病理检验技术题库及答案

病理检验技术题库及答案一、单选题（共30题）1.病理检验中最常用的常规固定液是（）A.95%乙醇B.10%中性福尔马林C.丙酮D.戊二醛E.Bouin液2.常规石蜡切片的厚度一般为（）A.1-2μmB.2-3μmC.4-5μmD.6-8μmE.10-15μm3.HE染色中，用于分化细胞核染色的常用试剂是（）A.0.5%氨水B.1%盐酸乙醇C.伊红染液D.二甲苯E.梯度乙醇4.免疫组织化学技术中，抗原修复的主要目的是（）A.提高组织的通透性B.使抗原决定簇充分暴露C.增强抗体的特异性D.减少非特异性染色E.延长染色时间5.冰冻切片常用的温度设置一般为（）A.-4℃~0℃B.-10℃~-5℃C.-20℃~-15℃D.-80℃~-70℃E.4℃6.下列哪种特殊染色可用于显示胶原纤维（）A.抗酸染色B.PAS染色C.Masson三色染色D.苏丹III染色E.普鲁士蓝染色7.病理科常规石蜡切片脱水过程中，常用的脱水剂是（）A.二甲苯B.乙醇C.丙酮D.福尔马林E.石蜡8.细胞学涂片最常用的固定液是（）A.10%中性福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.戊二醛E.苦味酸9.分子病理检测中，PCR实验室的分区不包括（）A.试剂准备区B.标本制备区C.扩增区D.产物分析区E.取材区10.下列哪项不属于免疫组化的对照类型（）A.阳性对照B.阴性对照C.空白对照D.自身对照E.剂量对照11.常规HE染色中，细胞质被染成（）A.蓝色B.红色C.黄色D.绿色E.紫色12.石蜡包埋时，组织块的正确放置方式是（）A.组织面朝上B.组织面朝下C.随意放置D.组织侧立E.以上都不对13.PAS染色主要用于检测组织中的（）A.脂肪B.核酸C.糖原及黏多糖D.蛋白质E.色素14.下列哪种标本适合做冰冻切片检查（）A.常规手术标本B.手术中快速病理诊断标本C.穿刺活检标本D.细胞学标本E.尸检标本15.病理检验中，室内质量控制的缩写是（）A.EQAB.IQCC.PCRD.FISHE.IHC16.抗酸染色阳性的细菌是（）A.大肠杆菌B.金黄色葡萄球菌C.结核分枝杆菌D.肺炎链球菌E.绿脓杆菌17.自动免疫组化染色机的优点不包括（）A.染色结果稳定B.操作标准化C.减少人为误差D.无需设置对照E.提高工作效率18.石蜡切片脱蜡常用的试剂是（）A.乙醇B.二甲苯C.丙酮D.福尔马林E.蒸馏水19.下列哪项是细胞学检查的禁忌症（）A.胸水脱落细胞检查B.痰细胞学检查C.宫颈刮片检查D.凝血功能障碍患者的深部穿刺细胞学E.尿液脱落细胞检查20.免疫组化中常用的显色剂DAB显色的阳性结果颜色是（）A.红色B.蓝色C.棕黄色D.绿色E.紫色21.常规病理石蜡切片的烤片温度一般为（）A.37℃B.45℃C.60-65℃D.80℃E.100℃22.肾穿刺活检的石蜡切片厚度通常为（）A.1-2μmB.2-3μmC.4-5μmD.6-8μmE.10μm23.下列哪种固定液最适合电镜标本的制备（）A.10%中性福尔马林B.95%乙醇C.2.5%戊二醛D.丙酮E.Bouin液24.病理档案中，住院患者的病理资料保存期限至少为（）A.5年B.10年C.15年D.30年E.永久25.下列哪项不是石蜡切片制备过程中的步骤（）A.固定B.脱水C.透明D.浸蜡E.原位杂交26.免疫荧光技术常用的激发光波长是（）A.紫外光B.红外光C.可见光D.X射线E.微波27.