2025年病理学技术试题及答案

2025年病理学技术试题及答案一、单项选择题（共25题，每题1分，共25分）1.按照2024年更新的《临床病理标本固定技术规范》要求，常规手术切除标本的标准固定液及固定时间要求为A.10%中性缓冲福尔马林，固定6-12hB.10%中性缓冲福尔马林，固定12-48hC.4%多聚甲醛，固定24-72hD.Bouin液，固定12-24h2.全自动组织脱水机常规处理流程中，最易造成组织过度硬化、收缩变脆的试剂环节是A.75%乙醇脱水2hB.95%乙醇脱水1hC.无水乙醇脱水超过3hD.二甲苯透明30min3.对于含皮肤、消化道管壁等层次分明的组织，包埋时的正确切面要求是A.组织平整面朝向包埋盒底部，层次面与包埋盒底面平行B.组织切缘面垂直于包埋盒底部，确保各层次均能被切到C.组织最厚处朝向包埋盒底部，减少切片损耗D.脂肪组织面朝向包埋盒底部，避免脂肪脱片4.术中冰冻病理诊断的常规切片厚度标准为A.2-3μmB.4-6μmC.7-9μmD.10-12μm5.Gordon-Sweets网状纤维染色法中，使网状纤维呈现黑色的关键试剂是A.酸性高锰酸钾B.氨性银溶液C.氯化金D.硫代硫酸钠6.免疫组化染色中，采用柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）进行高压热修复的主要目的是A.去除内源性过氧化物酶活性B.打开甲醛固定导致的蛋白抗原交联，暴露抗原决定簇C.减少一抗的非特异结合D.增强DAB显色的敏感性7.按照2024版《临床分子病理实验室单细胞测序技术应用规范》要求，用于肿瘤单细胞转录组测序的新鲜组织标本，获取后需在多长时间内制备成单细胞悬液A.30min内B.2h内C.12h内D.24h内8.病理科处理疑似结核分枝杆菌感染的标本时，对应的生物安全防护等级要求为A.BSL-1级B.BSL-2级C.BSL-3级D.BSL-4级9.Ziehl-Neelsen抗酸染色法中，抗酸杆菌的染色结果为A.红色B.蓝色C.紫色D.黑色10.骨组织标本脱钙时，判断脱钙终点的最可靠方法是A.针刺法，用针穿刺组织无阻力感B.肉眼观察法，组织呈半透明状C.X线摄片法，观察组织内无高密度钙化影D.化学检测法，检测脱钙液中钙离子浓度11.按照2024版《数字病理切片扫描与存储技术规范》要求，用于常规病理诊断的全切片图像（WSI）的扫描分辨率需达到A.10倍物镜扫描，分辨率0.5μm/像素B.20倍物镜扫描，分辨率0.25μm/像素C.40倍物镜扫描，分辨率0.25μm/像素D.60倍物镜扫描，分辨率0.1μm/像素12.免疫组化染色中，用于验证一抗特异性及染色流程可靠性的阳性对照，最佳选择是A.已知表达目标抗原的同类型存档标本，与待测标本同步固定、同步处理B.购买的商品化阳性对照片C.待测标本内的正常表达目标抗原的自身组织成分D.已知不表达目标抗原的阴性标本13.冰冻切片制备完成后，固定的最佳试剂及时间为A.10%中性福尔马林固定1minB.95%乙醇固定1minC.丙酮固定5minD.4%多聚甲醛固定10min14.常规HE染色封片时，中性树胶的使用要求为A.浓度越稀越好，减少气泡产生B.浓度以能够形成均匀薄层、不产生溢胶为宜，浓度过高易产生条纹、气泡，浓度过低易导致封片后溢胶、褪色C.封片时树胶量越多越好，完全覆盖盖玻片D.树胶需加入二甲苯稀释至透明如水的状态15.FISH检测中，组织切片的厚度标准为A.2-3μmB.4-5μmC.6-8μmD.10μm16.按照《病理科建设与管理指南（2024版）》要求，常规石蜡标本、病理切片的保存期限为A.10年B.15年C.30年D.永久保存17.Masson三色染色中，胶原纤维的染色结果为A.