小柴胡汤检验规范

小柴胡汤检验规范1范围本规范规定了小柴胡汤的质量要求、检验方法、检验规则、标志、包装、运输与贮存等内容，适用于小柴胡汤饮片、配方颗粒、复方制剂等产品的生产、检验与质量控制，各类小柴胡汤相关产品的检验均应符合本规范的要求。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》2025年版一部《中药饮片质量标准通则》《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》《药品生产质量管理规范》（2010年修订）《中药有害残留物限量制定指导原则》3术语与定义3.1小柴胡汤：由柴胡、黄芩、半夏（姜制）、党参、生姜、甘草（蜜炙）、大枣七味药组成的传统中药复方，具有解表散热、疏肝和胃的功效。3.2特征图谱：指中药材、中药饮片或复方制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。3.3含量限度：指规定的待测成分的含量范围，通常以质量分数或质量浓度表示。4基原与饮片要求4.1柴胡为伞形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.或狭叶柴胡BupleurumscorzonerifoliumWilld.的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”和“南柴胡”。北柴胡根呈圆柱形或长圆锥形，长6~15cm，直径0.3~0.8cm，表面黑褐色或浅棕色，具纵皱纹、支根痕及皮孔，质硬而韧，不易折断，断面显纤维性，皮部浅棕色，木部黄白色，气微香，味微苦；南柴胡根较细，圆锥形，顶端有多数细毛状枯叶纤维，下部多不分枝或稍分枝，表面红棕色或黑棕色，靠近根头处多具细密环纹，质稍软，易折断，断面略平坦，不显纤维性，具败油气。饮片应除去杂质和残茎，洗净，润透，切厚片，干燥。北柴胡饮片呈不规则厚片，外表皮黑褐色或浅棕色，具纵皱纹，切面皮部浅棕色，木部黄白色，纤维性，气微香，味微苦；南柴胡饮片外表皮红棕色或黑棕色，有时可见根头处具细密环纹或有细毛状枯叶纤维，切面黄白色，平坦，具败油气。水分不得过10.0%，总灰分不得过8.0%，酸不溶性灰分不得过3.0%，浸出物照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于11.0%，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的总量不得少于0.30%。4.2黄芩为唇形科植物黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。呈圆锥形，扭曲，长8~25cm，直径1~3cm，表面棕黄色或深黄色，有稀疏的疣状细根痕，上部较粗糙，有扭曲的纵皱纹或不规则的网纹，下部有顺纹和细皱纹，质硬而脆，易折断，断面黄色，中心红棕色，老根中心呈枯朽状或中空，暗棕色或棕黑色，气微，味苦。饮片应除去杂质，置沸水中煮10分钟，取出，闷透，切薄片，干燥；或蒸半小时，取出，切薄片，干燥（注意避免暴晒）。饮片为类圆形或不规则形薄片，外表皮黄棕色至棕褐色，切面黄棕色或黄绿色，具有放射状纹理，气微，味苦。水分不得过12.0%，总灰分不得过6.0%，浸出物照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于40.0%，黄芩苷含量不得少于9.0%。4.3姜半夏为天南星科植物半夏Pinelliaternata(Thunb.)Breit.的干燥块茎的炮制加工品。取净半夏，大小分开，用水浸泡至内无干心时，取出；另取生姜切片煎汤，加白矾与半夏共煮透，取出，晾干，或晾至半干，干燥；或切薄片，干燥。每100kg净半夏，用生姜25kg、白矾12.5kg。本品呈片状、不规则颗粒状或类球形，表面棕色至棕褐色，质硬脆，断面淡黄棕色，常具角质样光泽，气微香，味淡、微有麻舌感，嚼之略粘牙。水分不得过13.0%，总灰分不得过7.5%，白矾残留量以含水硫酸铝钾计算，不得过8.5%，浸出物照水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定，不得少于10.0%，含琥珀酸不得少于0.20%。4.4党参为桔梗科植物党参Codonopsispilosula(Franch.)Nannf.、素花党参CodonopsispilosulaNannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen或川党参CodonopsistangshenOliv.的干燥根。党参呈长圆柱形，稍弯曲，长10~35cm，直径0.4~2cm，表面黄棕色至灰棕色，根头部有多数疣状突起的茎痕及芽，每个茎痕的顶端呈凹下的圆点状，习称“狮子头”，根头下有致密的环状横纹，向下渐稀疏，有的达全长的一半，栽培品环状横纹少或无，全体有纵皱纹和散在的横长皮孔样突起，支根断落处常有黑褐色胶状物，质稍硬或略带韧性，断面稍平坦，有裂隙或放射状纹理，皮部淡棕黄色至黄棕色，木部淡黄色至黄色，有特殊香气，味微甜。