结核分枝杆菌 RNA检测技术应用于活动性结核病诊断和疗效评估的专家共识

结核分枝杆菌RNA检测技术应用于活动性结核病诊断和疗效评估的专家共识【摘要】结核病仍是全球重大公共卫生威胁，及时、准确的结核分枝杆菌病原学检测对结核病防控至关重要。传统的病原学检测方法主要包括涂片抗酸染色镜检、分枝杆菌培养和分子生物学技术等，虽在临床中广泛应用，但均存在不同程度的局限性。近年来，在结核分枝杆菌分子生物学检测技术中，结核分枝杆菌核糖核酸（ribonucleicacid，RNA）检测技术在活动性结核病的诊断与疗效评估中展现出良好应用前景。随着技术不断完善与检测成本逐步下降，该技术有望在临床中得到更广泛的推广。为进一步规范结核分枝杆菌RNA检测技术在活动性结核病诊断与疗效评估中的临床应用，明确其适用场景及结果判读标准，特组织相关领域专家制定本共识，以期凝聚行业力量、优化技术应用、充分发挥技术价值，为结核病精准防治提供科学支撑。【关键词】分枝杆菌，结核；核糖核酸；核酸扩增技术；诊断；疗效评估；总结性报告（主题）结核病是由结核分枝杆菌复合群（Mycobacteriumtuberculosiscomplex，MTBC）感染所致的慢性感染性疾病，目前仍是全球重要的公共卫生问题。结核病防控中，及时、准确的病原学诊断与疗效评估至关重要。当前临床常用检测手段主要包括涂片抗酸染色镜检、分枝杆菌培养、分子生物学技术及影像学检查，但均存在局限性：（1）涂片镜检敏感度低，且无法对阳性菌株进行种属鉴定[1-2]；（2）分枝杆菌培养耗时较长、易受污染，难以满足快速诊断需求[1-2]；（3）以GeneXpert系统为代表的DNA分子检测不能鉴别结核分枝杆菌的活力状态，且检测成本较高[3-4]；（4）影像学检查主观性较强，缺乏病原学依据[5-6]。传统疗效评估同样依赖涂片镜检与分枝杆菌培养，存在敏感度不足、周期长、易污染等固有缺陷。为此，国内外研究者积极探索新型生物标志物与影像组学等替代方法，但生物标志物仍面临特异性不足、技术受限、个体差异大、成本偏高等问题[7]。同时，人工智能辅助影像组学则受图像标准化问题、模型稳定性与可及性以及医学伦理问题等限制，难以规模化应用[8]。这些现有检测技术在时效性、敏感度与客观性上仍存在短板，无法完全满足临床精准诊断与疗效评估的需求。病原菌核糖核酸（ribonucleicacid，RNA）是反映微生物生命活动的关键标志物，仅存在于有活力的菌体中，其半衰期短、代谢活跃，菌体死亡后可快速降解，因此能真实反映结核分枝杆菌的存活与增殖状态[9-12]。相较于传统检测方法，结核分枝杆菌RNA检测具备多重突出优势：（1）特异性强：基于特异性RNA序列设计引物与探针，特异性识别结核分枝杆菌；（2）敏感度高：能够检出低浓度RNA；（3）检测快速：通常24h内可出结果，显著缩短诊断周期；（4）细菌活性指示：仅对存活状态细菌RNA进行扩增，可精准反映体内活菌负荷与治疗应答；（5）定量可行：支持RNA定量检测，为病情评估与疗效评估提供客观依据[13-16]。因此，结核分枝杆菌RNA检测作为一种分子生物学检测技术，为活动性结核病的早期诊断与动态疗效评估提供了重要依据。结核分枝杆菌RNA检测技术已从过去的反转录PCR（reversetranscriptionPCR，RT-PCR）、核酸序列扩增法（nucleicacidsequence-basedamplification，NASBA）及转录介导扩增（transcription-mediatedamplification，TMA），发展至现在的结核分枝杆菌分子细菌载量检测（tuberculosismolecularbacterialloadassay，TB-MBLA）及基于分子信标的实时荧光核酸恒温扩增检测（simultaneousamplificationandtesting，SAT）。这些技术通过检测结核分枝杆菌特异性RNA（如16SrRNA、mRNA等）直接反映细菌存活状态，可为活动性结核病诊断、治疗监测及预后评估提供更精准的依据[16-17]。随着技术持续优化与检测成本逐步下降，结核分枝杆菌RNA检测的临床应用前景也更加广阔。共识形成办法本共识围绕结核分枝杆菌RNA检测技术在活动性结核病诊断和疗效评估中的关键临床问题，由中华医学会结核病学分会组织临床结核病、结核检验等相关领域专家共同制定。共识专家组结合结核病临床诊疗需求与结核分枝杆菌RNA检测技术应用现状，针对该技术改善活动性结核病病原学诊断时效性与准确性、动态监测抗结核治疗过程中活菌负荷及评估治疗应答的作用，就适用人群、检测时机、结果判读及临床应用流程等关键议题展开讨论，系统梳理评价相关循证医学证据、临床研究资料与实践经验。在充分考量结核分枝杆菌RNA检测技术的诊断效能、临床获益与潜在局限、证据质量以及技术可及性等因素的基础上，经15家单位组成的专家组多轮讨论、修改和意见征集，最终形成7条核心推荐意见。共识的制定工作于2025年9月正式启动，历时11个月于2026年8月最终定稿。本共识已在国际实践指南注册与透明化平台注册，注册号为PREPARE2026CN720。