下列哪种染色方法用于显示脂肪组织（）A.HE染色B.苏丹III染色C.Masson三色染色D.抗酸染色E.PAS染色28.痰细胞学检查至少需要送检几次标本以提高阳性率（）A.1次B.2次C.3-4次D.5-6次E.10次29.分子病理检测中，RNA标本的长期保存温度是（）A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室温E.37℃30.下列哪项人员可以签发病理诊断报告（）A.病理技士B.病理技师C.主管技师D.执业病理医师E.病理科护士【单选题参考答案】1.B2.C3.B4.B5.C6.C7.B8.B9.E10.E11.B12.B13.C14.B15.B16.C17.D18.B19.D20.C21.C22.B23.C24.D25.E26.A27.B28.C29.C30.D二、多选题（共15题）1.病理检验中常用的固定液包括（）A.10%中性福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.戊二醛E.生理盐水2.HE染色过程中，常见的问题包括（）A.细胞核染色过深B.细胞核染色过浅C.细胞质染色不均D.脱蜡不彻底E.切片出现气泡3.免疫组织化学技术中，常用的抗原修复方法有（）A.高压热修复B.水浴热修复C.微波热修复D.胰蛋白酶消化修复E.胃蛋白酶消化修复4.细胞学涂片的常用制备方法有（）A.推片法B.涂抹法C.拉片法D.离心涂片机法E.石蜡切片法5.下列属于特殊染色临床应用的是（）A.显示结缔组织疾病的胶原纤维B.检测结核分枝杆菌感染C.显示组织中的脂肪沉积D.检测糖原累积症的糖原含量E.显示含铁血黄素沉积6.冰冻切片的适应症包括（）A.手术中快速病理诊断B.脂肪组织的脂肪染色C.免疫荧光检查D.抗原活性易丢失的免疫组化检测E.常规手术标本的病理诊断7.分子病理检测的标本类型包括（）A.新鲜组织B.石蜡包埋组织C.外周血D.胸水E.痰液8.病理检验室内质量控制的内容包括（）A.标本前处理质控B.试剂质量控制C.仪器设备校准D.操作过程规范化E.室内对照设置9.自动染色机的优点有（）A.染色结果一致性好B.减少人为操作误差C.提高工作效率D.降低试剂交叉污染E.无需质量控制10.下列属于免疫组化标记物的临床意义的是（）A.判断肿瘤的组织来源B.评估肿瘤的预后C.指导肿瘤的靶向治疗D.检测肿瘤的增殖活性E.诊断感染性疾病11.石蜡切片制备过程中，脱水的注意事项包括（）A.梯度乙醇从低浓度到高浓度B.脱水时间要充足C.避免脱水过度D.乙醇要定期更换E.脱水温度越高越好12.原位杂交技术的类型包括（）A.DNA原位杂交B.RNA原位杂交C.荧光原位杂交D.显色原位杂交E.免疫组化杂交13.下列关于PAS染色的描述，正确的是（）A.糖原呈紫红色B.黏蛋白呈阳性C.需做唾液消化对照D.可用于诊断真菌感染E.脂肪组织呈强阳性14.病理标本取材的注意事项包括（）A.避免挤压组织B.标本要及时固定C.小标本要全部包埋D.肿瘤组织要取到肿瘤与正常组织交界处E.坏死组织要尽量多取15.下列关于尸检的描述，正确的是（）A.尸检可以明确死亡原因B.尸检可以验证临床诊断的准确性C.尸检标本不需要固定D.尸检有助于医学科研和教学E.尸检需征得家属同意【多选题参考答案】1.ABCD2.ABCDE3.ABCDE4.ABCD5.ABCDE6.ABCD7.ABCDE8.ABCDE9.ABCD10.ABCDE11.ABCD12.ABCD13.ABCD14.ABCD15.ABDE三、判断题（共10题）1.