心脏标志物检验

1、第一部分概述了第二部分中心脏标志物的确定，第三部分中心脏标志物的选择和评价，第一部分概述了心脏是人体最重要的器官之一，它和血管构成人体的血液循环系统。它负责运输氧气、二氧化碳、营养物、中间代谢物、激素和其他物质。急性心肌梗死是最常见的疾病之一，发病率逐年上升。急性心肌梗死的早期诊断对治疗非常重要。心脏的结构和功能心脏分为左心和右心，由房间隔和室间隔隔开。左心室主动脉毛细血管下腔静脉右心房(体循环)。右心室肺动脉肺泡毛细血管肺静脉左心房(肺循环)。心内膜心内膜下平滑肌心肌纤维(分为内纵、中、外斜三层)间皮(表层)心外膜(心包的内脏层，结构为浆膜)薄层结缔组织壁层和心包腔之间的内脏层。心脏疾病的诊

2、断技术包括物理诊断(心电图、超声心动图、核素心血管造影、CT等)。)和化学诊断(酶标记和蛋白质标记的测定等。)。血液生化检查为缺血性心脏病的诊断和治疗提供了重要的实验室依据。急性心肌梗死是心脏疾病中的主要疾病，发病率和死亡率高，早期诊断困难。1969年，世界卫生组织规定，急性心肌梗塞的诊断必须符合以下两项要求：1 .典型病史和长期胸痛；2.心电图明显改变；3.异常心肌酶。然而，也有一些急性心肌梗死患者缺乏典型的胸痛症状，临床上称为无症状急性心肌梗死。此外，还有一些急性心肌梗死患者的心电图检查没有发现特定的Q波。病理检查显示坏死病变不涉及心脏外层，临床上称为心内膜下梗死。血清酶的动态变化对急性心

3、肌梗死的诊断有特殊价值。然而，酶标记也有一些缺点，如特异性差。新生化标志物心肌肌钙蛋白的应用提高了急性心肌梗死诊断的敏感性和特异性。心脏损伤时心脏标志物和异常血液生化标志物的测定是急性心肌梗死的主要诊断标准之一，多年来一直受到临床医生的重视。一般认为，反映急性心肌损伤的理想生化标志物应具有以下特征：高心脏特异性；心肌损伤迅速增加。增长持续了很长时间。易于检测；测试结果可快速获得(1小时内)；其诊断价值已被临床证实。到目前为止，还没有完全符合上述要求的标记。酶标记物心脏标记物蛋白质标记物，LDH和同工酶CK和AST，心肌肌钙蛋白肌红蛋白，1。20世纪50年代，酶标记物乳酸脱氢酶、谷草转氨酶和血红

4、蛋白脱氢酶被用于急性心肌梗死的诊断。在20世纪60年代，CK在急性心肌梗死的诊断上更为明确。在20世纪70年代，CK-甲基溴和低密度脂蛋白H1被发现比上述总酶更特异。它被认为是诊断急性心肌梗塞的“黄金标准”。(1)急性心肌梗死时血清心肌酶活性变化的机制。心肌酶的释放速率心肌缺血导致能量代谢紊乱、三磷酸腺苷生成减少、离子泵功能障碍和不能维持细胞内外渗透压平衡，导致细胞肿胀，尤其是Ca2进入细胞，增加膜孔和酶从细胞中逃逸。影响酶释放的主要因素有：心肌细胞内外酶浓度的差异；酶在心肌细胞中的定位和存在形式；酶蛋白分子的大小。心肌酶在细胞间隙的分布和心肌酶的转运通过两种途径进入血液：直接进入毛细血管进入

5、血液；(2)释放到组织液中，通过淋巴系统进入血液。(心肌损伤的主要途径)。3。血液中酶的清除血液中不同酶的清除时间不同，低密度脂蛋白H1半衰期为113小时，CK半衰期为15小时，CK-甲基溴半衰期为12小时。清除机制可能是：尿液排泄；肝脏或(2)急性心肌梗死的酶标记自1954年发现急性心肌梗死患者血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)升高，使AST成为诊断急性心肌梗死的第一个血清酶标记物，心肌酶的研究不断深入，血清乳酸脱氢酶(LDH)和同工酶、羟丁酸脱氢酶(HBDH)、肌酸激酶(CK)和同工酶(CK-MB)也相继应用于急性心肌梗死的诊断。肌酸激酶主要存在于骨骼肌和心肌细胞中，是由一个M亚基和一个H亚

