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文档简介
第50讲微生物的培养技术及应用考点1微生物的基本培养技术一、培养基的配制1.概念:人们按照微生物对______________的不同需求,配制出供其________________的营养基质。2.营养组成(1)一般都含有________、________、________和无机盐等。(2)需要满足微生物生长对________、特殊营养物质以及________的需求。微生物对培养基的需求乳酸杆菌添加________霉菌一般将培养基调至____性细菌一般将培养基调至____________性厌氧微生物提供________的条件3.种类(1)按物理性质分eq\b\lc\[\rc\(\a\vs4\al\co1(液体培养基:工业生产,固体培养基:微生物分离、鉴,定、活菌计数))(2)按用途分eq\b\lc\[\rc\(\a\vs4\al\co1(选择培养基:富集、分离出特定的,微生物,鉴别培养基:鉴别不同种类的微,生物))二、无菌技术1.概念:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。2.关键:________________。3.目的:________________________。4.消毒与灭菌的比较比较项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的__________或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药物消毒法操作空间、操作者的衣物和手等紫外线消毒法接种室、接种箱或超净工作台灭菌强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子湿热灭菌法培养基、容器等干热灭菌法玻璃器皿、金属用具等灼烧灭菌法接种工具等5.其他操作(1)做好消毒和灭菌工作后,要注意避免已经灭菌处理的材料用具与____________________接触。(2)为了避免周围环境中微生物的污染,接下来的许多操作都应在超净工作台上并在____________附近进行。6.酵母菌的纯培养考点2微生物的选择培养和计数一、选择培养基二、微生物的选择培养1.土壤取样铲取土样,将样品装入纸袋中。2.等比稀释将10g土样加入盛有______mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释。3.涂布平板4.培养观察(1)待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入__________℃的恒温培养箱中培养1~2d。(2)在涂布有合适浓度菌液的平板上可以观察到分离的________。三、微生物的数量测定1.稀释涂布平板法(1)计数原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的________,就能推测出样品中大约含有多少活菌。(2)计数标准:为了保证结果准确,一般选择菌落数为________的平板进行计数。(3)计数方法:通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数为________、适于计数的平板。在__________下,应至少对3个平板进行重复计数,然后求出________。(4)当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,统计结果一般用________表示。2.显微镜直接计数法(1)计数原理:利用特定的__________或____________,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。(2)优点:是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数自主诊断考点1一、1.营养物质生长繁殖2.(1)水碳源氮源(2)pHO2维生素酸中性或弱碱无氧二、2.防止杂菌污染3.获得纯净的微生物培养物4.物理、化学5.(1)周围的物品(2)酒精灯火焰6.高压蒸汽灭菌法干热灭菌法平板划线法倒置未接种28考点2一、抑制或阻止NH3尿素二、2.903.0.1酒精冷却4.(1)30~37(2)
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