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文档简介
专题14现代生物科技专题
(45分钟100分)
1.(12分)(2019•江苏高考)为生产具有特定性能的a-淀粉酶,研究人
员从某种海洋细菌中克隆了a-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因
工程大量制备淀粉醐,实验流程见图。请回答下列问题:
⑴利用PCR技术扩增淀粉酣基因前\需先获得细菌的o
⑵为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的端加
上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,
主要目的是o
⑶进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项
中的设定与引物有关,的设定与扩增片段的长度有
关。(填序号)
①变性温度②退火温度③延伸温度
④变性时间⑤退火时间⑥延伸时间
(4)如图表示筛选获得的工程菌中编码。-淀粉酶的mRNA的部分碱基序
列:
5"-kUGCCAUCAACAAAUACUAACQlJ……-3,
图中虚线框内mRNA片段包含个密码子,如虚线框后的序列未知,
预测虚线框后的第一个密码子最多有种c
⑸获得工程菌表达的a-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度
为设的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如下:
缓冲50mmol/L50mmol/L50mmol/L
液Na2HPO4-KH2PO4Tris-HClGly-NaOH
10.10.
pH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.5
05
酶相
68.63.41.20.
对活25.440.249.863.270.195.599.585.3
1758
性%
根据上述实验结果,初步判断该0-淀粉酶活性最高的条件为
【解析】:(1)在提取目的基因时,需获得细菌的全部基因,所以应获得
它的基因组DNA。(2)在PCR技术中,在耐高温的DNA聚合酶的作用下,
从引物的3'端延伸DNA链,限制性酶切位点相关序列应加在引物的5,端,
而且两种引物的5'端加的限制性酶切位点是不同的,这样可以保证通过
PCR技术获得的目的基因两端具有限制醐切割的序列,将来切割后形成的
黏性末端不同,优点是保证DNA片段能定向插入表达载体,并减少自连
和自身环化现象。(3)进行扩增时,退火温度的设定与引物有关,引物中
C、G碱基比例越高,退火温度越高;延伸时间的设定与扩增片段的长度有
关,因为扩增片段越长,复制的时间越长。(4)图中虚线框内mRNA片段
从起始密码子AUG开始计数,相邻的3个碱基为一个密码子,其中应有8
个密码子,虚线框后的第一个密码子以U开头,根据其后两个碱基计算
得16种,但除去3种终止密码,则最多有13种密码子,因为虚线框后
不可能为终止密码。(5)分析可知,酶活力最高的环境条件是pH为8.5,
缓冲液为50mmol/LTris-HClo
答案:(1)基因组DNA
⑵5'使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连
⑶②⑥(4)813
(5)pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTris-HCl
2.(16分)(新题预测)“紫薯”外观艳丽、富含花青素,有清除体内自由
基、抗癌防老等保健功效。研究人员通过现代分子技术手段,克隆了控
制紫薯的着色基因乩。回答下列问题:
⑴获取基因BL的方法之一是利用PCR技术扩增大量的DNAo此方法使用
的DNA聚合酶与生物体内的DNA聚合酶相比,最主要的特点是
。PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是
(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。
如表为根据模板设计的两对引物序列,如图为引物对与模板结合示意图。
请判断哪一对引物可采用较高的退火温度:o理由是
引物对序列表
PlAACTGAAATGTAGCTATC
引物对A
P2TTAAGTCCATTACTCTAC
SIGTCCGACTAGTGGCTGTG
引物对B
S2AGCTGGCGTTTAGCCTCG
»-引物对
!DNA
加.模板
DNA
模板一川川川川川川川II川川।川川川川।川।川川
引物对与模板结合示意图
⑶若想将着色基因导入另一植物中获得红色果实,可将获取的BL基因
插入Ti质粒上,通过农杆菌的转化作用将目的基因导
入植物的体细胞,获得能稳定遗传和表达的转基因植株,依据是
(4)若要检测目的基因是否转录出了mRNA,需从转基因植株中提取mRNA,
用作探针与mRNA杂交,若则表明
目的基因转录出了niRNA。
【解析】:(l)PCR技术使用的是热稳定DNA聚合酶(Taq酶),PCR技术能
把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是DNA双链复制。
⑵引物对B中G/C含量较高,可采用较高的退火温度。
(3)将获取的目的基因插入Ti质粒T-DNA上,T-DNA可转移至受体细胞并
整合到受体细胞染色体的DNA上。
(4)若要检测目的基因是否转录出了mRNA,需从转基因植株中提取mRNA,
用标记的目的基因作探针与mRNA杂交,若出现杂交带则表明目的基因转
录出了mRNAo
答案:(1)耐高温DNA双链复制(2)引物对B
引物对B中G/C含量较高,可采用较高的退火温度
