2025年病理学技术初级(师)-专业实践能力考试历年参考题库含答案解析

2025年病理学技术初级(师)-专业实践能力考试历年参考题库含答案解析一、选择题（单句型最佳选择题。每题只有1个正确答案）1.常规HE染色石蜡切片的标准厚度为A.1~2μmB.2~3μmC.4~5μmD.8~10μmE.15~20μm答案：C解析：常规病理诊断用石蜡切片厚度标准为4~5μm，过薄会导致细胞结构显示不清，过厚易出现细胞重叠，影响诊断。特殊需求如肾穿刺活检病理切片厚度为2~3μm，脂肪组织切片可适当增至8~10μm，快速冷冻切片常规厚度同常规石蜡切片。2.冷冻切片制备中，脑组织的适宜冷冻温度为A.-10~-15℃B.-18~-20℃C.-22~-25℃D.-30~-35℃E.-40℃以下答案：C解析：不同组织因成分差异所需冷冻温度不同：实质器官（肝、脾、肾等）适宜温度为-18~-22℃；脑组织含较多脂质，质地偏软，适宜温度为-22~-25℃；脂肪组织、皮肤真皮层含大量脂质或纤维，需-28~-30℃才能形成足够硬度保证切片完整。温度过高组织发软易卷边，温度过低组织发脆易碎裂。3.HE染色中，盐酸酒精分化的主要作用是A.脱去组织内多余的苏木素着色B.促进伊红对胞浆的着色C.去除组织切片上的蜡质D.使细胞核染色更牢固E.防止切片脱片答案：A解析：盐酸酒精分化是HE染色的关键步骤，作用是脱去细胞核中过量结合的苏木素，同时去除胞浆内非特异性吸附的苏木素着色，使核浆对比清晰。分化程度需镜下控制，以细胞核染色清晰、胞浆无色为佳。B选项为返蓝步骤的后续作用，C选项为二甲苯的作用，D选项为媒染剂的作用，E选项与涂胶、固定等步骤相关。4.免疫组化染色中，最常用的热抗原修复液是A.pH7.2~7.4的PBS缓冲液B.pH6.0的柠檬酸盐缓冲液C.pH8.0的Tris-HCl缓冲液D.pH5.0的醋酸缓冲液E.生理盐水答案：B解析：抗原修复是免疫组化的核心步骤之一，热诱导抗原修复是目前应用最广的方法，其中pH6.0的柠檬酸盐缓冲液为最常用修复液，适用于绝大多数抗原的表位恢复。对于部分核抗原或难表达抗原，可选用pH8.0或pH9.0的EDTA缓冲液进行修复。PBS缓冲液主要用于染色过程中的洗涤。5.显示组织内结核分枝杆菌的首选特殊染色方法是A.革兰染色B.抗酸染色C.吉姆萨染色D.巴氏染色E.银染答案：B解析：结核分枝杆菌细胞壁含大量分枝菌酸，具有抗酸性，抗酸染色后菌体呈红色，背景及其他非抗酸菌呈蓝色，是诊断结核分枝杆菌感染的首选特殊染色方法。革兰染色主要用于细菌分类鉴定，吉姆萨染色多用于血液细胞及寄生虫检测，巴氏染色用于脱落细胞学检查，银染多用于幽门螺杆菌、网状纤维等检测。6.Masson三色染色的结果判定，正确的是A.胶原纤维呈红色，肌纤维呈蓝色B.胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色C.胶原纤维呈绿色，肌纤维呈黄色D.胶原纤维呈黑色，肌纤维呈红色E.胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈黑色答案：B解析：Masson三色染色是病理技术中常用的结缔组织染色方法，常用于区分胶原纤维与肌纤维、观察纤维化程度。染色结果为：胶原纤维、黏液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素、红细胞呈红色，细胞核呈黑蓝色。该染色在肝硬化、心肌纤维化、肿瘤鉴别诊断中应用广泛。7.