红色B.蓝色C.黄色D.黑色18.对于核抗原（如Ki-67、ER、PR）的免疫组化染色，最佳的抗原修复方式为A.胰酶消化修复37℃10minB.EDTA缓冲液（pH9.0）高压热修复C.柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）微波修复D.无需抗原修复19.标本固定时，固定液的体积与标本体积的比例至少应为A.2:1B.5:1C.10:1D.20:120.全自动组织脱水机的试剂更换原则，以下说法正确的是A.按照固定的使用天数定期更换，无需考虑处理标本量B.按照累计处理标本量、试剂浓度检测结果动态调整更换频率，无水乙醇浓度低于95%时需及时更换C.脱水试剂可反复使用，无需更换，仅需定期添加新试剂补充损耗D.二甲苯透明试剂需每周更换一次，与使用量无关21.实时荧光定量PCR检测肿瘤驱动基因突变时，提取的组织DNA的OD260/OD280比值合格范围为A.1.4-1.6B.1.8-2.0C.2.2-2.4D.2.5以上22.病理大体标本摄影时，为准确显示标本大小，需遵循的原则是A.标本旁放置比例尺，比例尺与标本处于同一聚焦平面B.拍摄时尽量拉远镜头，确保标本全部纳入视野C.采用暖光照明，提高标本色彩鲜艳度D.标本固定24h后再拍摄，避免标本变形23.HE染色过程中，最易导致切片脱片的原因是A.切片烤片时间不足、载玻片防脱处理不佳，或切片水化过程中水流直接冲击组织面B.苏木素染色时间过长C.伊红染色时间过短D.分化时间过长24.宫颈液基细胞学涂片（TCT）制备完成后，采用的固定方式为A.95%乙醇固定15minB.10%中性福尔马林固定30minC.无水乙醇固定5minD.空气干燥后甲醇固定1min25.过碘酸-雪夫（PAS）染色主要用于显示以下哪种成分A.胶原纤维B.糖原、真菌细胞壁及基底膜C.脂肪D.含铁血黄素二、多项选择题（共15题，每题2分，共30分。每题的备选项中，有2个或2个以上符合题意，至少有1个错项，错选本题不得分，少选所选的每个选项得0.5分）1.以下属于10%中性缓冲福尔马林固定液优点的有A.渗透速度快，对组织形态结构保存好B.固定后组织硬度适宜，便于切片C.对大多数抗原保存较好，适用于常规HE、免疫组化及分子检测D.不会产生任何组织收缩2.组织切片出现厚薄不均、刀痕的常见原因有A.切片刀有缺口、刀刃不锋利B.组织块固定脱水不佳，硬度不均C.切片机推进器故障，步进精度不足D.烤片温度过高3.HE染色中，核染色过浅的常见原因有A.苏木素染液氧化过度，染色能力下降B.分化时间过长，苏木素被过度洗脱C.固定不及时，组织自溶导致核染色质溶解D.伊红染色时间过短4.免疫组化染色出现弥漫性背景染色的原因包括A.一抗浓度过高，非特异结合增加B.抗原修复时间过长，导致组织内蛋白非特异吸附抗体C.封闭不充分，内源性生物素未被完全阻断D.DAB显色时间过长5.以下属于分子病理检测前质量控制环节的有A.标本固定时间核查，确保固定时间符合12-48h要求B.肿瘤细胞占比评估，确保肿瘤细胞含量满足检测下限要求C.核酸浓度及纯度检测，确保核酸质量合格D.定期对检测仪器进行校准6.病理科生物安全防护的要求，以下说法正确的有A.接触标本时需佩戴手套，操作完成后及时洗手B.含有二甲苯、甲醛等有毒试剂的区域需配备通风橱，定期检测空气中有害物质浓度C.废弃的病理标本需经高压灭菌或化学处理后按医疗废物处置D.感染性标本操作时可在普通实验台上进行，无需生物安全柜7.骨组织脱钙常用的脱钙液包括A.10%硝酸脱钙液B.EDTA脱钙液C.甲酸-甲醛脱钙液D.10%中性福尔马林8.特殊染色中，用于显示真菌的染色方法有A.PAS染色B.