本共识采用牛津循证医学中心（OxfordCentreforEvidence-BasedMedicine，OCEBM）证据分级与推荐强度分级体系，对相关循证医学证据进行评价并形成推荐意见。证据级别分为1a、1b、1c、2a、2b、2c、3a、3b、4和5级，并根据证据级别及其一致性将推荐强度分为A、B、C和D4个等级，其中A级推荐主要基于1级证据，B级推荐主要基于2级证据，C级推荐主要基于3～4级证据，D级推荐主要基于5级证据或专家意见（表1）。在完成文献检索、证据评价及证据分级后，根据各临床实践问题及相应证据形成推荐意见初稿。推荐强度依据OCEBM证据分级体系，并综合考虑证据的一致性、获益与风险、技术可行性、可及性及临床适用性等因素确定。推荐意见经专家组多轮讨论和修订后进行匿名投票，依据专家同意比例判定是否达成共识；未达到预设共识标准的推荐意见，经再次讨论和修改后进行下一轮表决，直至达成共识或决定不形成推荐意见。本共识旨在凝聚行业共识、规范技术应用以及充分释放技术价值，为结核病精准防治提供科学支撑。临床适用范围结核分枝杆菌RNA检测可为活动性结核病诊断、全程治疗监测及疗程结束时的治疗评估提供精准的病原学依据，是覆盖结核病诊断、治疗监测与治愈判定全诊疗链条的病原学检测技术。一、活动性结核病诊断推荐意见1：对于高度疑似活动性结核病患者，尤其是涂片抗酸染色阴性，但临床高度怀疑者，推荐将结核分枝杆菌RNA检测作为病原学诊断的重要方法。在临床条件允许的情况下，建议优先采用支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF）进行检测，以提高早期诊断率。（推荐强度B，证据级别2b）结核分枝杆菌RNA检测因具有可检测细菌存活状态的特性，在结核病早期快速诊断中具有独特价值，尤其适用于传统方法难以确诊的病例。两项前瞻性、大样本、合计纳入5944例疑似肺结核患者的研究表明，以临床综合诊断为参考标准，结核分枝杆菌RNA检测诊断肺结核的总体敏感度为57.4%~75.8%，明显高于痰涂片镜检的敏感度（23.8%~36.2%）；结核分枝杆菌RNA检测的特异度高达99.0%~100.0%[18-19]。与痰分枝杆菌培养的敏感度（89.0%）相比，结核分枝杆菌RNA检测的敏感度略低，但其检测中位时间远快于痰分枝杆菌培养，且特异性与痰分枝杆菌培养特异性无显著差异[12-13,18]。此外，一项纳入210例疑似肺结核患者的纵向前瞻性研究显示，靶向16SrRNA的TB-MBLA技术展现出高诊断性能，以痰培养为金标准，其敏感度可达99%，明显优于痰涂片镜检的敏感度（75%）；其特异度为91%，明显优于GeneXpertMTB/RIFUltra（简称“XpertUltra”）[20]。对于涂片镜检阴性但临床高度怀疑肺结核的患者，结核分枝杆菌RNA检测可提高诊断阳性率，结核分枝杆菌RNA检测联合分枝杆菌培养或Xpert-Ultra可进一步提升诊断效能[13,21]。以临床综合诊断为参考标准，不同标本类型的结核分枝杆菌RNA检测敏感度存在明显差异：痰标本为49.6%~75.8%，BALF标本可达63.9%~90.0%[13,18-19]；胸腔积液的敏感度较低（约32.3%），且阴性预测值低[22]，胸腔积液标本不推荐作为结核分枝杆菌RNA检测首选标本。因此，疑似活动性结核病患者在临床条件允许时，优先选择BALF标本进行结核分枝杆菌RNA检测，以获得更高的诊断敏感度；对于涂片镜检阴性、少痰患者，结核分枝杆菌RNA检测可作为快速辅助诊断手段，并与传统方法联合使用以最大化诊断效能。二、疗效监测推荐意见2：推荐将结核分枝杆菌RNA检测用于全疗程抗结核治疗疗效的动态连续监测以反映存活状态细菌负荷变化，指导疗效评估与临床决策调整。（推荐强度B，证据级别2b）有效的抗结核治疗可迅速抑制细菌代谢与繁殖[23]。治疗开始后2～4周内，结核分枝杆菌RNA水平会出现明显下降，其下降速度与幅度可作为早期杀菌活性的直观指标。结核分枝杆菌RNA检测能够反映存活状态结核分枝杆菌的下降水平，有助于依据检测结果及时复核抗结核药物敏感结果并评估治疗方案[17]。标准短程化疗2个月强化期结束时，痰分枝杆菌培养是否阴转是评价疗效的关键节点[24-26]。3项共纳入765例患者的前瞻性研究显示，Xpert-Ultra与涂片镜检均不适用于结核病治疗疗效监测，传统分枝杆菌培养方法检测周期过长，难以满足临床动态评估需求，而结核分枝杆菌RNA检测弥补了上述技术短板[20,27-28]。其中一项研究表明，治疗2个月后，74.3%的患者Xpert-Ultra阳性，17.7%的患者TB-MBLA阳性，10.6%的患者分枝杆菌生长指示管（mycobacteriagrowthindicatortube,MGIT）培养阳性，Xpert-Ultra检测阳性率下降速度明显缓慢；治疗6个月时，32.6%的患者仍为Xpert-Ultra阳性，而TB-MBLA与痰MGIT培养均转为阴性，两者结果一致[20]。另两项研究也说明，TB-MBLA在结核治疗评价中效能与痰分枝杆菌培养相当[17,29]。