病理标本常规固定最常用的固定液是A.10%中性福尔马林B.4%多聚甲醛C.95%乙醇D.冰醋酸E.戊二醛答案：A解析：10%中性福尔马林（即4%中性甲醛溶液）是病理标本常规固定的首选固定液，其穿透力强、固定均匀，能较好保存组织细胞的形态结构及抗原性，适用于绝大多数常规病理标本的固定。4%多聚甲醛多用于免疫组化、分子病理等特殊需求的固定，95%乙醇多用于细胞学固定，戊二醛多用于电镜标本固定。8.石蜡切片制作过程中，脱水的主要目的是A.去除组织内的水分，利于后续透明及浸蜡B.使组织变硬，利于切片C.保存组织内的抗原性D.增加组织的通透性E.防止组织自溶答案：A解析：脱水是石蜡切片制备的中间环节，指用梯度乙醇（通常从低浓度到高浓度，如70%、80%、95%、100%乙醇）逐步置换组织内水分的过程，目的是去除组织中的水分，使后续的透明剂（二甲苯等）能顺利进入组织，为浸蜡和包埋做准备。B选项为固定和浸蜡的共同作用，C选项为固定的作用，E选项为固定的主要目的之一。9.刚果红染色用于诊断下列哪种病变A.含铁血黄素沉积B.淀粉样变C.脂肪变性D.纤维素样坏死E.糖原累积答案：B解析：刚果红染色是诊断淀粉样变的特异性染色方法，淀粉样物质与刚果红结合后呈红色，在偏振光显微镜下呈现苹果绿双折光，具有确诊意义。含铁血黄素用普鲁士蓝染色显示，脂肪变性用苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ等脂肪染色显示，糖原累积用PAS染色显示。10.脱落细胞学检查中，最常用的染色方法是A.HE染色B.巴氏染色C.瑞氏-吉姆萨染色D.抗酸染色E.免疫组化染色答案：B解析：巴氏染色是脱落细胞学检查的首选染色方法，其特点是染色透明度高、细胞结构清晰、色彩丰富，尤其适用于宫颈脱落细胞、痰液、胸水等脱落细胞的形态学观察，可清晰显示细胞核的细微结构，有助于癌前病变及癌细胞的识别。HE染色多用于组织切片，瑞氏-吉姆萨染色多用于血液及骨髓细胞学检查。11.免疫组化染色中设立阴性对照的主要目的是A.验证染色方法的敏感性B.排除非特异性着色的干扰C.验证抗原的存在D.提高染色的阳性率E.节省抗体用量答案：B解析：免疫组化染色的对照设置是质量控制的关键环节，阴性对照通常用已知不含靶抗原的组织或用PBS替代一抗进行染色，目的是排除抗体非特异性结合、内源性酶等因素导致的假阳性结果，保证染色结果的可靠性。阳性对照的目的是验证染色方法的敏感性、确认抗原的存在。12.石蜡包埋过程中，包埋盒底部放置滤纸的主要作用是A.吸收多余的石蜡B.防止组织块从包埋盒中脱落C.标记组织编号D.保证包埋面平整E.防止石蜡过快凝固答案：B解析：石蜡包埋时，在包埋盒底部放置一层滤纸或专用衬纸，可增加组织块与包埋盒的黏附力，防止后续切片过程中组织块从包埋盒上脱落。包埋面平整需通过包埋时的操作保证，标记编号直接写在包埋盒上，吸收多余石蜡不是主要作用。13.显示真菌的常用特殊染色方法是A.抗酸染色B.革兰染色C.PAS染色D.苏丹Ⅲ染色E.普鲁士蓝染色答案：C解析：真菌细胞壁含有多糖类物质，PAS染色可将真菌细胞壁染成紫红色，清晰显示真菌的形态和结构，是病理诊断中检测真菌的常用方法。抗酸染色用于分枝杆菌检测，革兰染色用于细菌分类，苏丹Ⅲ用于脂肪染色，普鲁士蓝用于含铁血黄素染色。14.脱落细胞学标本涂片后固定的主要目的是A.使细胞快速干燥B.保持细胞的形态结构，防止自溶C.增加细胞的通透性D.使细胞易于黏附于载玻片上E.提高染色的对比度答案：B解析：脱落细胞学标本涂片后需立即固定，目的是使细胞内的蛋白质、核酸等成分迅速凝固，保持细胞的形态结构，防止细胞自溶和腐败，保证后续染色和诊断的准确性。