六胺银染色（GMS）C.抗酸染色D.油红O染色9.术中冰冻切片的适用范围包括A.确定病变性质，判断肿瘤良恶性B.评估手术切缘是否有肿瘤残留C.确定切除组织中的病变部位，指导后续标本取材D.替代常规石蜡诊断，作为最终诊断依据10.病理技术工作中，常见的职业危害因素包括A.甲醛、二甲苯等有毒化学试剂B.石蜡、组织碎屑等可吸入颗粒物C.结核分枝杆菌、HIV等病原微生物D.切片刀、切片机等锐器伤风险11.免疫荧光染色的质量控制要求包括A.切片需避光操作，避免荧光淬灭B.设置阳性及阴性对照，验证抗体特异性C.封片采用抗荧光淬灭封片剂D.染色后的切片可在室温下长期保存12.以下关于石蜡包埋的操作要点，说法正确的有A.包埋时石蜡温度需控制在60-65℃，温度过高会导致组织变脆B.包埋过程中需用镊子轻压组织，确保组织平整面与包埋盒底部完全接触C.多块小组织包埋时需集中放置在同一平面，避免切片时遗漏D.包埋完成后需立即放入冰台快速冷却，减少石蜡结晶形成13.细胞学涂片的质量评价标准包括A.涂片上细胞分布均匀，无重叠、无退变B.细胞结构清晰，核浆对比分明C.无明显人工假象，如挤压变形、染色沉淀D.涂片越厚越好，收集更多细胞14.数字病理技术的应用场景包括A.远程病理会诊B.病理医师初级筛查、辅助诊断C.病理教学与培训D.人工智能病理辅助诊断模型训练15.病理标本取材的基本要求包括A.取材时需核对标本信息，确保标本与申请单一致B.取材刀具需锋利，避免挤压组织造成人工假象C.病变部位、切缘、正常对照组织均需按规范取材，做好部位标记D.取材厚度控制在2-3mm，确保固定液能够充分渗透三、判断题（共10题，每题1分，共10分。正确打√，错误打×）1.所有病理标本均需在固定后再切开，避免固定液污染。2.二甲苯的作用是透明，因其能与乙醇及石蜡混溶，替换组织中的乙醇后便于石蜡渗透。3.免疫组化染色中，只要出现阳性染色即可判断为目标抗原表达，无需对照。4.冰冻切片无需固定，可直接染色。5.特殊染色的结果具有特异性，可直接作为疾病诊断的独立依据。6.用于分子检测的标本，固定时可使用Bouin液等含重金属的固定液，提高固定效果。7.病理切片封片后若出现少量小气泡，不影响诊断时可保留，无需重新封片。8.全自动免疫组化染色仪无需进行日常维护，可连续不间断运行。9.含脂肪较多的组织，脱水时需适当延长无水乙醇、二甲苯的处理时间，确保脂肪被充分溶解。10.病理技术人员只需掌握制片技术，无需了解病理诊断相关知识。四、简答题（共3题，每题7分，共21分）1.简述常规石蜡切片HE染色的基本流程及质量控制要点。2.简述影响免疫组化染色结果的常见分析前因素。3.简述病理科实验室生物安全的核心管理要求。五、案例分析题（共1题，14分）某三甲医院病理科在常规免疫组化染色中，连续10张乳腺癌组织切片的ER染色均出现核染色浅、背景强的问题，其中阳性对照片（已知ER强阳性的乳腺癌存档标本，既往染色结果合格）也出现同样的染色结果，技术员更换新的同批次一抗后仍未解决问题。请结合病理技术专业知识，分析可能的原因，并提出对应的解决措施。参考答案及解析一、单项选择题1.答案：B。解析：2024版WS/T815《临床病理标本固定技术规范》明确，常规病理标本使用10%中性缓冲福尔马林（pH7.2-7.4）为标准固定液，手术切除大标本固定时间需控制在12-48h，穿刺活检标本固定时间为6-12h；固定不足会导致抗原丢失、结构不清，固定过长会引起抗原交联过度、核酸降解，影响后续检测。2.答案：C。解析：无水乙醇为强脱水剂，若组织在无水乙醇中停留超过3h，会导致水分过度置换、蛋白质过度凝固，后续浸蜡时石蜡无法均匀渗透，切片时易出现碎屑、龟裂；二甲苯常规透明时间为20-40min，超时虽会导致组织变脆，但临床中无水乙醇超时是组织硬化的最常见诱因。