将结核分枝杆菌RNA检测用于贯穿抗结核全疗程，动态追踪细菌负荷变化，为全程疗效把控与临床决策调整提供可靠依据。三、特殊人群的适用推荐意见3：对于儿童、孕妇及人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus,HIV）感染者等特殊人群或疑似并发肺外结核的活动性结核病诊断和随访，建议采用结核分枝杆菌RNA检测技术作为重要的病原学检测方法。（推荐强度B，证据级别2b）儿童、孕妇及HIV感染者等特殊人群的活动性结核病诊断与随访困难，主要源于两个方面：（1）病情不典型：儿童细菌载量低、症状隐匿且易并发肺外结核，孕妇症状与妊娠反应易混淆，HIV感染者因免疫功能严重缺陷导致病灶不典型；（2）检测手段受限：儿童痰标本难获取，免疫学检测在HIV感染者中假阴性率高，孕妇因辐射常无法进行影像学检查。结核分枝杆菌RNA检测可在一定程度上提高特殊人群的结核病诊断率。一项观察性诊断研究纳入51例2~15岁儿童，通过改良N95口罩采集呼出气中的生物气溶胶，采用佩戴面罩采样联合逆转录酶聚合酶链式反应（SamplingwithMaskandReverseTranscriptasePCR，SMaRT-PCR）方法检测16SrRNA/rpoB，结果显示敏感度为96%，优于分枝杆菌培养法（71%）[30]。在HIV感染并发结核病患者中，一项纵向前瞻性研究纳入47例患者，采集63份尿液标本，分别采用尿液脂阿拉伯甘露聚糖（lipoarabinomannan，LAM）、TB-MBLA及尿液分枝杆菌培养进行检测，结果显示治疗前尿液LAM与TB-MBLA阳性率均为33.3%，随着治疗时间延长TB-MBLA阳性率呈现逐渐下降，而尿液分枝杆菌培养全程阴性[31]。此外，一项纳入100例结核病患者的横断面观察性研究表明，TBMBLA粪便检测敏感度为80%，特异度为79%，略低于Xpert-Ultra，但可避免DNA检测因死菌残留导致的假阳性及分枝杆菌培养法的高污染率缺陷[32]。因此，基于上述证据，推荐在儿童、孕妇及HIV感染者等特殊人群的活动性结核病诊断与随访中应用结核分枝杆菌RNA检测方法，尤其是非痰标本检测。肺外结核约占结核病患者的15%~20%，常见于淋巴结、胸膜、骨关节及中枢神经系统等部位[33]。传统诊断方法对肺外结核的诊断敏感度较低，且标本获取常具有侵入性。一项纳入482例结核病患者的横断面观察性研究显示，以分枝杆菌培养法为金标准，基于肺外脓液、手术切除组织的结核分枝杆菌RNA检测诊断肺外结核的敏感度和特异度分别为83.6%和79.4%；以临床综合诊断为参考标准，其敏感度和特异度则分别为41.6%和100.0%[34]。此外，SAT技术在不同类型肺外结核标本中结核分枝杆菌的检出率存在差异。一项纳入297例患者的横断面观察性研究对脓液、尿液、心包积液、脑脊液等标本进行结核分枝杆菌RNA检测，结果显示脓液（86%）和尿液（80%）的结核分枝杆菌检出率更高，提示SAT在肺外结核患者的这些标本诊断中具有优势[35]。此外，在淋巴结结核与骨结核中，结核分枝杆菌RNA检测敏感度也显著高于分枝杆菌培养法[36-37]。因此，对于疑似并发肺外结核的活动性结核病，可以考虑采用结核分枝杆菌RNA检测作为诊断依据，以提高肺外结核的诊断效率。结果解读与临床决策推荐意见4：结核分枝杆菌RNA检测结果与涂片镜检、分枝杆菌培养、结核分枝杆菌DNA检测等检测结果不一致时，建议结合患者临床表现、影像学特征及治疗史进行综合判读，以指导临床决策。（推荐强度D，证据级别5）不同检测方法的结果差异具有明确的临床提示意义。1.结核分枝杆菌RNA检测阳性，但涂片镜检阴性：常见于早期感染、低菌量状态以及涂片阴性的结核病患者。结核分枝杆菌RNA检测显示阳性时，无论涂片镜检结果如何，建议及时启动抗结核治疗，无需等待6～8周的分枝杆菌培养结果[12-13,18,38]。2.结核分枝杆菌RNA检测阴性，但涂片镜检阳性：可能提示死亡状态结核分枝杆菌残留[20]或非结核分枝杆菌（nontuberculousmycobacteria，NTM）感染[18-19,38]，建议进行NTM相关检测。3.结核分枝杆菌RNA检测阳性，但分枝杆菌培养阴性：可能因为结核分枝杆菌RNA检测在临床样本中有较高的敏感度[13]，需结合患者临床表现、影像学特征及治疗史综合评估以决定是否治疗[34]。4.结核分枝杆菌RNA检测阴性，但分枝杆菌培养阳性：样品中的杂质影响扩增反应或样品中细菌较少，临床应优先采纳分枝杆菌培养阳性的结果，同时建议复核结核分枝杆菌RNA检测标本与流程[34]。5.结核分枝杆菌RNA检测阳性，但结核分枝杆菌DNA检测阴性：结核分枝杆菌RNA检测敏感度更高，当出现DNA信号强度不足而RNA表达活跃的不一致现象时，应警惕患者处于感染早期或治疗失败[35]。6.结核分枝杆菌RNA检测阴性，但结核分枝杆菌DNA检测阳性：提示结核分枝杆菌DNA的残留持久性与RNA的快速降解之间的差异，尤其是在曾接受过治疗的患者中，不应将其直接等同于活动性结核病感染，建议定期进行随访[20]。