗入。这是石蜡切片制片的关键步骤之一。5.【参考答案】C【解析】DAB（3,3'-二氨基联苯胺）在过氧化物酶催化下产生棕黄色沉淀，是免疫组化最常用的显色剂，颜色稳定，可长期保存。6.【参考答案】B【解析】铁苏木素氧化后可形成不溶性的蓝色沉淀，牢固地结合在细胞核的DNA上，从而显示细胞核结构。这是苏木精染色的重要机制。7.【参考答案】C【解析】锇酸（四氧化锇）对脂质有良好的固定效果，常用于电镜标本的固定，能保持脂质的原始位置。普通HE染色不需要特殊固定脂质。8.【参考答案】C【解析】常规石蜡切片厚度为4-6μm，过厚显微镜下结构层次不清，过薄则容易破碎且可能遗漏重要病理改变。电镜标本则需超薄切片。9.【参考答案】B【解析】Masson三色染色中，胶原纤维呈蓝色或绿色（取决于配方），肌纤维和胞质呈红色，核呈黑色。该染色常用于观察纤维化程度。10.【参考答案】B【解析】PAS（PeriodicAcid-Schiff）染色利用高碘酸氧化糖类物质中的乙二醇基，与Schiff试剂结合呈紫红色，主要用于显示糖原、粘多糖等碳水化合物。11.【参考答案】A【解析】乙醇是最常用的组织脱水剂，因其价格低廉、脱水效果好、对组织收缩较小。通常采用梯度脱水（70%→80%→90%→95%→100%）。12.【参考答案】B【解析】石蜡切片从石蜡中恢复至水相，需先用二甲苯脱蜡，再用梯度乙醇复水，最后入水。这是常规HE染色的必要步骤。13.【参考答案】B【解析】银染法（如Gomori银染）可将网状纤维染成黑色，用于观察肝脏、淋巴组织等处的网状纤维支架结构。14.【参考答案】B【解析】直接法是将标记抗体直接作用于抗原，步骤简单，特异性强，但敏感性相对较低。间接法敏感性更高但特异性略差。15.【参考答案】B【解析】石蜡包埋介质的熔点通常为52-58℃，既能保证组织充分浸润，又不会因温度过高损伤组织。熔点过高或过低都不利于切片质量。16.【参考答案】A【解析】冰冻切片主要用于术中快速诊断，但不适合脂肪组织检查，因为冰冻过程会使脂肪溶解流失。脂肪组织应采用石蜡切片或特殊固定。17.【参考答案】B【解析】组织自溶是由于缺血时间过长，细胞内溶酶体酶释放导致自身消化。因此取材后应尽快固定，以减少自溶对病理诊断的影响。18.【参考答案】B【解析】刚果红染色是显示淀粉样物质的经典方法，在偏振光下呈苹果绿色双折射，有助于确诊淀粉样变性。19.【参考答案】C【解析】成熟的苏木素染色液应呈紫蓝色，这是因为苏木精被氧化为苏木红后才具有染色能力。未成熟的染液染色效果差。20.【参考答案】D【解析】重铬酸钾是含铬的固定液，常用于神经组织的固定，能使髓鞘保持良好形态。但铬盐有致癌性，操作时需注意防护。21.【参考答案】A【解析】福尔马林为甲醛的水溶液，商品浓度约36%～40%。临床病理组织固定通常使用10%中性缓冲福尔马林，即取甲醛原液100ml与蒸馏水或缓冲液900ml混合，使甲醛最终浓度约为4%，pH值调至7.2～7.4，以避免酸性强对组织造成损害，同时保证良好的固定效果。22.【参考答案】C【解析】苏木精-伊红染色法（H-E染色）是病理组织学中最基本、最常用的染色方法。苏木精为碱性染料，使细胞核呈蓝色；伊红为酸性染料，使细胞质和间质呈粉红色。该染色方法操作简便，组织对比清晰，适用于绝大多数石蜡切片的常规观察。