3.答案：B。解析：皮肤、消化道管壁、宫颈锥切等层次分明的标本，包埋时需将各层次切面垂直于包埋盒底面，保证切片时可一次性观察到从上皮层到深层间质的全层结构，避免切面倾斜导致层次缺失，影响浸润深度、切缘的判断。4.答案：B。解析：常规石蜡切片HE染色厚度为3-4μm，术中冰冻切片因组织未经固定脱水，冰晶导致硬度不均，过薄易皱褶破碎，过厚则细胞重叠影响诊断，标准厚度为4-6μm；脂肪组织冰冻切片可调整至6-8μm，中枢神经活检可调整至5-7μm。5.答案：B。解析：Gordon-Sweets法利用网状纤维的嗜银性，氨性银溶液中的银离子吸附于网状纤维表面，经甲醛还原为金属银而呈黑色；酸性高锰酸钾为氧化剂用于暴露结合位点，氯化金用于细化银染颗粒，硫代硫酸钠用于去除未还原银离子。6.答案：B。解析：甲醛固定会形成亚甲基桥交联，封闭抗原决定簇导致假阴性，热修复的核心作用是打断交联、暴露抗原位点；去除内源性过氧化物酶依靠3%过氧化氢孵育，减少非特异结合依靠血清封闭，DAB敏感性与显色液配比、孵育时间相关。7.答案：A。解析：2024版单细胞测序规范明确，用于单细胞转录组测序的新鲜标本离体后30min内须放入专用保存液并启动悬液制备，放置超过30min会导致RNA快速降解、细胞活性下降40%以上，造成数据分群偏差；若无法及时处理需4℃低温转运，最长保存不超过24h。8.答案：B。解析：结核分枝杆菌属于第二类病原微生物，常规标本处理、切片、染色操作需在BSL-2级实验室进行，涉及匀浆、离心等气溶胶操作需在生物安全柜内开展；BSL-3级实验室适用于大量活菌培养、动物感染实验，常规病理诊断无需达到该等级。9.答案：A。解析：抗酸杆菌细胞壁含大量分枝菌酸，可与石炭酸复红牢固结合，不被盐酸酒精脱色而呈红色，背景及非抗酸菌经亚甲蓝复染呈蓝色。10.答案：C。解析：针刺法、肉眼观察法主观性强，易出现脱钙不足或过度；化学检测法操作繁琐，X线摄片可清晰显示组织内残留钙化灶，是判断脱钙终点的金标准；脱钙过度会导致抗原、核酸降解，脱钙不足则切片时易出现刀痕、碎裂。11.答案：C。解析：2024版数字病理规范要求，用于常规HE、免疫组化诊断的全切片图像，需采用40倍物镜扫描，空间分辨率不低于0.25μm/像素，以清晰显示核分裂象、微生物等细微结构；质控、教学用切片可采用20倍扫描，FISH检测需60倍以上油镜扫描。12.答案：C。解析：自身对照（待测标本内正常表达目标抗原的组织成分，如肺癌标本内的正常肺泡上皮作为TTF-1对照）是最可靠的阳性对照，可直接反映标本固定、处理及染色流程对结果的影响；无自身对照时可采用同流程处理的阳性存档外对照，商品化对照片仅可验证试剂有效性。13.答案：B。解析：冰冻切片未经脱水，细胞含水量高，95%乙醇固定1min可快速凝固蛋白质，减少细胞肿胀、结构破坏，保持核浆对比度；福尔马林固定会导致切片严重皱褶，丙酮固定易致细胞收缩。14.答案：B。解析：中性树胶折光率需接近玻璃（约1.52），浓度过高易产生牵拉条纹、滞留气泡，浓度过低易溢胶、长期保存致褪色；封片时树胶量以刚覆盖组织、无明显溢胶为宜。15.答案：B。解析：FISH检测石蜡切片厚度需控制在4-5μm，过薄会导致细胞核切断、信号丢失假阴性，过厚会致核重叠、信号计数错误假阳性；切片需捞于防脱载玻片，60℃烤片2h以上避免脱片。16.答案：C。解析：2024版《病理科建设与管理指南》明确，常规石蜡包埋块、病理切片保存期限为报告出具之日起30年，细胞学涂片保存15年，电子诊断档案需永久保存。17.答案：B。解析：Masson三色染色后胶原纤维呈蓝色，肌纤维、红细胞呈红色，细胞核呈蓝黑色，常用于评估器官纤维化程度、肿瘤间质浸润。