因此，面对检测结果不一致时，需依据方法学特性审慎解读，避免因单一结果误导诊疗。推荐意见5：结核分枝杆菌RNA检测阴性但高度怀疑结核病的患者，建议通过优化采样进行重复检测，或联合其他分子生物学方法进一步明确诊断。（推荐强度B，证据级别2b）结核分枝杆菌RNA检测虽然敏感度高，但因既往治疗史、标本制备效率、提取方法、酶促扩增抑制剂等因素，可能出现假阴性结果[28,35]。结核分枝杆菌RNA检测可减少环境交叉污染的风险，但同时也对标本的采集、运输与保存条件提出了更高要求，标本处理不当易导致结核分枝杆菌RNA降解和检测失败。因此，对于结核分枝杆菌RNA检测阴性但高度怀疑结核病的患者，建议采取以下策略：（1）优先获取质量更高的标本，例如通过支气管镜采集BALF进行重复结核分枝杆菌RNA检测；（2）GeneXpertMTB/RIF、多重PCR或靶向高通量测序（targetednext-generationsequencing，tNGS）等基于不同原理的检测技术，可作为结核分枝杆菌RNA检测的重要互补手段。研究及临床实践表明[21]，联合应用不同原理的分子生物学检测方法可显著提高涂片镜检阴性肺结核患者的诊断阳性率。对于结核分枝杆菌RNA检测阴性但高度怀疑活动性结核病的患者，应优化采样、联合不同原理的分子检测方法以及影像学和临床随访资料进行综合判断，以减少误诊或漏诊。疗效评估意见本部分基于前述结核分枝杆菌RNA检测覆盖诊断、全程治疗监测、疗程结束时疗效评估的全链条适用场景，进一步明确该技术在抗结核治疗中的具体疗效评估时机、评估指标、判读标准与临床处置流程，细化循证依据与规范化应用方案。推荐意见6：建议将结核分枝杆菌RNA检测结果作为抗结核治疗早期疗效预判的重要参考指标之一。（推荐强度B，证据级别2a）临床可于抗结核治疗2～16周早期阶段动态监测结核分枝杆菌RNA变化，以RNA阳性率下降幅度、转阴速度及连续动态变化趋势作为早期杀菌活性与治疗反应的核心评估指标。若RNA载量持续下降、转阴早，提示治疗应答良好；若RNA下降缓慢、持续高阳性或波动不降，需早期预警治疗应答不佳、耐药或治疗失败风险，及时调整治疗方案。与传统涂片镜检相比，结核分枝杆菌RNA检测技术可以更及时地反映抗结核治疗早期体内存活细菌负荷的动态变化[20]。一项纳入168例初治气管支气管结核患者的纵向回顾性研究显示，SAT检测阳性率在治疗2周时已显著下降，与MGIT培养的转阴趋势具有良好的动态一致性，且SAT的Kappa值和受试者工作特征曲线下面积在各监测点均优于实时荧光定量PCR[39]。2024年一项纵向研究显示，以rRNA为基础的TB-MBLA在监测治疗反应方面的准确性优于Xpert-Ultra和传统涂片镜检，结核分枝杆菌DNA检测转阴所需时间为结核分枝杆菌RNA检测的3.3倍，TB-MBLA达到完全转阴约需13周，而Xpert-Ultra转阴则需要52周[20]。2025年一项纵向前瞻性研究纳入59例耐多药结核病患者，显示TB-MBLA在治疗第12周和16周与MGIT培养阴转的一致性分别达到96.2%和100.0%[40]。耐药结核病治疗疗程长、失败率高、分枝杆菌培养转阴慢，该研究显示结核分枝杆菌RNA检测能更早预测耐药结核病的疗效，提示结核分枝杆菌RNA检测在耐药结核病疗效评估方面也具有重要价值。此外，2021年1项纳入8项研究的系统综述与荟萃分析也得出一致结论：基于16SrRNA的TB-MBLA在监测抗结核治疗早期的疗效方面优于传统培养方法[41]。因此，在抗结核治疗早期（尤其是治疗前2～16周）采用结核分枝杆菌RNA检测技术可以高效评估早期治疗反应及提前预警治疗失败的风险。推荐意见7：建议将抗结核治疗疗程结束时结核分枝杆菌RNA的持续阴性，作为评估病原体清除、判断能否终止治疗或是否需要延长疗程的重要依据。（推荐强度B，证据级别2b）抗结核治疗疗程终点疗效评估采用多维度联合判定模式：以结核分枝杆菌RNA检测结果作为反映结核分枝杆菌活性的核心微生物学指标，结合临床症状、影像学改变及分枝杆菌培养结果综合评估治愈状态。现有证据表明，以Ct值≥40判断为结核分枝杆菌RNA检测阴性时，结核分枝杆菌RNA检测阴性的阴性预测值＞90%[42]，对排除活动性残留活菌与判定治疗成功具有较高的临床确定性[20]。临床分层判读与处置原则如下：（1）治愈停药标准：疗程结束结核分枝杆菌RNA检测持续阴性，同时伴随临床症状缓解、影像学病灶稳定或吸收、分枝杆菌培养阴性，可判定体内病原体基本清除，可终止治疗并进行常规随访。（2）结核分枝杆菌RNA检测阳性患者的规范处置：治疗结束时结核分枝杆菌RNA检测阳性，即使临床症状与影像学已显著改善，仍提示体内可能残留具有活性的结核分枝杆菌，不建议直接停药，也不建议盲目判定为治疗失败或直接延长疗程。临床需优先复核标本质量与检测流程，并再次复测RNA，同时联合分枝杆菌培养进行交叉验证。若复测RNA转阴且分枝杆菌培养阴性，可结合整体情况完成标准疗程后停药随访；若复测RNA持续阳性或分枝杆菌培养阳转，提示存在持续活菌负荷，需进一步排查耐药、治疗不规范等原因，及时完善药物敏感试验并调整治疗方案、适当延长疗程。