23.【参考答案】C【解析】冰冻切片制作时，最常用丙酮作为冷冻介质，将组织块置于预冷的丙酮中速冻至-20℃左右，使组织变硬便于切片机切片。液氮和干冰温度过低，易造成组织脆裂和切片质量下降。乙醇和石蜡不用于冰冻切片冷冻过程。24.【参考答案】A【解析】分化液（通常为1%盐酸酒精）在HE染色中的作用是去除切片上过多的伊红染料，使背景清晰，染色对比度增强。过度分化会导致着色变浅，分化不足则背景着色过深。分化步骤需在显微镜下控制，以达到理想的染色效果。25.【参考答案】B【解析】重铬酸钾是一种强氧化剂，在固定液中主要用于固定和氧化脂类物质。含重铬酸钾的固定液（如Zenker液）常用于显示脂肪组织和内分泌腺，但不能用于脂类染色（因脂类已被氧化）。单独使用时固定效果较差，常与其他固定剂配伍使用。26.【参考答案】C【解析】盐酸是最常用的脱钙液成分，可有效溶解骨组织中的磷酸钙，使骨组织软化便于切片。常用的有10%盐酸溶液或硝酸与盐酸混合液。脱钙过程中需严格控制时间，避免过度脱钙导致组织损伤。脱钙终点可通过X线检查或探针试验判断。27.【参考答案】C【解析】石蜡切片制作中，二甲苯是最常用的透明剂。组织经脱水剂（乙醇）脱水后，需经透明剂处理使组织变得透明，以便石蜡能够充分渗透。二甲苯既能与脱水剂混溶，又能与石蜡互溶，起到承上启下的作用。每张切片通常需浸泡于二甲苯2～3次，每次3～5分钟。28.【参考答案】B【解析】刚果红染色是显示淀粉样物质的经典方法。淀粉样物质与刚果红结合后在普通光镜下呈橘红色，在偏振光下呈苹果绿色双折射，具有重要诊断价值。PAS染色主要用于显示糖原和基底膜，银染色用于显示网状纤维，H-E染色为常规染色。29.【参考答案】E【解析】切片出现刀痕的常见原因包括：组织内遗留砂砾、骨片或刀片内有杂质、切片刀不够锋利、包埋面不平整、组织未充分固定变软或过硬等。蜡块温度过低通常导致切片碎裂而非刀痕，反而有助于减少某些类型的切片缺陷。30.【参考答案】B【解析】PAS染色（过碘酸雪夫染色）基于过碘酸氧化糖类中的乙二醇基，产生醛基后与雪夫试剂反应生成紫红色产物，主要用于显示糖原、黏液物质、基底膜和真菌等。脂肪用苏丹Ⅲ或OsuO4染色，含铁血黄素用普鲁士蓝染色，钙盐用vonKossa染色。31.【参考答案】A【解析】ABC法是免疫组化常用放大方法，全称为亲和素-生物素-过氧化物酶复合法。先使一抗与组织抗原结合，再加入生物素化的二抗，最后加入由亲和素与生物素化过氧化物酶预先形成的复合物（ABC复合物），因亲和素与生物素亲和力极强，形成大分子复合物，使酶量增加，显著提高检测敏感性。32.【参考答案】A【解析】冷冻切片常作为术中快速诊断手段，如需固定后进行特殊染色或免疫组化，常用10%中性缓冲福尔马林固定，固定时间约15～30分钟即可。该固定液对组织形态保存较好，不影响后续特殊染色和免疫反应。乙醇和丙酮多用于冰冻切片的直接固定，Zenker液和Carnoy液因含汞或冰乙酸，不适用于快速诊断。33.【参考答案】B【解析】石蜡切片进入染色前必须先脱蜡，以使染料能够接触组织。最常用的脱蜡溶剂是二甲苯，因石蜡可溶于二甲苯，将切片浸入二甲苯中可迅速溶解并去除石蜡。通常需更换二甲苯2～3次，每次3～5分钟。脱蜡不彻底会导致染色失败或染色不均。34.