交叉配血与血型复核规范指南（2025版）

交叉配血与血型复核规范指南（2025版）1.总则1.1目的与依据为规范医疗机构临床输血前交叉配血与血型复核的操作流程，确保输血安全，预防溶血性输血反应及迟发性输血不良反应的发生，依据《中华人民共和国献血法》、《医疗机构临床用血管理办法》、《临床输血技术规范》及相关国际输血协会（ISBT）最新推荐标准，结合2025年临床输血技术发展现状，特制定本规范指南。本指南旨在为各级医疗机构输血科（血库）及临床护理提供标准化、可落地的操作依据。1.2适用范围本指南适用于各级各类医疗机构开展临床输血治疗的部门，包括输血科（血库）、检验科、开展输血治疗的临床科室及相关护理人员。所有涉及血标本采集、运输、接收、检测及血液发放的人员必须严格遵循本指南。1.3核心原则交叉配血与血型复核必须遵循“安全第一、标本唯一、操作规范、结果可溯”的原则。严格执行双人核对制度，确保从标本采集到血液输注的全链条无误。对于任何可疑结果，必须坚持“先复查、后定论，不查明原因不发血”的处理原则。2.术语与定义2.1血型复核指在既往血型鉴定记录的基础上，对患者再次进行ABO血型和RhD血型的确认试验。复核旨在排除标本混淆、既往记录错误、患者血型变异（如疾病或移植导致）或抗体干扰等因素，确保当前血液制品的选择准确无误。2.2交叉配血试验指检测受血者（患者）血清（或血浆）与供血者红细胞，以及受血者红细胞与供血者血清之间是否存在不相合的抗原抗体反应。主要分为主侧配血（受血者血清+供血者红细胞）和次侧配血（受血者红细胞+供血者血清）。2.3紧急非同型输血在危及生命的紧急情况下，无法获得同型血液时，依据特定规则输注O型红细胞或AB型血浆的应急措施。此类操作必须经过严格的审批流程，并在后续补充同型血液。2.4自身对照指将受血者自身的红细胞与自身的血清（血浆）进行反应，用于鉴别溶血反应、自身抗体存在与否及标本状态是否异常的重要对照试验。3.标本采集与处理规范3.1采集前准备3.1.1患者身份识别：必须使用两种以上患者身份识别方式（如姓名、住院号、身份证号、腕带二维码等），严禁仅以床号或房间号作为识别依据。3.1.2告知与评估：采集前应向患者解释采血目的，评估患者穿刺部位皮肤状况及血管条件。对于右旋糖酐、聚维酮碘等可能影响血型鉴定的药物使用史，应在申请单上注明。3.2采血管要求3.2.1必须使用含抗凝剂（通常为EDTA-K2）的真空采血管。3.2.2标签必须包含以下信息：患者姓名、性别、年龄、住院号/门诊号、床号、采血日期和时间、采血者签名。3.2.3严禁在贴错标签的试管上涂改或覆盖标签，必须重新采集。3.3采集操作流程3.3.1严格遵循无菌操作规程，消毒范围直径不少于5cm，待干后穿刺。3.3.2采集血量：成人不少于3ml，婴幼儿不少于1.5ml，确保抗凝充分，防止凝固。3.3.3采集完毕后，轻轻颠倒混匀5-8次，避免剧烈震荡导致溶血。3.4标本运送与接收3.4.1标本应密封放置于专用标本转运箱，严禁人工手持裸管运送。3.4.2运送温度需控制在2-25℃，防止冻结或高温降解。3.4.3输血科接收标本时，必须逐项核对申请单与标本标签信息的一致性。对溶血、脂血、凝块、标本量不足或标签模糊的标本，必须予以拒收并记录原因，重新采集。3.5标本时效性管理3.5.1常规配血标本有效期：自采集时起，成人不得超过3天；婴幼儿由于免疫系统尚未成熟，有效期可适当延长，但建议不超过7天，具体视医疗机构内部质控标准而定。3.5.2若患者近期有输血史或妊娠史，或者正在接受免疫治疗，标本有效期应缩短至24小时以内。4.血型鉴定与复核规范4.1ABO血型复核4.1.1正定型（红细胞定型）：使用单克隆抗-A、抗-B血清试剂。4.1.2反定型（血清定型）：使用已知A1、B、O型试剂红细胞。4.1.3操作方法：推荐采用试管离心法或微柱凝胶卡法。2025版指南强调微柱凝胶法在标准化和结果判读上的优势，但在紧急情况下及疑难血型分析时，试管法仍不可或缺。4.2RhD血型复核4.2.1常规使用IgG抗-D血清进行定型。4.2.2若初筛结果为阴性，必须进行RhD阴性确认试验（排除Du型或弱D型）。对于弱D表型供血者，按RhD阳性处理；对于弱D表型受血者，按RhD阴性处理，但应建立特殊档案。4.3结果判读规则ABO血型复核必须严格遵守正反定型一致原则。