（3）特殊人群个体化评估：对于并发HIV感染的结核病患者，因免疫重建延迟可延缓RNA转阴，不可仅凭单次结核分枝杆菌RNA检测阳性判定治疗失败，需结合多次动态检测结果综合评估，并加强随访监测，关注药物相互作用。因此，临床可在抗结核治疗结束时以RNA持续阴性作为判断病原体清除、指导停药的核心依据，同时结合复测结果、分枝杆菌培养证据及临床资料开展分层、个体化疗效判定与处置。存在问题与挑战尽管结核分枝杆菌RNA检测技术在理论及多项研究中展现出显著优势，但从理想条件向复杂临床实际转化的过程中，仍面临若干需要正视的问题与挑战。这些挑战并非否定其固有价值，而是提示当前技术迭代与临床整合尚处于发展阶段，亟须通过标准化建设、技术优化与循证积累逐步解决。在技术层面，首先，RNA分子的固有理化特性是技术稳健性的核心制约因素。相较于DNA，RNA半衰期短、易被环境中的RNA酶或样本内源性RNA酶降解，对标本采集、运输、保存及实验室操作提出了更高的要求。其次，尽管结核分枝杆菌RNA检测在多数研究中表现出高敏感性与高特异性，但在低细菌载量或存在NTM背景时，部分技术平台的实际检测效能仍有波动，且极少数情况下可能与NTM发生交叉反应。再者，当前结核分枝杆菌RNA检测技术平台多样，各平台之间缺乏统一的检测标准、质控体系和参考物质，导致结果可比性不足，限制了多中心数据整合与大规模临床推广。在临床落地与整合层面，首先，技术可及性与样本适用性存在现实瓶颈。多数结核分枝杆菌RNA检测依赖荧光定量PCR或恒温扩增等精密设备，单次检测成本仍高于传统涂片镜检，在基层医疗机构难以普及。第二，临床解读的复杂性被低估。结核分枝杆菌RNA检测阳性/阴性与涂片镜检、分枝杆菌培养、结核分枝杆菌DNA检测结果之间可能出现多种组合模式，每种模式的临床意义需结合患者流行病学史、治疗史、影像学及免疫状态综合判断。目前缺乏针对“弱阳性”“动态载量波动”等中间态结果的标准化决策路径，容易导致临床医师过度依赖单一指标造成误判。第三，疗效评估的量化阈值尚未统一。虽然有研究提示治疗2周或2个月时RNA载量下降可作为早期疗效指标，但不同研究采用的阈值、检测平台及随访节点各异，尚未形成公认的疗效评价标准（如培养阴转标准）。第四，结核分枝杆菌在休眠、持留、耐药等状态下的RNA表达谱差异尚未完全阐明，这可能影响结核分枝杆菌RNA检测在特殊菌群状态下的判读准确性。第五，现有循证证据仍以中等规模、单中心或观察性研究为主，缺乏多中心、大样本、长期随访的随机对照试验，限制了证据等级向强推荐的进一步提升。总结和展望结核分枝杆菌RNA检测技术凭借其可以反映存活细菌状态、高敏感性、快速检测等独特优势，在活动性结核病的早期诊断与抗结核治疗疗效动态评估中展现出明确的临床价值，尤其适用于涂片阴性的肺结核、肺外结核、儿童及并发HIV感染等场景，能够为传统方法难以确诊或监测的患者提供重要的病原学依据。然而，从当前研究成果走向广泛、规范的临床应用，仍需要在技术标准化、操作便捷性、临床解读体系及循证证据层级等方面持续完善。未来应建立全流程标准化体系，包括统一的标本采集、运输、保存及实验室操作规范，推动不同平台间的结果互认；同时推动技术简便化与可及性，研发集成化、便携式设备并探索非痰标本的标准化方案，使该技术惠及基层及资源有限地区；还应构建多维度临床决策支持体系，结合影像学、治疗史及人工智能工具对复杂结果提供分层管理建议；并强化循证医学证据积累，通过多中心大样本研究明确疗效评估的量化阈值，提供高级别证据；此外，可探索结核分枝杆菌RNA检测与微流控、纳米孔测序等新技术的融合，进一步提升综合效能。正视当前阶段的局限性，并通过标准化、技术迭代与高质量临床研究加以解决，推动结核分枝杆菌RNA检测技术在我国结核病精准防控体系中发挥更加规范、广泛且可靠的作用。本共识旨在结合临床需求，科学、规范地指导结核分枝杆菌RNA检测在活动性结核病诊断与疗效评估中的合理应用。参考文献[1]TemurN,ErenEE,CelikI,etal.TheRecentDevelopmentintheDiagnosisofMycobacteriumtuberculosis[J].SmartMed,2025,4(2):e70007.doi:10.1002/smmd.70007.[2]YangZ,LiJ,ShenJ,etal.Recentprogressintuberculosisdiagnosis:insightsintoblood-basedbiomarkersandemergingtechnologies[J].FrontCellInfectMicrobiol,2025,15:1567592.doi:10.3389/fcimb.2025.1567592.[3]TheronG,VenterR,CalligaroG,etal.XpertMTB/RIFResultsinPatientswithPreviousTuberculosis:CanWeDistinguishTruefromFalsePositiveResults?