【参考答案】B【解析】组织脱水时，若直接从低浓度乙醇跳入高浓度乙醇，会因渗透压骤变导致组织收缩、变硬或变形。由低浓度向高浓度逐步过渡（如70%→80%→95%→100%），可使组织内水分平稳置换，减少对组织形态的损伤，保证切片质量。35.【参考答案】B【解析】Masson三色染色是一种常用的结缔组织染色法，可将不同类型的组织成分区分显示。胶原纤维被染成蓝色或绿色（取决于使用的显色剂），肌纤维、胞质和角蛋白呈红色，细胞核呈黑色或深褐色。该染色法广泛用于肝纤维化、心肌纤维化等病变的诊断。36.【参考答案】E【解析】切片出现皱褶的常见原因包括：切片厚薄不均、切片未充分展平、展片水温过低或过高、组织过硬过脆导致弹性差等。染色时间过长主要影响染色深浅和对比度，不会直接导致切片皱褶。展片时水温一般控制在40～45℃为宜，有助于切片平整展开。37.【参考答案】C【解析】六胺银染色（如Gomori银染色）是显示网状纤维的经典方法，网状纤维被染成黑色，背景呈浅黄色。网状纤维主要分布于结缔组织、肝小叶及血管周围。H-E染色不能显示网状纤维，普鲁士蓝用于显示铁黄素，苏丹Ⅲ用于显示脂肪，刚果红用于显示淀粉样物质。38.【参考答案】A【解析】HE染色中，分化步骤使用酸性酒精（1%盐酸乙醇）去除切片上过量的伊红染料，使背景清晰、染色对比增强。分化后需用流水冲洗去除残留的酸性酒精，防止进一步脱色。分化时间需根据染色深浅适当调整，通常在显微镜下观察控制。39.【参考答案】B【解析】骨髓穿刺涂片固定最常用无水甲醇固定，固定时间约10～15分钟。甲醇可使细胞形态保持完整，同时不影响后续瑞氏或吉姆萨染色的着色效果。甲醛固定会使红细胞背景加深、背景不清；乙醇固定可能导致细胞皱缩变形，不适用于血液学涂片。40.【参考答案】C【解析】石蜡包埋时，包埋剂的熔点选择主要依据室温高低。夏季或室温较高时选用高熔点石蜡（熔点56～60℃），以防切片时蜡块软化变形；冬季或室温较低时可选用低熔点石蜡（熔点52～56℃）。熔点过低会导致切片脆裂，过高则不利于切片机正常切片。41.【参考答案】B【解析】福尔马林是甲醛的水溶液，市售饱和甲醛浓度约为37%～40%。临床病理最常用的固定液为10%中性缓冲福尔马林，即取市售饱和甲醛100ml加蒸馏水稀释至约900ml，再加磷酸氢二钠及磷酸二氢钾缓冲对，调节pH至7.2～7.4，定容至1000ml。该浓度固定效果稳定，对组织形态保存良好，是病理切片常规固定首选。42.【参考答案】B【解析】石蜡切片在染色前需彻底去除石蜡，二甲苯是最常用的脱蜡试剂。将已烤片的切片依次浸入纯二甲苯中，通常需更换1～2次，每次时间约3～5分钟，直至石蜡完全溶解。二甲苯折射率与玻璃相近，可使切片透明，便于后续染色观察。操作时需注意通风及防火安全。43.【参考答案】C【解析】苏木精为碱性染料，可与细胞核内酸性的DNA和RNA结合，使细胞核呈现蓝色或蓝紫色。伊红为酸性染料，主要使细胞质和胶原纤维呈粉红色至红色。HE染色是病理组织学最基础的染色方法，蓝色与红色的对比使组织结构清晰可辨，是日常诊断切片的标准染色方案。44.【参考答案】A【解析】冰冻切片是术中快速诊断的重要技术，通常在低温下直接切割未固定的新鲜组织。液氮温度可达-196℃，能使组织迅速冷冻变硬，便于切出薄而完整的切片。异戊烷也常用于低温冷冻。