固定还可增加细胞与载玻片的黏附力，防止细胞脱落，但这不是最主要的目的。15.下列哪种染色方法可用于显示神经纤维A.Masson三色染色B.嗜银染色C.刚果红染色D.抗酸染色E.苏丹Ⅲ染色答案：B解析：嗜银染色（如Bielschowsky染色、Glees染色）是显示神经纤维的常用特殊染色方法，神经纤维可被银盐浸染呈黑色，可用于观察神经纤维的变性、再生及肿瘤的神经浸润等。Masson三色用于胶原纤维与肌纤维的鉴别，刚果红用于淀粉样变检测。二、A2型题（病例摘要型最佳选择题。每题只有1个正确答案）1.某病理科接收1例胃镜活检小标本，临床怀疑幽门螺杆菌感染，需行幽门螺杆菌检测，下列哪种染色方法敏感性和特异性最高A.HE染色B.抗酸染色C.Warthin-Starry银染D.PAS染色E.Masson染色答案：C解析：Warthin-Starry银染是检测幽门螺杆菌的金标准染色方法，敏感性和特异性均较高，幽门螺杆菌呈黑色，背景为淡黄色，对比清晰，易于识别。HE染色可观察胃黏膜形态，但幽门螺杆菌显示不清，仅能初步筛查；抗酸染色对幽门螺杆菌的阳性率低；PAS染色用于显示糖原、黏液等；Masson染色用于显示胶原纤维。2.某患者肾穿刺活检标本，临床怀疑薄基底膜肾病，需进行透射电镜观察，标本的正确处理方式是A.放入10%中性福尔马林固定B.放入4%多聚甲醛固定C.放入2.5%戊二醛固定，4℃保存D.放入生理盐水常温保存E.直接放入-80℃冰箱冷冻答案：C解析：透射电镜标本需用戊二醛固定，常用浓度为2.5%，固定后4℃保存，以维持细胞超微结构的完整性。福尔马林、多聚甲醛固定的标本超微结构保存效果差，不适用于电镜检查；生理盐水常温保存易导致组织自溶，冷冻会破坏细胞超微结构。3.病理科技术人员在制作某淋巴结石蜡切片时，出现切片碎裂、呈豆腐渣样改变，最可能的原因是A.固定不充分B.脱水过度C.透明时间过短D.浸蜡温度过高E.切片刀不锋利答案：B解析：脱水过度是指组织在高浓度乙醇中停留时间过长，导致组织内水分过度丢失、质地变脆，切片时易出现碎裂、碎屑多的情况。固定不充分会导致组织软化、切片不成形；透明时间过短会导致浸蜡不充分，切片发软；浸蜡温度过高会导致组织硬韧，切片卷曲；切片刀不锋利会导致切片出现划痕、卷边。4.某患者乳腺肿物切除标本，术后需行ER、PR、HER2免疫组化检测，用于指导内分泌及靶向治疗，下列哪种抗原修复方法对HER2抗原的检测效果最佳A.酶消化修复B.微波水浴修复（柠檬酸盐缓冲液）C.高压蒸汽修复（EDTA缓冲液，pH9.0）D.室温放置自然修复E.无需修复答案：C解析：HER2为膜抗原，常规热修复往往不能充分暴露其抗原表位，采用pH9.0的EDTA缓冲液进行高压蒸汽修复，可有效逆转甲醛固定导致的蛋白交联，充分暴露HER2抗原位点，提高检测的敏感性和准确性，是目前HER2免疫组化检测推荐的标准修复方法。酶消化修复多用于细胞间质抗原的修复，柠檬酸盐缓冲液修复效果弱于EDTA高压修复。5.某病理科在进行大批量宫颈液基细胞学标本染色时，出现所有标本胞核染色偏淡、对比不清的情况，排除染色液失效的因素，最可能的操作失误是A.固定时间不足B.分化时间过短C.返蓝不充分D.脱水不彻底E.透明时间过长答案：A解析：宫颈液基细胞学标本需充分固定才能使细胞核内的核酸与染料充分结合，若固定时间不足（通常要求液基标本固定时间不少于15分钟，巴氏染色前固定不少于10分钟），会导致细胞核着色浅、结构不清。分化时间过短会导致细胞核染色过深，返蓝不充分会使细胞核呈棕褐色，脱水不彻底会导致切片透明度差。