[J].ClinInfectDis,2016,62(8):995-1001.doi:10.1093/cid/civ1223.[4]FriedrichSO,RachowA,SaathoffE,etal.AssessmentofthesensitivityandspecificityofXpertMTB/RIFassayasanearlysputumbiomarkerofresponsetotuberculosistreatment[J].LancetRespirMed,2013,1(6):462-470.doi:10.1016/S2213-2600(13)70119-X.[5]ChiuW,ChangS,LinC,etal.IntegratingAIwithPCRforTuberculosisDiagnosis:EvaluatingaDeepLearningModelforChestX-Rays[J].Bioengineering(Basel),2025,12(12):1377.doi:10.3390/bioengineering12121377.[6]KazemzadehS,YuJ,JamshyS,etal.DeepLearningDetectionofActivePulmonaryTuberculosisatChestRadiographyMatchedtheClinicalPerformanceofRadiologists[J].Radiology,2023,306(1):124-137.doi:10.1148/radiol.212213.[7]ZhangF,ZhangF,DongY,etal.NewInsightsintoBiomarkersforEvaluatingTherapyEfficacyinPulmonaryTuberculosis:ANarrativeReview[J].InfectDisTher,2023,12(12):2665-2689.doi:10.1007/s40121-023-00887-x.[8]ZhangF,ZhangF,LiL,etal.Clinicalutilizationofartificialintelligenceinpredictingtherapeuticefficacyinpulmonarytuberculosis[J].JInfectPublicHealth,2024,17(4):632-641.doi:10.1016/j.jiph.2024.02.012.[9]MtafyaB,SabiitiW,SabiI,etal.MolecularBacterialLoadAssayConcurswithCultureonNaOHInducedLossofMycobacteriumtuberculosisViability[J].JClinMicrobiol,2019,57(7):e01992-18.doi:10.1128/JCM.01992-18.[10]SabiitiW,MtafyaB,DeLimaDA,etal.ATuberculosisMolecularBacterialLoadAssay(TBMBLA)[J].JVisExp,2020,(158):e60460.doi:10.3791/60460.[11]DombayE,SabiitiW,AlferesdeLimaHeadleyD,etal.Simultaneousmeasurementof16S-rRNAandpre-16S-rRNAasastrategytomonitorclinicaltuberculosis[J].FrontAntibiot,2026,5:1760862.doi:10.3389/frabi.2026.1760862.[12]WuZ,ShiJ,ZhouY,etal.TheDiagnosticValueoftheThermostaticAmplificationofRibonucleicAcidinBronchoalveolarLavageFluidinSmear-NegativePulmonaryTuberculosis[J].FrontPublicHealth,2022,10:830477.doi:10.3389/fpubh.2022.830477.[13]FanL,ZhangQ,ChengL,etal.ClinicaldiagnosticperformanceofthesimultaneousamplificationandtestingmethodsfordetectionoftheMycobacteriumtuberculosiscomplexforsmear-negativeorsputumscarcepulmonarytuberculosisinChina[J].ChinMedJ(Engl),2014,127(10):1863-1867.doi:10.3760/cma.j.issn.0366-6999.20133010.