苏木精是酸性染料，可将细胞核中的核酸染成蓝色。（）2.冰冻切片的抗原保存效果优于石蜡切片，更适合用于免疫组织化学检测。（）3.痰细胞学检查找到癌细胞即可确诊原发性肺癌。（）4.病理科产生的废弃组织、切片等医疗废物需按照病理性废物专门处理，不得与普通医疗废物混合。（）5.Masson三色染色中，肌纤维呈蓝色，胶原纤维呈红色。（）6.免疫组化显色剂DAB显色液需现配现用，避免长时间放置导致氧化失效。（）7.石蜡切片脱蜡只需用二甲苯浸泡1次即可彻底脱净石蜡。（）8.细胞学涂片固定的主要目的是保持细胞的形态结构，防止细胞自溶和腐败。（）9.分子病理检测的RNA标本可长期放置在4℃冰箱中保存。（）10.病理检验技师具备丰富的操作经验，可以独立签发病理诊断报告。（）【判断题参考答案】1.×解析：苏木精是碱性染料，可与细胞核内带负电荷的酸性核酸结合，使细胞核呈蓝色。2.√解析：甲醛固定会导致石蜡切片中的抗原发生交联，冰冻切片未经甲醛长时间固定，抗原结构保存更完整，更适合免疫组化检测。3.×解析：痰细胞学找到癌细胞仅能提示存在恶性肿瘤细胞，无法明确肿瘤原发部位，需结合影像学、组织学检查排除转移癌后才可确诊原发性肺癌。4.√解析：废弃组织、切片等属于病理性医疗废物，需按照专门流程单独收集、处置，不得与普通医疗废物混合。5.×解析：Masson三色染色的典型结果为胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色，红细胞呈黄色。6.√解析：DAB显色液易被氧化失效，需现配现用，避免长时间放置导致显色能力下降、背景加深。7.×解析：石蜡切片常规需经2次二甲苯浸泡（每次5-10分钟）才能彻底脱除石蜡，单次浸泡易导致石蜡残留，影响染色质量。8.√解析：固定可使细胞内蛋白质、核酸等成分凝固，维持细胞形态结构，防止细胞自溶、腐败。9.×解析：RNA极易被核酸酶降解，4℃仅可短期保存（数小时至数天），长期保存需置于-80℃冰箱或液氮环境中。10.×解析：病理诊断报告必须由取得执业医师资格、注册为病理专业的医师签发，技术人员仅负责实验操作，无诊断报告签发权限。四、简答题（共5题）1.简述HE染色的基本原理及常规操作步骤。【参考答案】（1）基本原理：HE染色即苏木精-伊红染色，是病理组织学最常用的常规染色方法。①苏木精为碱性染料，可与细胞核内带负电荷的脱氧核糖核酸（DNA）、核糖核酸（RNA）等酸性物质结合，使细胞核被染成蓝紫色；②伊红为酸性染料，可与细胞质、细胞外基质中带正电荷的碱性蛋白质结合，使细胞质及细胞外间质被染成不同程度的红色或粉红色。通过两种染料的对比染色，可清晰显示组织细胞的形态结构及病理改变。（2）常规操作步骤：①脱蜡：将烤片后的石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ（5-10min）、二甲苯Ⅱ（5-10min）中彻底脱蜡；②梯度乙醇水化：依次放入100%乙醇Ⅰ（2-3min）、100%乙醇Ⅱ（2-3min）、95%乙醇（2min）、80%乙醇（1min）、70%乙醇（1min），最后用蒸馏水冲洗1-2min；③苏木精染色：将切片放入苏木精染液中染色3-10min（根据染液新旧及温度调整），自来水冲洗去多余染液；④分化：放入1%盐酸乙醇中分化数秒至数十秒，至细胞核染色清晰、细胞质基本脱色为止，自来水冲洗；⑤返蓝：放入0.5%氨水或弱碱性自来水中返蓝1-3min，至细胞核呈蓝色，自来水冲洗；⑥伊红染色：放入伊红染液中染色1-3min，自来水冲洗去多余染液；⑦脱水透明：依次放入70%乙醇（30s）、80%乙醇（30s）、95%乙醇（1-2min）、100%乙醇Ⅰ（2-3min）、100%乙醇Ⅱ（2-3min）脱水，再放入二甲苯Ⅰ（2-3min）、二甲苯Ⅱ（2-3min）透明；⑧封片：用中性树胶加盖玻片封固，晾干后镜检。