18.答案：B。解析：核抗原与核蛋白结合紧密，甲醛固定后交联程度高，pH9.0EDTA碱性环境下热修复的抗原暴露效率优于pH6.0柠檬酸盐，可有效打开核蛋白交联，增强核染色强度；胰酶消化多用于膜抗原修复。19.答案：C。解析：固定液体积需至少为标本体积的10倍，才能保证固定液有效渗透，避免组织自溶；大标本需每隔1-2cm切开，空腔脏器需剪开平铺，保证固定充分。20.答案：B。解析：脱水机试剂更换需结合累计标本量、试剂浓度检测结果动态调整，无水乙醇浓度低于95%时脱水能力明显下降，需及时更换；试剂无需按固定周期更换，需根据实际使用状态调整，避免成本浪费或制片质量下降。21.答案：B。解析：DNA纯度合格标准为OD260/OD280在1.8-2.0之间，低于1.8提示蛋白质污染会抑制PCR酶活性，高于2.0提示RNA污染或DNA降解，会导致定量偏差。22.答案：A。解析：大体标本摄影需放置带刻度的比例尺，且比例尺与标本处于同一聚焦平面，准确反映病变大小；拍摄需采用冷光源保证色彩真实，标本新鲜切开后及时拍摄，避免固定后收缩、变色。23.答案：A。解析：脱片常见原因包括载玻片防脱涂层质量差、烤片不足致贴附不牢、水流直接冲击组织面、修复时沸腾过剧等；苏木素、伊红染色及分化时间仅影响染色对比度，不会直接导致脱片。24.答案：A。解析：TCT薄层涂片制备后需立即用95%乙醇固定15min，保持细胞形态；固定不足会导致细胞肿胀、核结构不清，固定过长会致细胞收缩、染色质浓集，影响判读。25.答案：B。解析：PAS染色通过过碘酸氧化多糖乙二醇基为醛基，与雪夫试剂结合形成紫红色复合物，可显示糖原、真菌细胞壁、肾小球基底膜、黏液等成分；胶原纤维由Masson染色显示，脂肪由油红O显示，含铁血黄素由普鲁士蓝染色显示。二、多项选择题1.答案：ABC。解析：10%中性缓冲福尔马林渗透快、形态保存好、组织硬度适宜、对抗原及核酸保存佳，是常规固定首选，但固定过程仍会造成少量组织收缩，不存在完全无收缩的固定液，D选项错误。2.答案：ABC。解析：切片刀缺口、刀刃不钝会产生平行刀痕，组织软硬不均、切片机推进器精度不足会导致切片厚薄不均、皱褶；烤片温度过高会导致组织收缩裂隙，不会造成切片时的刀痕和厚薄不均，D选项错误。3.答案：ABC。解析：苏木素失效、分化过度、组织自溶均会导致核染色浅、结构不清；伊红染色时间影响胞质着色，与核染色无关，D选项错误。4.答案：ABCD。解析：一抗浓度过高、修复过度、封闭不足、显色时间过长均会导致弥漫背景黄染，需通过优化抗体浓度、控制修复显色时间、充分封闭减少非特异染色。5.答案：ABC。解析：检测前质控涵盖标本采集、固定、处理、核酸提取等环节，仪器校准属于分析中质控环节，D选项错误。6.答案：ABC。解析：感染性标本、气溶胶产生操作必须在生物安全柜内进行，严禁在开放实验台操作高致病性病原微生物标本，D选项错误。7.答案：ABC。解析：10%硝酸、甲酸-甲醛为强酸脱钙液，脱钙快，适用于致密骨组织；EDTA为螯合型脱钙液，脱钙温和，对抗原、核酸保存好，适用于需免疫组化、分子检测的骨标本；中性福尔马林为固定液，无脱钙作用，D选项错误。8.答案：AB。解析：PAS可将真菌细胞壁染为紫红色，六胺银可将真菌菌丝、孢子染为黑色，是真菌检测常用方法；抗酸染色用于抗酸杆菌，油红O用于脂肪，C、D选项错误。9.答案：ABC。解析：术中冰冻切片受切片质量、检测时间限制，仅作为术中临时指导手术方案的依据，不能替代常规石蜡切片作为最终诊断，D选项错误。10.答案：ABCD。解析：病理科存在化学性（有毒试剂）、生物性（病原微生物）、物理性（锐器伤、可吸入颗粒物）等多种职业危害，需做好职业防护，定期健康检查。