[14]CuiZ,WangY,FangL,etal.NovelReal-TimeSimultaneousAmplificationandTestingMethodtoAccuratelyandRapidlyDetectComplex[J].JClinMicrobiol,2012,50(3):646-650.doi:10.1128/Jcm.05853-11.[15]WallisRS,KimP,ColeS,etal.Tuberculosisbiomarkersdiscovery:developments,needs,andchallenges[J].LancetInfectDis,2013,13(4):362-372.doi:10.1016/S1473-3099(13)70034-3.[16]HoneyborneI,MchughTD,PhillipsPP,etal.Molecularbacterialloadassay,aculture-freebiomarkerforrapidandaccuratequantificationofsputumMycobacteriumtuberculosisbacillaryloadduringtreatment[J].JClinMicrobiol,2011,49(11):3905-3911.doi:10.1128/JCM.00547-11.[17]ZainabadiK,LeeMH,WalshKF,etal.Anoptimizedmethodforpurifying,detectingandquantifyingMycobacteriumtuberculosisRNAfromsputumformonitoringtreatmentresponseinTBpatients[J].SciRep,2022,12(1):17382.doi:10.1038/s41598-022-19985-w.[18]YanL,TangS,YangY,etal.ALargeCohortStudyontheClinicalValueofSimultaneousAmplificationandTestingfortheDiagnosisofPulmonaryTuberculosis[J].Medicine(Baltimore),2016,95(4):e2597.doi:10.1097/MD.0000000000002597.[19]QiuX,ZhengS,YangJ,etal.ComparingMycobacteriumtuberculosisRNAAccuracyinVariousRespiratorySpecimensfortheRapidDiagnosisofPulmonaryTuberculosis[J].InfectDrugResist,2022,15:4195-4202.doi:10.2147/IDR.S374826.[20]MusisiE,WamutuS,SsengoobaW,etal.Accuracyofthetuberculosismolecularbacterialloadassaytodiagnoseandmonitorresponsetoanti-tuberculosistherapy:alongitudinalcomparativestudywithstandard-of-caresmearmicroscopy,XpertMTB/RIFUltra,andcultureinUganda[J].LancetMicrobe,2024,5(4):e345-e354.doi:10.1016/S2666-5247(23)00367-1.[21]FanL,LiD,ZhangS,etal.ParallelTestsUsingCulture,XpertMTB/RIF,andSAT-TBinSputumPlusBronchialAlveolarLavageFluidSignificantlyIncreaseDiagnosticPerformanceofSmear-NegativePulmonaryTuberculosis[J].FrontMicrobiol,2018,9:1107.doi:10.3389/fmicb.2018.01107.[22]HanM,XiaoH,YanL.Diagnosticperformanceofnucleicacidtestsintuberculouspleurisy[J].BMCInfectDis,2020,20(1):242.doi:10.1186/s12879-020-04974-z.[23]ShaikhA,SriramanK,VaswaniS,etal.EarlyphaseofeffectivetreatmentinducesdistincttranscriptionalchangesinMycobacteriumtuberculosisexpelledbypulmonarytuberculosispatients[J].SciRep,2021,11(1):17812.doi:10.1038/s41598-021-96902-7.