冰冻切片优点是速度快，但质量较石蜡切片略差，细胞细节不如石蜡切片清晰。45.【参考答案】B【解析】Masson三色染色是常用的结缔组织染色方法。该染色法可将胶原纤维染成蓝色或绿色，肌纤维、胞质和角蛋白呈红色，细胞核呈棕黑色。原理是利用不同染料在不同pH条件下的竞争结合特性，靛胭脂或苯胺蓝能将胶原纤维染成蓝色或绿色，常用于鉴别纤维化与炎症。46.【参考答案】D【解析】标本固定时，固定液用量应充足，一般要求固定液与标本体积之比不少于10:1。固定液过少会导致固定不充分，影响组织形态保存和后续染色效果。固定时间一般也需要足够，多数标本固定6～24小时为宜，过短或过长均可能影响切片质量和诊断准确性。47.【参考答案】B【解析】PAS（过碘酸雪夫）染色主要用于显示组织中的多糖类物质，如糖原、黏液、基底膜、肾小球基底膜等。其原理是过碘酸氧化糖类中的乙二醇基，生成醛基，醛基再与雪夫试剂反应生成紫红色化合物。糖原呈紫红色颗粒状分布于胞质中，该染色在糖尿病、糖原贮积病等有重要价值。48.【参考答案】A【解析】石蜡包埋是组织切片最常用的包埋方法。将脱水透明的组织块浸入熔化的石蜡中，使石蜡渗入组织间隙，冷却后形成坚硬的蜡块，便于在切片机上切成薄片。石蜡熔点一般选用56～58℃，根据室温可适当调整。包埋时需注意组织方向，以保证切片能显示正确的组织结构层次。49.【参考答案】A【解析】福尔马林固定会造成蛋白质交联，掩蔽部分抗原表位，需进行抗原修复以暴露抗原决定簇。常用的抗原修复方法包括高温修复（如高压锅、微波炉）、酶修复等。高温修复中最常用的是柠檬酸钠缓冲液pH6.0或EDTA缓冲液pH8.0，加热至沸点维持一定时间，使交联的抗原-抗体表位得以暴露。50.【参考答案】D【解析】油镜使用香柏油或合成浸油，其折射率约为1.515，与玻璃切片盖玻片的折射率相近，可减少光线折射损失，提高显微镜的分辨率和图像清晰度。使用油镜时需在盖玻片上滴加一滴浸油，然后将油镜镜头浸入油中观察。观察完毕后需用二甲苯或专用清洁剂擦拭镜头。51.【参考答案】A【解析】刚果红染色是检测淀粉样变性的经典方法。淀粉样物质在刚果红染色下呈橙红色，在偏振光显微镜下可见特征性的苹果绿双折射现象，这是诊断淀粉样变性的金标准。该染色主要用于肾脏、肝脏、脾脏等器官淀粉样变的诊断，对系统性淀粉样变的定位和定性具有重要价值。52.【参考答案】B【解析】石蜡切片常规厚度为2～4μm，一般为3μm左右。切片过厚会影响光线透过和细胞层次的分辨，过薄则可能导致组织碎裂或结构不完整。切片厚度的选择应根据组织类型和观察目的适当调整，如骨组织脱钙后切片可稍厚，而血液病骨髓切片宜稍薄。现代切片机可达到1～2μm的超薄切片。53.【参考答案】B【解析】分化是HE染色中的重要步骤，目的是去除组织中与染料非特异性结合的部分，使染色更加清晰。常用75%乙醇配制的1%盐酸酒精进行分化，切片浸入数秒至数十秒，直至蓝色适度褪去。分化后需立即用流水冲洗终止反应，防止过度分化导致核染色过浅。分化程度直接影响切片质量。54.【参考答案】A【解析】骨组织或钙化病变组织因含大量钙盐，质地坚硬，需脱钙后才能切片。常用的脱钙试剂包括稀盐酸、硝酸、甲酸以及EDTA等螯合剂。稀盐酸脱钙速度快，但可能影响抗原性和核酸保存；硝酸脱钙效果温和；EDTA脱钙速度慢但能较好保存组织成分。