2.简述免疫组织化学技术的基本原理及常用抗原修复方法。【参考答案】（1）基本原理：免疫组织化学技术（IHC）是利用抗原与抗体特异性结合的免疫学原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色剂（如酶、荧光素、胶体金等）显色，从而对组织细胞内的抗原进行定位、定性及定量检测的技术。该技术将形态学观察与免疫反应、生物化学显色结合，可在原位显示目标蛋白的表达情况，为病理诊断、肿瘤分型及预后判断提供依据。（2）常用抗原修复方法：抗原修复是指通过物理或化学方法解除甲醛固定导致的抗原决定簇交联，恢复抗原的免疫原性，是免疫组化实验的关键步骤，常用方法包括：①热诱导抗原修复：是目前最常用的修复方法，通过高温使交联的蛋白质肽键断裂，暴露抗原决定簇，具体包括高压蒸汽修复（121℃、101kPa，修复10-15min）、恒温水浴修复（95-98℃，修复20-30min）、微波修复（中高火，修复10-15min），常用的修复液有柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）、EDTA缓冲液（pH8.0/9.0）；②酶消化修复：通过蛋白酶的消化作用去除抗原周围的蛋白质交联，暴露抗原决定簇，常用酶包括胰蛋白酶（37℃，消化5-30min）、胃蛋白酶（37℃，消化5-30min），适用于部分细胞内抗原、细胞间质抗原的修复；③联合修复：对于部分难修复的抗原，可采用热修复联合酶消化的方法，提高修复效果。3.简述病理标本固定的目的及临床常用固定液的适用范围。【参考答案】（1）固定的目的：①保持细胞形态结构：使细胞内的蛋白质、核酸、脂质等成分迅速凝固，防止细胞自溶、腐败，维持组织细胞的原有形态及结构，避免组织发生变性、坏死、溶解等改变；②保持抗原及核酸活性：适当的固定可保留组织细胞内的抗原、核酸等生物大分子的结构完整性，为后续免疫组化、分子病理检测提供基础；③增加组织硬度：固定后的组织蛋白质凝固，质地变硬，便于后续的取材、脱水、包埋及切片操作；④利于染色：固定可改变组织细胞的通透性，使染料更容易进入细胞内，提高染色效果。（2）常用固定液及适用范围：①10%中性福尔马林（4%中性多聚甲醛）：是病理常规检验最常用的固定液，适用于绝大多数手术切除标本、穿刺活检标本的固定，可较好保存组织形态结构，适合HE染色、免疫组化、原位杂交、分子病理等多数检测；②95%乙醇：适用于细胞学涂片的固定（固定15-30min），也可用于糖原染色标本的固定（可较好保存糖原），但对组织穿透力较弱，易导致组织收缩变脆，不适合大标本固定；③丙酮：穿透速度快，对抗原保存效果好，适用于冰冻切片、免疫荧光标本的固定，也可用于淋巴细胞表面抗原检测的标本固定；④2.5%戊二醛：对细胞超微结构保存效果好，适用于透射电镜标本的固定，固定时间需2-4h甚至更长；⑤Bouin液：对脂肪组织、胃肠黏膜组织固定效果好，可减少组织收缩，染色后色彩鲜艳，适用于胃肠道活检、脂肪组织标本的固定，因含苦味酸，固定后需用乙醇冲洗去除黄色。