6、基组成的二聚体，具有三种同工酶。CK-MM，CK-MB，CK-BB .心肌的CK-甲基溴活性是骨骼肌的5倍。CK-甲基溴的分子量为86000，一般在急性心肌梗塞发作后4 8小时上升，在12 20小时达到峰值。因为它比其他血清酶标记物上升和消失得更早，特别是它的特异性和灵敏度更高，自20世纪70年代初以来，它就被认为是诊断急性心肌梗死的“金标准”。乳酸脱氢酶是一个由两个亚单位(H和M)组成的四聚体，有五种同工酶。心肌细胞的乳酸脱氢酶主要是乳酸脱氢酶1。低密度脂蛋白H1活性增加可作为诊断心肌梗死的有用指标。LDH1在心肌梗死后24 48小时开始增加，2 4天达到峰值，8 9天恢复正常。低密度脂蛋白

7、h1/低密度脂蛋白H2比值 1.0是急性心肌梗死的一个具体指标，其持续时间可达半个月左右，尤其适用于就诊较晚的患者。天冬氨酸转移酶AST分布广泛，主要存在于肝脏、心脏、骨骼肌和肾脏。AST有两种同工酶，细胞质同工酶和线粒体同工酶。急性心肌梗死后68小时，血清中谷草转氨酶活性升高。AST-m酶出现时，心肌细胞损伤严重。一般来说，它会在5天内恢复正常。AST-m活性与心力衰竭的发病率和死亡率成正比。AST、LDH和CK的特异性比较(1)AST在心肌细胞中最丰富，但在其他器官中也大量存在，所以诊断特异性低。(2)乳酸脱氢酶分布广泛，特异性不高。乳酸脱氢酶1的电泳分析或血红蛋白脱氢酶活性的测定可以提高

8、乳酸脱氢酶的特异性。(3)心肌细胞CK含量仅次于骨骼肌。CK分子量小，主要存在于细胞质中。因此，当急性心肌梗塞发生时，CK比其他酶更早进入血液。在急性心肌梗死的诊断中，CK的假阳性率为10% 15%，AST的假阳性率为32%。(3)急性心肌梗死后心肌酶的时相变化血清酶活性升高的时间和急性心肌梗死中多种酶延迟的时间(小时)峰值活动时间(小时)维持天数多CK-MB3 816 241 420总CK4 1020 303 610 AST 4 1020 303 61 LDH 6 1230 607 146 AST-M8 124884，酶活性(参考值上限的倍数)、心肌梗塞后的时间(天)、急性心肌梗塞后不同时间

9、血清酶活性的变化、(4)心肌酶1的生理变化。男女性别CK明显不同，男性明显高于女性，因为CK主要存在于肌肉组织中，男性肌肉比女性更发达。2.老年新生儿的血清乳酸脱氢酶和CK是成人的2 3倍，并随着年龄的增长而逐渐降低，14岁时达到成人水平。儿童期低密度脂蛋白H1高于成人，正常儿童中低密度脂蛋白H1 低密度脂蛋白H2。3.剧烈运动会导致心肌酶升高。提升的程度与运动量和持续时间有关，也与锻炼者是否定期锻炼有关。(5)心肌酶的测定1。酶测定方法的方法学和发展通常经历三个阶段：(1)在20世纪50年代以前，主要使用“固定时间法”，即酶与底物相互作用一段时间后酶反应停止，酶催化的平均速度通过测量产生的产

10、物量或消耗的底物量来计算。20世纪50年代中期，随着生化自动分析仪的应用，临床实验室开始使用“连续监测法”来测量酶反应的初始速度，其结果远比“固定时间法”测量的平均速度准确。(3)自20世纪70年代以来，免疫技术取得了长足的进步。利用酶的抗原性，酶的质量直接由抗原抗体反应决定。测定结果分别以微克/毫升和微克/升报告例如，长时间使用压力脉冲带可以增加CK。溶血能显著增加乳酸脱氢酶。如果采血后血清没有及时分离，红细胞中的酶可以通过细胞膜释放到血清中。心肌酶在不同温度下的稳定性(活性变化小于10%)。酶在室温(25) (0 4)冰箱(-25)中以T3形式冷冻1周、1个月、1周、1周、1周、1周、1周

11、、1周、1 3天、1 3天、(6)参考范围和临床意义1。根据催化反应方向的不同，乳酸脱氢酶及其同工酶有两种类型的乳酸脱氢酶1测定方法。一种是国际临床化学协会(IFFC)推荐的，以丙酮酸为底物；另一个大集团使用乳酸作为底物，并在中国广泛使用。参考范围低密度脂蛋白：成人120 130微克/升(升磷法)，儿童140 260微克/升(升磷法)。乳酸脱氢酶同工酶：成人为14% 26%；乳酸脱氢酶229% 39%；乳酸脱氢酶320% 26%；乳酸脱氢酶48% 16%；低密度脂蛋白56% 16%；LDH 1/LDH 20.45 0.74；嘿。【临床意义】乳酸脱氢酶的升高主要见于急性心肌梗死、充血性心力衰竭和