6.某病理科接收1例皮下肿物切除标本，大体检查见肿物呈淡黄色、质软，镜下需鉴别是脂肪增生还是脂肪肉瘤，下列哪种染色方法可辅助显示脂肪成分A.冷冻切片苏丹Ⅲ染色B.石蜡切片PAS染色C.石蜡切片Masson染色D.冷冻切片刚果红染色E.石蜡切片网状纤维染色答案：A解析：脂肪成分易被石蜡制片过程中的有机溶剂（二甲苯、乙醇等）溶解，因此石蜡切片无法显示中性脂肪，需制作冷冻切片进行脂肪染色。苏丹Ⅲ染色可将中性脂肪染成橘红色，是显示脂肪成分的首选方法，可辅助鉴别脂肪源性病变。7.某患者因皮肤水疱性疾病就诊，皮肤科取活检标本需行直接免疫荧光检测，标本的正确处理方式是A.放入10%中性福尔马林固定B.放入生理盐水，4℃保存并尽快送检C.放入95%乙醇固定D.直接冷冻保存E.室温干燥保存答案：B解析：直接免疫荧光检测需保存组织内免疫球蛋白、补体等的活性，不能用福尔马林等固定液固定，否则会破坏抗原表位。标本需放入生理盐水或湿润的纱布中，4℃保存并在24小时内送检，制作冷冻切片后进行免疫荧光染色。8.病理科技术人员在进行免疫组化染色时，出现整张切片背景着色深的问题，下列哪项不是导致该问题的原因A.一抗浓度过高B.封闭不充分C.内源性过氧化物酶未灭活D.洗涤不充分E.抗原修复不足答案：E解析：免疫组化背景着色深的常见原因包括：一抗浓度过高导致非特异性结合；封闭不充分无法阻断非特异性结合位点；内源性过氧化物酶或生物素未灭活导致假阳性；洗涤不充分无法去除未结合的抗体。抗原修复不足会导致阳性信号弱、假阴性，不会导致背景着色深。三、B型题（配伍选择题。每组题共用同一组备选答案，每题只有1个正确答案，备选答案可重复选用，也可不选用）（1~5题共用备选答案）A.苏丹Ⅲ染色B.普鲁士蓝染色C.刚果红染色D.网状纤维染色E.PAS染色1.显示组织内含铁血黄素沉积，首选的染色方法是答案：B解析：普鲁士蓝染色又称含铁血黄素染色，含铁血黄素中的三价铁离子与亚铁氰化钾反应生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀，可特异性显示含铁血黄素沉积，常用于慢性淤血、出血性疾病的诊断。2.显示组织内中性脂肪，首选的染色方法是答案：A解析：苏丹Ⅲ染色为常用的脂肪染色方法，苏丹染料可溶于脂肪，使中性脂肪呈橘红色，需用冷冻切片进行染色（石蜡制片过程中脂肪会被有机溶剂溶解），常用于脂肪变性、脂肪肉瘤等疾病的辅助诊断。3.显示基底膜、糖原及黏液物质，首选的染色方法是答案：E解析：PAS染色即过碘酸-雪夫染色，过碘酸可氧化糖类物质的邻二醇基形成醛基，再与雪夫试剂反应生成紫红色产物，可显示糖原、基底膜、黏液、真菌等成分，在肾小球疾病、糖原累积病、真菌检测中应用广泛。4.显示组织内淀粉样物质，首选的染色方法是答案：C解析：刚果红染色可与淀粉样物质特异性结合，普通光镜下呈橘红色，偏振光下呈苹果绿双折光，是淀粉样变诊断的金标准染色方法。5.观察肿瘤间质网状纤维分布、鉴别癌与肉瘤，首选的染色方法是答案：D解析：网状纤维染色可显示网状纤维（Ⅲ型胶原）的分布，癌组织中网状纤维仅分布于癌巢周围，肉瘤细胞间可见大量网状纤维，是鉴别癌与肉瘤的重要特殊染色方法，也可用于观察肝窦、肾小球系膜等结构的改变。（6~10题共用备选答案）A.-20℃冰箱B.4℃冰箱C.室温D.37℃孵箱E.-80℃超低温冰箱6.免疫组化染色过程中，一抗孵育的常用温度（过夜法）是答案：B解析：免疫组化一抗孵育分为室温法和过夜法，过夜法通常将切片放入4℃冰箱孵育12~16小时，可使抗体与抗原充分结合，减少非特异性着色，是目前多数实验室采用的孵育方法。