[24]PangM,DaiX,WangN,etal.Astudyonfactorsinfluencingdelayedsputumconversioninnewlydiagnosedpulmonarytuberculosisbasedonbacteriologyandgenomics[J].SciRep,2024,14(1):18550.doi:10.1038/s41598-024-69636-5.[25]AlzareaAI,SaifullahA,KhanYH,etal.Evaluationoftimetosputumsmearconversionanditsassociationwithtreatmentoutcomesamongdrug-resistanttuberculosispatients:aretrospectiverecordreviewingstudy[J].FrontPharmacol,2024,15:1370344.doi:10.3389/fphar.2024.1370344.[26]WeldemhretL,AtsbahaAH,BekuretsionH,etal.TimetoSputumCultureConversionandItsPredictorsAmongMultidrugResistantTuberculosisPatientsinTigray,NorthernEthiopia:RetrospectiveCohortStudy[J].InfectDrugResist,2023,16:3671-3681.doi:10.2147/IDR.S413495.[27]SabiitiW,AzamK,FarmerECW,etal.Tuberculosisbacillaryload,anearlymarkerofdiseaseseverity:theutilityoftuberculosisMolecularBacterialLoadAssay[J].Thorax,2020,75(7):606-608.doi:10.1136/thoraxjnl-2019-214238.[28]YanL,XiaoH,ZhangQ.Usingsimultaneousamplificationandtestingmethodforevaluatingthetreatmentoutcomeofpulmonarytuberculosis[J].BMCInfectDis,2018,18(1):512.doi:10.1186/s12879-018-3424-y.[29]NeumannM,ReimannM,ChesovD,etal.Themolecularbacterialloadassaypredictstreatmentresponsesinpatientswithpre-XDR/XDR-tuberculosismoreaccuratelythanGeneXpertUltraMTB/Rif[J].JInfect,2025,90(2):106399.doi:10.1016/j.jinf.2024.106399.[30]ShaikhA,SriramanK,VaswaniS,etal.SMaRT-PCR:samplingusingmasksandRT-PCR,anoninvasivediagnostictoolforpaediatricpulmonaryTB[J].IntJTubercLungDis,2024,28(4):189-194.doi:10.5588/ijtld.23.0291.[31]MapambaDA,SauliE,LalashowiJ,etal.PerformanceofTuberculosisMolecularBacterialLoadAssayComparedtoAlereTB-LAMinUrineofPulmonaryTuberculosisPatientswithHIVCo-Infections[J].IntJMolSci,2023,24(4):3715.doi:10.3390/ijms24043715.[32]MusisiE,SessoloA,KaswabuliS,etal.HighMycobacteriumtuberculosisBacillaryLoadsDetectedbyTuberculosisMolecularBacterialLoadAssayinPatientStool:aPotentialAlternativeforNonsputumDiagnosisandTreatmentResponseMonitoringofTuberculosis[J].MicrobiolSpectr,2022,10(1):e0210021.doi:10.1128/spectrum.02100-21.[33]LiT,YanX,DuX,etal.ExtrapulmonarytuberculosisinChina:anationalsurvey[J].IntJInfectDis,2023,