脱钙完成后需充分水洗以去除残留酸。55.【参考答案】A【解析】细胞学涂片常用的固定液是95%乙醇，尤其是巴氏染色法，固定液为95%乙醇。固定时间一般不少于15分钟，以确保细胞形态完整和染色清晰。对于某些特殊染色如Papanicolaou染色，需严格使用95%乙醇固定，固定不充分会导致细胞结构模糊，影响细胞学诊断的准确性。56.【参考答案】A【解析】HE染色是石蜡切片最常用的染色方法，也是病理诊断的基础。苏木精使细胞核染成蓝色，伊红使细胞质和间质染成红色，两者配合可清晰显示组织的结构和细胞形态。该方法操作简单、染色稳定、成本低廉，几乎所有病理切片都需经HE染色后才能进行初步诊断，其他特殊染色在此基础上选择性应用。57.【参考答案】A【解析】组织脱水是石蜡切片制备的关键步骤，目的是用挥发性有机溶剂置换出组织中的水分。最常用的脱水试剂是梯度乙醇，一般按50%、70%、80%、90%、95%、100%的顺序逐级脱水。乙醇脱水效果好、价格低廉，但高浓度乙醇易使组织变脆，因此最后两级100%乙醇脱水时间不宜过长，一般每级2小时以上。58.【参考答案】A【解析】封片是用封固剂将盖玻片与载玻片粘合，保护切片并便于长期保存。中性树胶是最常用的封固剂，其折光率与玻璃相近，透明性好，且呈中性不损伤组织。封片时需将加有染色的切片用二甲苯透明后，滴加适量中性树胶，再盖上盖玻片，避免气泡产生。封片后应水平放置干燥，一般需24～48小时完全固化。59.【参考答案】D【解析】固定液渗透速度受多种因素影响：组织块大小直接影响固定深度，一般不超过2cm厚；温度升高可加速渗透，但过高温度可能破坏组织；固定液浓度越高渗透越快，但并非浓度越高越好。此外，固定液的种类、pH值、搅拌等因素也影响固定效果。因此实际操作中需综合控制各项条件以获得最佳固定效果。60.【参考答案】B【解析】透明是石蜡切片制片中的重要环节，位于脱水之后、包埋之前。常用的透明剂是二甲苯，其作用是置换组织中的脱水剂（乙醇），并使石蜡能够顺利渗入组织内部。透明剂需与脱水剂和石蜡均互溶，二甲苯与乙醇及石蜡均可任意比例混溶。透明时间不宜过长，一般2～3次，每次3～5分钟即可，过长会导致组织变脆。61.【参考答案】B【解析】10%中性缓冲福尔马林是最常用的组织固定液，能有效保存组织形态结构，防止自溶和腐败，适用于大多数病理检查。其他固定液各有特殊用途，如乙醇用于快速冰冻切片，丙酮常用于免疫组化固定。62.【参考答案】B【解析】苏木精为碱性染料，可与酸性物质结合，细胞核内的DNA和RNA呈酸性，故被苏木精染成蓝色。伊红为酸性染料，使细胞质和胶原纤维等呈粉红色。这是HE染色最基本的原理。63.【参考答案】A【解析】液氮温度可达-196℃，可使组织迅速冷冻，适合术中快速病理诊断。石蜡用于常规切片，包埋胶用于某些特殊制片，水不能起到冷冻作用。64.【参考答案】A【解析】稀盐酸或硝酸能有效溶解骨质中的钙盐，使坚硬组织变软便于切片。生理盐水无脱钙作用，无水乙醇用于脱水，二甲苯用于透明。65.【参考答案】C【解析】切片厚度适中是理想状态，不会导致皱褶。切片刀钝、组织硬度过高或蜡块过冷都可能导致切片皱褶，需要调整切片条件。66.【参考答案】A【解析】Papanicolaou染色（巴氏染色）是宫颈脱落细胞学检查的经典染色方法，能清晰显示细胞核和细胞质的细节，有利于细胞病变的判断。