下表详述了血型鉴定结果的判读标准及异常情况处理：受检者红细胞与抗血清反应受检者血清与试剂红细胞反应判读结果备注与异常处理抗-A(+)抗-B(-)A1细胞(-)B细胞(+)A型若正反不符，需进一步排查亚型、抗体干扰或标本问题。抗-A(-)抗-B(+)A1细胞(+)B细胞(-)B型若凝集强度<2+，需考虑亚型或抗原减弱。抗-A(+)抗-B(+)A1细胞(-)B细胞(-)AB型常见亚型如A2B、AxB等需通过吸收放散试验确认。抗-A(-)抗-B(-)A1细胞(+)B细胞(+)O型需排除冷凝集素或自身抗体导致的假阳性。抗-A(+)抗-B(+)A1细胞(+)B细胞(-)未定型正反不符，严禁发血，必须进行疑难血型鉴定。4.4血型复核特殊情况处理4.4.1正反定型不符：首先检查标本状态，重复试验。若仍不符，需进行自身对照、抗体筛查、吸收放散试验等。4.4.2亚型鉴定：如怀疑A亚型（A2,A3,Ax等）或B亚型，应送至高级实验室或参考实验室进行确认。4.4.3类B抗原或获得性抗原：某些革兰氏阴性杆菌感染或肠道菌群失调可能导致红细胞获得类B抗原，此时反定型往往正常，需结合临床病史综合判断。5.不规则抗体筛查与鉴定5.1筛查时机与意义5.1.1凡申请输血的患者，在交叉配血前必须进行不规则抗体筛查。5.1.2筛查旨在检测ABO血型系统以外的意外抗体（如Rh、Kell、Kidd、Duffy、MNS等系统抗体），这些抗体是引起溶血性输血反应的主要原因。5.2筛查方法5.2.1试剂：必须使用含有I、II、III号筛选细胞的试剂盒，这三个细胞的抗原谱涵盖了临床常见的有临床意义的抗原表型。5.2.2技术：推荐使用抗球蛋白法（IAT）或微柱凝胶法。该方法能检测出IgG类不完全抗体。5.2.3温度：必须在37℃条件下进行孵育，以避免冷凝集素的干扰。5.3抗体鉴定流程5.3.1若抗体筛查阳性，需使用包含10-16组已知抗原表型的谱细胞进行抗体鉴定。5.3.2根据抗体与谱细胞的反应格局，对照抗原谱表，分析抗体的特异性。5.3.3若存在多种抗体，应依据反应强度和排除法逐一确定。5.4抗体特异性与临床意义表抗体特异性临床意义(HS=高/有临床意义;NS=无/低临床意义)输血策略抗-DHS输注RhD阴性红细胞。抗-KHS输注K抗原阴性（K-）红细胞。抗-E,抗-c,anti-CHS输注相应抗原阴性的红细胞。抗-Fya,抗-FybHS输注相应抗原阴性的红细胞。抗-Jka,anti-JkbHS输注相应抗原阴性的红细胞。抗-MNS(通常为冷抗体)若在37℃有反应，应输注抗原阴性红细胞；仅室温反应可忽略。抗-Lea,anti-LebNS通常为冷抗体，一般不需特殊配血。抗-P1NS极少引起溶血，常规配血即可。6.交叉配血试验实施细则6.1配血方法选择6.1.1盐水介质法：仅用于检测IgM类天然抗体（如ABO血型不合），不能检测IgG抗体，严禁单独使用盐水法作为交叉配血的最终依据。6.1.2聚凝胺法（MPT）：操作简便、灵敏度高，能检测大多数IgG抗体，但可能漏检Kell系统抗体。若患者有输血史或妊娠史，建议结合抗球蛋白法。6.1.3抗球蛋白法（IAT）：检测不规则抗体的“金标准”，灵敏度高，特异性强。6.1.4微柱凝胶卡法：2025版推荐的首选方法。集离心、观察、结果判读于一体，标准化程度高，结果可长期保存。6.2微柱凝胶卡法操作规程6.2.1卡片准备：检查微柱凝胶卡外观，无破损、无气泡。在对应孔位标记患者及供血者信息。6.2.2样本制备：主侧：0.5-1.0%供血者红细胞悬液+50-100μl患者血清/血浆。次侧：0.5-1.0%患者红细胞悬液+50-100μl供血者血清/血浆。6.2.3孵育：将加样后的卡置于专用孵育器中，37℃孵育15分钟。6.2.4离心：将卡放入专用离心机，按照设定程序离心（通常为：加速阶段、低速阶段、高速阶段、减速阶段）。6.2.5结果判读：凝集块位于凝胶表面或中上部：阳性（+），表示配血不合。红细胞完全沉降至凝胶底部：阴性（-），表示配血相合。滞留在凝胶中部的少量红细胞：弱阳性（±），需进一步确认。