4.简述常规石蜡切片制备的基本流程及核心操作要点。【参考答案】常规石蜡切片制备是病理检验的基础技术，流程包括标本前处理至切片制备完成的全过程，基本流程及要点如下：（1）标本接收与核对：病理科接收标本时需核对患者信息、标本类型、数量，确认申请单信息与标本一致，避免差错。（2）固定：标本离体后需尽快放入10倍体积以上的10%中性福尔马林中固定，大标本需切开固定以保证固定液充分渗透，常规固定时间为6-72h，避免固定不足或过度。（3）取材：按照规范对标本进行切开、观察，选取有代表性的病变组织（包括肿瘤实质、肿瘤与正常组织交界处、坏死组织边缘等），组织块大小一般为1.5cm×1.5cm×0.2-0.3cm，小标本需全部包埋，避免挤压组织，取材后及时放入脱水盒。（4）脱水：利用梯度乙醇逐步置换组织内的水分，从低浓度乙醇到高浓度乙醇（70%→80%→95%→100%），脱水时间根据组织大小调整，避免脱水不足或过度导致组织脆裂。（5）透明：用二甲苯等透明剂置换组织内的乙醇，使组织变得透明，便于石蜡渗透，透明时间以组织透亮为宜，避免透明过度导致组织变硬变脆。（6）浸蜡：将透明后的组织放入熔化的石蜡中浸泡，使石蜡充分渗入组织内，置换出透明剂，浸蜡温度一般为60-62℃，浸蜡时间根据组织类型调整，共3次浸蜡。（7）包埋：将浸蜡后的组织块放入包埋框中，加入熔化的石蜡，将组织的目标切面（组织面）朝下放平，冷却凝固后形成石蜡块，包埋时需注意组织方向，避免组织面倾斜。（8）切片：将石蜡块固定在切片机上，调整切片厚度（常规4-5μm，特殊标本如肾穿刺为2-3μm），连续切片后选取完整、无褶皱的组织片，捞片于载玻片上（常用防脱载玻片）。（9）烤片：将捞好的切片放在烤片机上，60-65℃烤片30-60min，使组织与载玻片粘附牢固，防止后续染色过程中脱片。5.简述病理检验室内质量控制的核心内容及实施意义。【参考答案】（1）核心内容：病理检验室内质量控制（IQC）是指病理实验室内部为保证检验结果的准确性和可靠性，对检验全过程进行的质量控制措施，核心内容包括：①标本前处理质控：包括标本固定的及时性、固定液浓度及体积、取材的规范性、标本标识的准确性等，是质量控制的前提；②试剂与耗材质控：所有试剂（染液、抗体、分子检测试剂等）需验证合格后使用，定期更换，标注配制日期、有效期，抗体需进行预实验验证特异性；③仪器设备质控：切片机、染色机、免疫组化仪、PCR仪、显微镜等设备需定期校准、维护，记录运行状态，保证设备性能稳定；④操作过程质控：严格按照标准操作规程（SOP）进行操作，对脱水、染色、免疫组化、分子检测等关键步骤进行监控，避免人为误差；⑤染色与切片质量质控：定期对HE切片、特殊染色切片、免疫组化切片的质量进行评估，要求切片完整、厚度均匀、染色清晰、对比鲜明、无褶皱无气泡；⑥对照设置：免疫组化、特殊染色、分子病理检测需设置阳性对照、阴性对照、空白对照等，验证实验结果的可靠性；⑦人员培训：定期对技术人员进行操作技能、质量控制知识培训，考核合格后方可上岗；⑧差错防控：建立差错登记、分析及整改制度，对出现的质量问题及时分析原因，制定整改措施，避免类似问题再次发生。（2）实施意义：室内质量控制是保证病理检验结果准确可靠的基础，可有效降低检验误差，提高病理诊断的准确性，避免误诊、漏诊，同时为室间质评提供基础，保障实验室的检测能力符合规范要求。