饮片应除去杂质，洗净，润透，切厚片，干燥。饮片呈类圆形的厚片，外表皮灰黄色、黄棕色至灰棕色，有的可见根头部有多数疣状突起的茎痕和芽，切面皮部淡棕黄色至黄棕色，木部淡黄色至黄色，有裂隙或放射状纹理，有特殊香气，味微甜。水分不得过16.0%，总灰分不得过5.0%，浸出物照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用45%乙醇作溶剂，不得少于55.0%，含党参炔苷不得少于0.020%。4.5生姜为姜科植物姜ZingiberofficinaleRosc.的新鲜根茎。呈不规则块状，略扁，具指状分枝，长4~18cm，厚1~3cm，表面黄褐色或灰棕色，有环节，分枝顶端有茎痕或芽，质脆，易折断，断面浅黄色，内皮层环纹明显，维管束散在，气香特异，味辛辣。饮片除去杂质，洗净，用时切厚片。本品呈不规则的厚片，可见指状分枝，切面浅黄色，内皮层环纹明显，维管束散在，气香特异，味辛辣。挥发油含量不得少于0.12%（ml/g），6-姜辣素含量不得少于0.050%。4.6蜜炙甘草为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、胀果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根和根茎的炮制加工品。取净甘草片，照蜜炙法炒至黄色至深黄色，不粘手时取出，晾凉。每100kg净甘草片，用炼蜜25kg。本品呈类圆形或椭圆形切片，外表皮红棕色或灰棕色，微有光泽，切面黄色至深黄色，形成层环明显，射线放射状，略有黏性，具焦香气，味甜。水分不得过10.0%，总灰分不得过5.0%，酸不溶性灰分不得过1.0%，浸出物照水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定，不得少于70.0%，含甘草苷不得少于0.50%，甘草酸不得少于1.0%。4.7大枣为鼠李科植物枣ZiziphusjujubaMill.的干燥成熟果实。呈椭圆形或球形，长2~3.5cm，直径1.5~2.5cm，表面暗红色，略带光泽，有不规则皱纹，基部凹陷，有短果梗，外果皮薄，中果皮棕黄色或淡褐色，肉质，柔软，富糖性而油润，果核纺锤形，两端锐尖，质坚硬，气微香，味甜。饮片除去杂质，洗净，晒干，用时破开或去核。水分不得过19.0%，总灰分不得过2.0%，浸出物照水溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，不得少于60.0%，总多糖以无水葡萄糖计不得少于7.0%。5性状检验5.1小柴胡汤饮片组方：按处方量称取各饮片，混合后应呈棕黄色至黄棕色的颗粒状或片状混合物，气微香，味甘、微苦。5.2小柴胡汤煎剂：依法煎煮后，药液呈棕黄色至棕褐色，静置后可见少量沉淀，气香，味甘、微苦。5.3小柴胡汤颗粒剂：应为黄棕色至棕褐色的颗粒，味甜、微苦；或为棕黄色至棕褐色的颗粒，味微苦（无蔗糖）。5.4小柴胡汤片剂：除去包衣后显灰棕色至黑褐色，气微，味甜、微苦。6鉴别检验6.1显微鉴别取本品粉末，置显微镜下观察：油管含黄色或黄棕色条状分泌物，直径8~25μm（柴胡）。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细（黄芩）。草酸钙针晶成束，长32~144μm，存在于黏液细胞中或散在（半夏）。联结乳管直径12~15μm，含细小颗粒状物（党参）。淀粉粒类圆形或椭圆形，直径2~20μm，脐点点状、裂缝状或星状；油细胞类圆形或椭圆形，直径30~100μm，含淡黄色油滴（生姜）。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维（甘草）。外果皮细胞黄棕色，表面观类多角形，壁稍厚，胞腔含棕色物（大枣）。6.2薄层色谱鉴别6.2.1柴胡鉴别取本品2g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷d对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8:2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。6.2.2黄芩鉴别取本品1g，加乙酸乙酯-甲醇（3:1）混合溶液30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。6.2.3甘草鉴别取本品1g，加乙醚40ml，加热回流1小时，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15:1:1:2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。7检查项检验7.1水分照水分测定法测定，不得过12.0%（饮片组方）、不得过8.0%（颗粒剂）、不得过9.0%（片剂）。7.2总灰分照灰分测定法测定，不得过7.0%（饮片组方）、不得过6.0%（颗粒剂）、不得过6.5%（片剂）。7.3酸不溶性灰分照灰分测定法测定，不得过1.5%（饮片组方）、不得过1.0%（颗粒剂）、不得过1.2%（片剂）。