11.答案：ABC。解析：免疫荧光基团易光照淬灭，需避光操作、使用抗淬灭封片剂，4℃避光保存并在1周内观察，不可室温长期保存，D选项错误。12.答案：ABCD。解析：包埋石蜡温度控制在60-65℃避免组织变脆，需保证组织平整、小组织集中，快速冷却减少石蜡结晶，以上均为包埋操作的核心要求。13.答案：ABC。解析：细胞学涂片需薄而均匀，细胞过厚会导致重叠、核结构观察不清，影响诊断，D选项错误。14.答案：ABCD。解析：随着全切片扫描技术成熟，数字病理已广泛应用于远程会诊、辅助诊断、教学、AI模型训练，2024年国家卫健委明确符合规范的数字病理诊断报告具备同等法律效力。15.答案：ABCD。解析：标本取材需严格执行核对制度，使用锋利刀具避免挤压假象，规范选取病变、切缘及对照组织，组织块厚度不超过3mm保证固定脱水充分。三、判断题1.答案：×。解析：体积较大的标本需在新鲜状态下每隔1-2cm切开再放入固定液，否则固定液无法渗透至组织内部，导致中心部位自溶。2.答案：√。解析：二甲苯可与乙醇、石蜡混溶，能够置换组织中的脱水剂，使石蜡顺利渗透进入组织，起到透明媒介的作用。3.答案：×。解析：免疫组化结果判读必须首先确认阳性、阴性对照成立，对照不成立时染色结果无效，需重新染色，不能仅依靠阳性信号判断抗原表达。4.答案：×。解析：冰冻切片切取后需立即用95%乙醇固定，否则细胞会快速退变、肿胀，核结构破坏，影响诊断。5.答案：×。解析：多数特殊染色仅能显示特定组织成分，需结合HE形态、临床信息综合判断，不能作为疾病诊断的独立依据。6.答案：×。解析：Bouin液含苦味酸、重金属离子，会导致核酸降解、PCR反应抑制，不可用于分子检测标本固定，分子检测标本必须使用10%中性缓冲福尔马林固定。7.答案：√。解析：若气泡位于组织外、不遮挡病变区域，无需重新封片，避免反复封片导致组织脱落、染色褪色。8.答案：×。解析：免疫组化染色仪需定期更换试剂、清洗管路、校准加样精度，避免管路堵塞、试剂失效导致染色失败。9.答案：√。解析：脂肪组织脂肪含量高，常规流程易残留脂肪导致切片困难，需适当延长无水乙醇脱水、二甲苯透明时间，充分溶解脂肪。10.答案：×。解析：病理技术是诊断的基础，技术人员需掌握基本病理诊断知识，熟悉常见病变的取材要求、染色标准，才能保障制片质量满足诊断需求。四、简答题1.参考答案：（1）基本流程（3分）：切片60℃烤片30min→二甲苯脱蜡2次各10min→梯度乙醇水化（无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇各2min，自来水冲洗2min）→苏木素染色5-10min→自来水洗→1%盐酸酒精分化数秒→自来水洗→温水/稀氨水返蓝→伊红染色1-3min→梯度乙醇脱水（80%、95%、无水乙醇各2min）→二甲苯透明2次各2min→中性树胶封片。（2）质量控制要点（4分）：①脱蜡需彻底，定期更换二甲苯，脱蜡不彻底会导致斑块状着色、染色不均；②苏木素需定期过滤、监测成熟度，分化时间根据染液新旧、环境温度调整，以核染色清晰、核浆对比分明为宜，避免分化过度核浅染或分化不足核过染、胞质蓝染；③伊红浓度适宜，脱水彻底避免切片发雾；④封片避免气泡、溢胶，树胶浓度适宜避免条纹。2.参考答案：（1）标本固定因素（2分）：固定液类型错误（如使用非中性福尔马林、含重金属固定液）、固定时间不足（<6h）或过长（>72h）、固定液量不足、大标本未及时切开导致自溶，均会造成抗原丢失或交联过度，出现假阴性。（2）组织处理因素（2分）：脱水、透明、浸蜡过度导致组织变脆、抗原破坏，或处理不充分导致浸蜡不全、切片脱落；骨组织使用强