(3)T-DNAT-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上
⑷标记的目的基因出现杂交带
【知识总结】:目的基因的检测与鉴定
⑴检测目的基因是否导入受体细胞:DNA分子杂交技术。
⑵检测目的基因是否转录出mRNA:分子杂交技术。
⑶检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原-抗体杂交技术。
(4)个体生物学水平鉴定:根据表达性状判断。
3.(12分)印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让
家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示:
对印度沙产下印
漠猫进行度沙漠
催情处理收集猫幼仔
精液
(1)步骤甲、乙分别是指,O
(2)诱导超数排卵所注射的激素是,只能作用于
⑶受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于(填
“培养液”或“受精卵”)。
⑷步骤甲使用的培养液为或专用的受精溶液。
【解题指导】:(1)题干关键词:印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物、胚胎
工程技术、让家猫代孕而繁育。
⑵根据图中超数排卵和收集精液一步骤甲是体外受精一早期胚胎培养
一步骤乙是将早期胚胎移植到同期发情处理的家猫子宫中。
【解析】:本题主要考查体外受精、早期胚胎培养与胚胎移植技术。步
骤甲是指受精作用,步骤乙是指胚胎移植;诱导超数排卵所注射的激素是
促性腺激素,只能作用于性腺细胞;受精卵发育成早期胚胎所需营养主要
来自受精卵;受精过程使用的培养液是获能溶液或专用的受精溶液,与早
期胚胎培养液不同。
答案:(1)受精作用胚胎移植
⑵促性腺激素性腺细胞
⑶受精卵(4)获能溶液
4.(10分)曾经分布于东、中非地区的北部白犀数量已仅存五头,世界上
最后一只幸存的雄性北部白犀“苏丹”已经被切除犀角。雌性北部白犀
每3年生产一次,每胎仅产1仔。为使这一种群数量恢复,可采用现代
生物工程技术提高北部白犀的生育效率。请回答:
⑴精子采集的方法包括假阴道法、手握法和法,体外受精前对
精子进行一定处理,使其o
⑵卵母细胞采集时,用促性腺激素对供体雌白犀处理后,从中
冲取卵子,此卵子_______(填“能”或“不能”)直接与⑴题中处理后
的精子在体外受精。
(3)体外受精后,应将受精卵移入液中继续培养。
⑷为取得同卵双胎或多胎,可以在胚胎发育的期用机械方
法将胚胎分割。具体操作是用分割针将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,
注入预先准备好的中。
⑸胚胎能成功移植到受体子宫中,原因之一是受体子宫对外来胚胎基本
上不发生_______________反应,为胚胎的存活提供了可能。
【解析】:(1)精子采集方法包括假阴道法、手握法和电刺激法,精子需
要获能处理后与卵子受精。
⑵卵母细胞采集时,用促性腺激素处埋后,从输卵管中冲取卵子,能直
接与⑴题中处理后的精子受精。
⑶体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养。
⑷桑根胚和囊胚的内细胞团细胞具有全能性,故选取该时期的胚胎进行
分割可以得到多个胚胎。具体操作是用分割针将胚胎切开,吸出其中的
半个胚胎,注入预先准备好的空透明带中。
⑸受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,为胚胎的存活提供
了可能。
答案:(1)电刺激获能(2)输卵管能
⑶发育培养(4)桑棋胚(或囊胚)空透明带
⑸免疫排斥
5.(12分)(2019•长沙一模)我国全面放开二孩政策已正式实施。一些高
龄产妇希望通过试管婴儿技术圆二胎梦。请回答以下相关问题:
⑴由于女性的自然周期产生的卵子太少,在取卵前通常需要注射促性腺
激素,而不通过服用雌激素来直接促进更多的卵泡发育,原因是
⑵在体外受精前,医生借助超声波探测仪等工具用吸卵针从某女士卵巢
中吸取卵母细胞;随后将取出的卵母细胞置于与相似
的环境中,让它进一步发育成熟。受精过程中,精子顶体内含有的顶体
酶能协助精子穿过卵子的,最终进入卵子内完成受精
作用。
⑶胚胎的早期培养与动物细胞培养一样,都需要满足
_______________________________________及营养等条件。
⑷若做试管婴儿的夫妇中,妻子患有线粒体疾病(线粒体DNA缺陷),丈
夫正常,则子女患病情况为o若要获得健康的孩子,
可通过特殊的设计试管婴儿技术即“三亲婴儿”(医生要去除女性捐赠者
卵子中的细胞核,接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之,最后
再按照标准的试管婴儿技术进行培育)。“三亲婴儿”的获得过程,除运
用胚胎工程的技术手段外,还要特别运用技术。
【解析】:(1)在下丘脑、垂体、卵巢分级调节中,当雌激素含量增多,
会通过负反馈调节,抑制卵巢的发育。因此需要注射促性腺激素,来促
进卵巢的发育。
⑵生物体内卵母细胞发育成熟的场所为输卵管,因此体外获得的卵母细
胞也应置于与输卵管相似的环境中,让它进一步发育成熟。顶体酶能够
溶解卵丘细胞之间的物质,形成精子穿越放射冠的通路;随后顶体酉每能将
透明带溶出一条孔道,精子借自身运动穿越透明带。
⑶胚胎的早期培养与动物细胞培养一样,需要满足无菌无毒的环境、适
宜的温度和pH、相应的气体环境(O2与COJ及营养等条件。
⑷受精作用时,受精卵中的线粒体来自母本,而母本患有线粒体疾病,
因此子女全患病。去除女性捐赠者卵子中的细胞核,接着用母亲卵细胞
中对应的遗传基因取而代之,属于动物细胞核移植过程。
答案:(1)过量的雌激素会通过负反馈调节影响卵巢的发育