6.3凝集强度判读标准为确保结果判读的一致性，采用以下标准记录凝集强度：评分凝集形态描述临床意义4+一个坚固的凝集块，背景清晰强阳性，绝对不合3+数个大凝块，背景清晰阳性，不合2+中小凝块，背景稍浑浊阳性，不合1+许多微小凝块，背景浑浊弱阳性，需结合抗体筛查判断±显微镜下可见数个红细胞凝集可疑，需复查0红细胞呈光滑纽扣状沉于孔底阴性，相合6.4配血不合的处理6.4.1主侧配血不合：立即停止配血，复查患者ABO血型及RhD血型。重新进行不规则抗体筛查及鉴定。若检出特异性抗体，筛选抗原阴性的供血者红细胞进行交叉配血。若为自身抗体阳性，需进行自身吸收试验后配血，或输注配合度相对最佳的血液。6.4.2次侧配血不合：多见于供血者血浆中含有针对患者红细胞的抗体（如O型血浆输给非O型患者）。若患者血浆中无意外抗体，可洗涤供血者红细胞（去除血浆）后再次配血。若仍不合，需更换供血者。7.血液发放与临床输注核对7.1血液出库标准7.1.1血液外观检查：无溶血、无凝块、无气泡、颜色正常。7.1.2标签完整：血袋标签清晰，包含血型、有效期、条码等信息。7.1.3交叉配血相合：配血报告单结果明确标注“相合”或“无凝集”。7.1.4时间控制：全血及红细胞离开冰箱后必须在30分钟内开始输注，4小时内输注完毕（如室温过高，应缩短时间）。7.2发放核对流程7.2.1医护人员取血时，必须携带取血箱及专用容器。7.2.2输血科发血人员与取血医护人员共同核对以下内容，并进行“双签名”：受血者姓名、性别、年龄、住院号、床号、血型。供血者血型、血袋编号、血液品种、血量、有效期。交叉配血试验结果。7.2.3核对无误后，双方签署《发血记录单》，血液方可移出输血科。7.3床旁输血核对7.3.1输血前，由两名医护人员（其中至少一人为注册护士）在患者床旁进行核对。7.3.2再次核对患者腕带信息、血型报告单、血袋标签，询问患者姓名（意识清醒患者）。7.3.3确认无误后，使用符合标准的输血器进行输注。7.3.4记录输血开始时间、结束时间、血液种类及血量，并密切观察患者反应。8.紧急抢救输血管理8.1紧急发血预案8.1.1急诊大出血患者，若血型未定，可立即抽取标本送检，同时发出O型红细胞（需为RhD阴性，若RhD阳性且库存不足，在紧急情况下可发RhD阳性O型红细胞）和AB型血浆。8.1.2必须填写《紧急特殊输血审批单》，经科主任或医疗总值班批准后方可执行。8.2未知血型患者的配血策略对于未知血型患者的紧急输血，按照下表策略执行：血液成分推荐血型RhD选择交叉配血要求备注红细胞O型RhD阴性优先若来不及，可主侧配血相合后发血（非同型输血）必须限量，一旦血型确定立即改回同型。血浆AB型不限无需交叉配血（因AB型血浆不含抗-A、抗-B）输注前需确保红细胞制品已配血。血小板最好同型不限单采血小板通常要求ABO同型，紧急时可RhD阴性血浆置换或输注O型单采血小板O型血小板血浆中含抗-A抗-B，可能引起溶血，需注意。8.3大量输血方案（MTP）对于预计出血量超过自身血容量20%或输血速度超过150ml/min的患者，启动大量输血方案。建议红细胞、血浆、血小板的输注比例维持在1:1:1至2:1:1之间，并在输血过程中每2-4小时复检一次血气分析、凝血功能及血常规，根据检测结果调整血液成分的补充。9.质量控制与记录追溯9.1室内质量控制（IQC）9.1.1试剂质控：每日开瓶前，必须对每批新的抗血清、试剂红细胞进行效价和特异性测定，符合说明书要求方可使用。9.1.2设备质控：每日对离心机进行转速/时间校准，对孵育箱进行温度校准，对微柱凝胶卡系统进行光路检测。9.1.3质控品：每批次实验应包含阳性对照（已知抗体+抗原阳性细胞）和阴性对照（无抗体/抗原阴性细胞）。9.2室间质量评价（EQA）9.2.1必须参加国家卫生健康委临床检验中心或省级临床检验中心组织的输血相容性检测室间质评。9.2.2对于质评回报结果不合格的项目，必须立即查找原因，制定整改措施，并记录整改效果。9.3信息管理与追溯9.3.1所有血型、配血结果必须实时录入实验室信息系统（LIS）和医院信息系统（HIS）。9.3.2实现血液从入库、出库、配血到输注的全条码管理。9.3.3实验记录保存期不得少于10年，输血相关文书（如配血报告单、发血记录单）需随病历永久保存。10.安全防护与废弃物处理10.1生物安全防护10.1.1所有接触血液标本的人员必须穿戴个人防护装备（PPE），包括手套、口罩、工作服、护目镜等。10.1.2禁止在实验室内饮食、化妆或存放个人物品。10.1.3发生职业暴露（针刺伤、黏膜接