67.【参考答案】C【解析】DAB（二氨基联苯胺）在过氧化物酶催化下生成棕黄色沉淀，是免疫组化最常用的显色剂。红色常用AEC显色剂，蓝色常用VectorSkyBlue显色剂。68.【参考答案】A【解析】高温高压修复可打开甲醛交联造成的表位遮蔽，恢复抗原性。冷冻保存、石蜡包埋和酒精脱水都是制片步骤，不能修复抗原。69.【参考答案】A【解析】活检组织一般不小于0.2cm×0.2cm×0.2cm，过小可能影响诊断。过大则固定不充分，影响切片质量。具体大小视检查目的而定。70.【参考答案】A【解析】Masson三色染色可将胶原纤维染成蓝色或绿色，肌纤维染成红色，细胞核染成黑色，主要用于观察纤维化病变。红细胞用孔雀绿染色，脂肪用油红O染色，糖原用PAS染色。71.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片厚度为4-6μm，既能保持组织结构完整，又便于光线透过显微镜观察。太薄结构不完整，太厚影响观察和染色效果。72.【参考答案】A【解析】盐酸酒精用于分化，去除过度染色的苏木精，使蓝色更清晰。蒸馏水用于蓝化，乙醇用于脱水，二甲苯用于透明。各试剂作用不同，需严格区分。73.【参考答案】C【解析】固定时间一般不少于24小时，确保固定充分。但也不宜过长，以免组织过硬影响切片。小标本可适当缩短，大标本需适当延长。74.【参考答案】C【解析】飘片水温一般为55-60℃，可使切片展平又不致过热变形。温度过低切片不易展开，过高则可能使组织变形或脱片。75.【参考答案】A【解析】中性树胶折射率与玻璃相近，封片后切片持久清晰。甘油适用于临时封片，水和乙醇不能作为封片介质，会导致切片干燥变形。76.【参考答案】A【解析】乙醇是最常用的组织脱水剂，梯度浓度（70%、80%、90%、95%、100%）可有效去除组织水分，为后续透明和浸蜡做准备。77.【参考答案】A【解析】二甲苯可有效溶解石蜡，使切片脱蜡后便于复水和染色。乙醇用于脱水，水用于复水，甘油不能作为脱蜡剂使用。78.【参考答案】A【解析】Carnoy液由无水乙醇、氯仿和冰醋酸组成，固定迅速，对细胞核和染色体显示效果好，常用于骨髓和淋巴瘤病理检查。79.【参考答案】C【解析】56-60℃烘片可使切片牢固粘附于玻片上，同时避免高温导致组织变形或抗原破坏。温度过低粘附不牢，过高影响组织质量。80.【参考答案】A【解析】PAS（PeriodicAcid-Schiff）染色利用高碘酸氧化糖类物质，与Schiff试剂反应呈紫红色，主要用于显示糖原、黏液物质和基底膜。胶原用Masson染色，弹力纤维用Verhoeff染色，脂类用油红O染色。81.【参考答案】B【解析】苏木精染色时间一般为3-5分钟，具体时间根据染色液浓度和室温调整。染色过浅结构不清，过深需要重新分化。不同品牌染色液浓度有所差异。82.【参考答案】B【解析】苏木精为碱性染料，易与细胞核内的酸性物质结合，使细胞核呈蓝紫色。伊红为酸性染料，与细胞质等碱性物质结合呈红色。这是HE染色的基本原理，是病理切片最常用的染色方法。83.【参考答案】B【解析】组织脱水是石蜡切片制作的关键步骤，常用梯度酒精进行脱水。先用低浓度酒精逐渐过渡到高浓度酒精，将组织中的水分置换出来，以便后续透明和浸蜡。二甲苯用