五、案例分析题（共2题）1.病例资料：患者男性，62岁，因“反复咳嗽、咳痰伴痰中带血3个月”入院，胸部CT提示右肺上叶可见一3cm×2.5cm的占位性病变，边缘呈毛刺状，临床考虑肺癌可能性大，行支气管镜下活检，取出灰白色碎组织3块，总大小约0.3cm×0.2cm×0.1cm，送病理科行常规石蜡病理检查。请回答：（1）该标本在取材、包埋过程中需注意哪些事项？（2）若HE染色后镜下观察发现细胞核染色模糊、细胞质染色不均，部分区域出现空白区，可能的原因有哪些？应如何处理？【参考答案】（1）取材及包埋注意事项：①标本核对：接收标本时仔细核对患者姓名、住院号、标本类型及数量，确认标本与申请单一致；②标本观察：仔细检查所有送检的碎组织，避免遗漏病变组织，该标本为小活检标本，需全部取材，不得丢弃；③避免挤压：取材时用镊子轻柔夹持组织边缘，避免夹持组织面导致细胞挤压变形，影响诊断；④包埋方向：包埋时需将所有组织块的最大切面朝下放置，保证切片时能切到组织的最大面积，对于碎组织需集中摆放，避免分散；⑤防脱片处理：捞片需使用经APES或多聚赖氨酸处理的防脱载玻片，烤片时间可适当延长（60℃烤1-2h），防止后续染色过程中组织脱落；⑥标识清晰：脱水盒、蜡块、切片上的编号需清晰准确，避免标识错误。（2）可能的原因及处理方法：①固定不当：标本离体后未及时固定，或固定液浓度不足、固定时间过短，导致组织细胞自溶，出现细胞核模糊、结构不清。处理方法：若标本尚未包埋，需重新用足量10%中性福尔马林固定6-12h后再进行后续操作；若已制成切片，无法通过染色补救，需重新取材制片。②脱蜡不彻底：二甲苯使用时间过长、浓度降低，或脱蜡时间不足，导致石蜡残留，染色时染料无法与组织结合，出现染色不均、空白区。处理方法：将切片重新放入新鲜二甲苯中脱蜡5-10min，再依次经梯度乙醇水化后重新染色。③脱水不充分：组织脱水时乙醇浓度不足或脱水时间不够，组织内残留水分，导致透明剂无法渗透，后续浸蜡不充分，切片时组织破碎，染色不均。处理方法：若为蜡块问题，需将蜡块熔化后重新脱水、透明、浸蜡、包埋，再切片染色；若仅为切片染色问题，可重新充分脱水透明后染色。④染液失效：苏木精或伊红染液使用时间过长，有效成分氧化分解，导致染色能力下降。处理方法：更换新鲜配制的染液，重新进行染色操作，染液需定期过滤、更换，保证染色效果。⑤切片质量差：切片厚度不均、有褶皱，或捞片时组织折叠，导致染色不均。处理方法：重新调整切片机参数，切取厚度均匀、完整平整的组织片，重新捞片、烤片后染色。2.病例资料：患者女性，52岁，因“发现右侧乳腺无痛性肿块2周”入院，乳腺超声提示右侧乳腺外上象限可见一2.8cm×2.2cm低回声结节，边界不清，形态不规则，BI-RADS5类，行乳腺肿块粗针穿刺活检，HE染色病理初步提示为乳腺浸润性导管癌，为明确诊断、评估预后及指导治疗，需进一步行免疫组化及分子病理检测。请回答：（1）该患者需常规检测的免疫组化核心指标有哪些？分别简述其临床意义。（2）若该患者HER2免疫组化结果为2+（可疑阳性），需进一步行何种检测明确HER2基因状态？简述该检测的基本原理及操作注意事项。【参考答案】（1）乳腺浸润性癌常规检测的核心免疫组化指标及临床意义：①雌激素受体（ER）：属于核转录因子，阳性表达提示肿瘤细胞的生长依赖雌激素，内分泌治疗有效，阳性表达率越高，内分泌治疗效果越好，预后相对越好。②孕激素受体（PR）：同样属于核受体，常与ER共同检测，PR阳性提示肿瘤