7.免疫组化染色中，酶标二抗孵育的常用温度是答案：C解析：酶标二抗孵育通常在室温下进行，时间为30~60分钟，室温孵育可保证二抗的活性，同时节省实验时间。8.长期保存石蜡包埋组织标本的适宜温度是答案：C解析：石蜡包埋组织标本在常温干燥环境下可长期保存，通常存放于室温的蜡块柜中即可，无需低温保存，保存时间可达数十年，仍可用于后续的免疫组化、分子病理检测。9.新鲜组织标本用于后续RNA提取，需长期保存的适宜温度是答案：E解析：RNA易被RNA酶降解，用于RNA提取的新鲜组织需快速放入液氮中速冻，然后转移至-80℃超低温冰箱长期保存，可有效抑制RNA酶活性，保证RNA的完整性。10.冷冻切片制备后，若暂不染色，短期保存的适宜温度是答案：A解析：冷冻切片制备后若暂不染色，可放入-20℃冰箱短期保存（1~2周），避免组织抗原丢失或细胞结构破坏，需注意密封防止水分蒸发。四、案例分析题（不定项选择题。每道案例下设若干个问题，每个问题有多个备选答案，其中有1个或多个正确答案，多选、少选、错选均不得分）案例1：患者，女性，58岁，因“咳嗽、咳痰伴痰中带血2个月”入院，胸部CT示右肺上叶占位性病变，行支气管镜活检，病理科收到标本后需行常规HE染色、免疫组化及特殊染色辅助诊断。1.关于该支气管镜活检小标本的处理，正确的有A.收到标本后立即放入10%中性福尔马林固定B.固定液量至少为标本体积的5~10倍C.固定时间为2~4小时即可，无需过长D.脱水、透明时间可适当缩短，防止组织过硬E.包埋时需将黏膜面垂直于包埋盒底面答案：ABDE解析：支气管镜活检属于小标本，收到后需立即固定，防止组织自溶；固定液量需为标本体积的5~10倍以上，保证固定充分；小标本固定时间通常为4~6小时，过短固定不充分，过长可能影响抗原性；小标本脱水、透明时间可较大体标本适当缩短，避免组织过度收缩变硬；包埋时需将黏膜面垂直于包埋盒底面，保证切片时能切到完整的黏膜各层结构。2.若HE染色后镜下见肺组织内有大量淡染、无结构的物质沉积，临床怀疑淀粉样变，需进一步行哪些染色验证A.刚果红染色B.甲基紫染色C.普鲁士蓝染色D.偏振光显微镜观察E.苏丹Ⅲ染色答案：ABD解析：淀粉样变的诊断需结合特殊染色，刚果红染色为首选，阳性呈橘红色，偏振光下见苹果绿双折光具有特异性；甲基紫染色可使淀粉样物质呈紫红色异染，也可作为辅助诊断方法。普鲁士蓝染色用于含铁血黄素检测，苏丹Ⅲ染色用于脂肪检测，均与淀粉样变无关。3.若该病例最终诊断为肺腺癌，需行EGFR、ALK等基因检测指导靶向治疗，从石蜡切片中提取DNA的注意事项，正确的有A.需选择肿瘤细胞占比≥20%的区域进行取材B.切片厚度为8~10μm，每张切片面积约1cm²为宜C.脱蜡需彻底，避免残留石蜡影响DNA提取效率D.消化液中需加入蛋白酶K，充分降解组织蛋白E.提取的DNA需进行纯度和浓度检测，合格后方可用于后续检测答案：ABCDE解析：石蜡组织DNA提取的质量控制要求包括：①标本选择：肿瘤细胞占比≥20%，避免过多坏死组织及正常组织干扰；②切片要求：厚度8~10μm，面积1cm²左右，过薄DNA量不足，过厚脱蜡不充分；③脱蜡彻底：二甲苯脱蜡后需用乙醇去除残留二甲苯；④消化充分：蛋白酶K可降解核蛋白，释放DNA，需37℃~56℃孵育至组织完全消化；⑤质量检测：提取后需检测DNA的浓度（通常要求≥50ng/μL）和纯度（OD260/280在1.8~2.0之间），合格后方可用于PCR、测序等后续分子检测。案例2：某病理科技术人员在进行