7.4浸出物照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用70%乙醇作溶剂，不得少于25.0%（饮片组方）、不得少于30.0%（颗粒剂）、不得少于28.0%（片剂）。7.5重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法测定，铅不得过5mg/kg，镉不得过0.3mg/kg，砷不得过2mg/kg，汞不得过0.2mg/kg，铜不得过20mg/kg。7.6农药残留量照农药残留量测定法测定，有机氯类农药残留：六六六（总BHC）不得过0.2mg/kg，滴滴涕（总DDT）不得过0.2mg/kg，五氯硝基苯（PCNB）不得过0.1mg/kg；有机磷类农药残留：敌敌畏不得过0.2mg/kg，乐果不得过0.5mg/kg，马拉硫磷不得过0.5mg/kg，对硫磷不得过0.05mg/kg；拟除虫菊酯类农药残留：氯氰菊酯不得过1mg/kg，氰戊菊酯不得过0.5mg/kg，溴氰菊酯不得过0.5mg/kg。7.7微生物限度照微生物限度检查法检查，细菌总数不得过10000cfu/g（饮片组方）、不得过1000cfu/g（颗粒剂、片剂）；霉菌和酵母菌总数不得过100cfu/g；不得检出大肠埃希菌；不得检出沙门菌。8含量测定8.1柴胡皂苷a和柴胡皂苷d照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按柴胡皂苷a峰计算应不低于10000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0~5025→9075→1050~559010对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷d对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a0.2mg、柴胡皂苷d0.2mg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的总量不得少于0.15%（饮片组方）、不得少于0.10%（颗粒剂、片剂）。8.2黄芩苷照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50:50）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含黄芩苷不得少于1.5%（饮片组方）、不得少于1.2%（颗粒剂、片剂）。8.3甘草苷照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为237nm。理论板数按甘草苷峰计算应不低于5000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0~819818~3519→3581→6535~3635→10065→036~401000对照品溶液的制备：取甘草苷对照品适量，精密称定，加40%乙醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入40%乙醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用40%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含甘草苷不得少于0.20%（饮片组方）、不得少于0.15%（颗粒剂、片剂）。9特征图谱照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm）；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml；柱温为30℃；检测波长为254nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于10000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0~105→1595→8510~2515→2585→7525~4025→4075→6040~6040→9560→560~65955参照物溶液的制备：取黄芩苷对照品、柴胡皂苷a对照品、甘草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1ml含黄芩苷50μg、柴胡皂苷a20μg、甘草苷20μg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录65分钟的色谱图。供试品特征图谱中应呈现12个特征峰，其中3个峰应分别与相应参照物的保留时间相对应。以黄芩苷峰为参照峰，计算各特征峰与参照峰的相对保留时间，相对保留时间应在规定值的±5%范围之内，规定值为：0.12（峰1）、0.25（峰2）、0.38（峰3，甘草苷）、0.52（峰4）、0.61（峰5）、1.00（峰6，黄芩苷）、1.35（峰7）、1.72（峰8）、2.1