⑵输卵管放射冠和透明带
⑶无菌无毒的环境、适宜的温度和pH、相应的气体环境
(4)全患病动物细胞核移植
6.(16分)(2015•全国卷II)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是
一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸
变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质出)不但
保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:
⑴从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的
进行改造。
⑵以P基因序列为基础,获得Pl基因的途径有修饰___________基因或
合成—
基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的
全部内容包括的复制;以及遗传信息在不同分子之间的流
动,即:
⑶蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功
能出发,通过和,进而确定相对应的脱氧核
甘酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对
蛋白质的生物进行鉴定。
【解析】:本题考查蛋白质工程和中心法则的相关内容。
⑴蛋白质Pl是由蛋白质P改变了两个氨基酸序列得到的,故若要改变蛋
白质的功能,可以考虑对蛋白质的氨基酸序列进行改造。
⑵R基因可以在P基因的基础上经修饰改造而成,也可以根据氨基酸序
列用化学方法合成。中心法则的内容为:
复翻译
制蛋白质
包括DNA的复制,RNA的复制,遗传信息由DNA-RNA、由RNA-DNA、由
RNA->蛋白质五个过程。
⑶蛋白质工程的基本途径是:从预期的蛋白质功能出发一设计预期的蛋
白质结构一推测应有的氨基酸序列一找到相对应的脱氧核昔酸序列(基
因)。该基因表达后得到相应蛋白质,蛋白质是否符合我们的设计要求,
还需要进一步对蛋白质的生物功能进行检测与鉴定。
答案:(1)氨基酸序列(或结构)
⑵PPiDNA和RNA(或遗传物质)
DNA-RNA、RNA-DNA、RNA一蛋白质(或转录、逆转录、翻译)
⑶设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能
7.(12分)(2017•海南高考)甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片
和白色花瓣为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题:
(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件下进行组织
培养,均能获得试管苗,其原理是
⑵甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中,均加入一定量的蔗糖,
蔗糖水解后可得到o若要用细胞作为材料进行培养获得幼
苗,该细胞应具备的条件是(填”具有完整的细胞核”“具
有叶绿体”或“已转入抗性基因”)o
⑶图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由
培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是。A中的愈
伤组织是叶肉细胞经_________形成的。
(4)若该种植物是一种杂合体(子)的名贵花卉,要快速获得与原植株基因
型和表现型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,
(填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为
外植体,原因是
【解析】:(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件
下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是绿色叶片和白色花瓣的细
胞具有全能性,在一定条件下能发育成完整的植株。
⑵甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中,均加入一定量的蔗糖,
蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖,若要用细胞作为材料进行培养获得幼
苗,该细胞应具备的条件是具有完整的细胞核,因为细胞核是遗传信息
库,是细胞代谢和遗传的控制中心。
(3)A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是力培养
基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是细胞分裂素和生长素,
二者对于根和芽的形成具有重要调节作用,二者的用量比例影响根和芽
的发育顺序。A中的愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的。
⑷若该种植物是一种杂合体(子)的名贵花卉,要快速获得与原植株基因
型和表现型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,由
于对杂合体(子)植株来说,其体细胞的基因型相同,而花粉粒的基因型
与体细胞的基因型不同,用花粉粒进行组织培养得到的花
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