12、心肌炎。它也见于病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、梗阻性黄疸、肌肉损伤、肌肉萎缩、一些恶性肿瘤(白血病、结肠癌等)。)。急性心肌梗塞时，乳酸脱氢酶在正常酶中增加最慢(8 10小时)，但最长(5 10天)，峰值达到正常上限的10倍。乳酸脱氢酶同工酶中乳酸脱氢酶1 乳酸脱氢酶2，持续两周(总乳酸脱氢酶在某些情况下是正常的)。CK:成年男性45 180微升(37)，女性25 130微升(37)，儿童75 540微升/LCK-甲基溴：10 25微升/CK-甲基溴/CK 5%。临床意义 CK及其同工酶是目前世界上临床试验次数最多的酶，20世纪80年代初统计分别达到1亿和1000万。这种酶试验主要用于急性心

13、肌梗死的早期诊断，判断溶栓治疗的疗效以及判断疾病的预后，特别是对无Q波的急性心肌梗死患者，当心电图无Q波改变时，往往需要其他检查来辅助临床医生对急性心肌梗死的诊断和鉴别诊断。在急性心肌梗死中，CK最早增加(4 8小时)，在24小时达到峰值，在2 3天恢复正常，并适度增加，通常低于3000 u/l。CK-MB是诊断急性心肌梗死的极其可靠的生化指标，特异性高达95%或更高，因为它在心肌组织中丰富，而在其它组织和器官中很少。一般认为，其敏感性略低于CK的总活动性，但也有报道称，约12.5%的急性心肌梗死患者总CK值较低，但CK-甲基溴高于正常值。天冬氨酸氨基转移酶过去常被称为GOT，现在通常被称为a

14、st。参考范围AST:0-40U/L临床意义以前，认为AST主要存在于心肌，主要用于诊断急性心肌梗死。然而，目前，由于急性心肌梗死中急性心肌梗死上升晚于CK，恢复早于低密度脂蛋白，因此急性心肌梗死的诊断价值越来越小。许多国外学者认为，超声心动图在急性心肌梗死的诊断中是完全意想不到的。血清心肌酶作为一种蛋白标志物的测定有助于急性心肌梗死的诊断，但仍存在许多不足。主要研究结果如下：1 .酶活性的增加出现较晚，这限制了急性心肌梗死的早期诊断。2.持续时间短，CK可以在急性心肌梗塞后3天恢复正常。3.特异性差，其他组织的损伤也会导致心肌酶的升高。然而，现在开发的蛋白质标记物，如肌红蛋白和肌钙蛋白，在急

15、性心肌梗死的诊断中明显优于酶标记物。(1)肌红蛋白(Mb)肌红蛋白是一种存在于心肌和骨骼肌细胞质中的色素蛋白，不存在于平滑肌中，分子量为17，500，半衰期约为15分钟。在急性心肌梗塞发作后1 4小时内，可检测到肌红蛋白在血液中增加，并在6 7小时内达到峰值。它是代表心肌损伤增加的最早的生化标记之一。肌红蛋白没有心肌特异性，但在心肌和骨骼肌中含量丰富。在急性心肌梗塞时，它能迅速释放到血液中，并具有很高的敏感性。因此，肌红蛋白阴性有助于排除急性心肌梗死的诊断。但是它的特异性很差。测定Mb的方法很多，主要包括免疫化学方法，如荧光免疫分析法、放射免疫分析法、酶联免疫吸附分析法和化学发光免疫分析法。(

16、2)心脏由于其高心肌特异性、对心肌损伤的高敏感性和长诊断窗期，cTnI已被国外临床医生和检查人员广泛接受，并逐渐取代CK-MB作为判断心肌损伤，尤其是AMI的“金标准”。肌钙蛋白(Tn)是横纹肌收缩的重要调节蛋白。它的分子是球形的，在血液中的半衰期大约是几个小时。它由三个子单元组成：1 .肌钙蛋白C(TnC):分子量18000，是一种钙离子受体，结合钙离子并激活肌丝。骨骼肌和心肌中的TnC是相同的。肌钙蛋白(TnI):的分子量为21000，是一种抑制性亚单位，广泛分布于心肌和骨骼肌。它有三种亚型：心肌肌钙蛋白(cTnI)和快、慢骨骼肌肌钙蛋白(sTnI)。3.肌钙蛋白T(TnT):的分子量为37，000，这可能是一种不对称的蛋白质结构，是原肌球蛋白的结合亚单位。TnT也有三种亚型：心肌肌钙蛋白T(cTnT)和快、慢骨骼肌亚型(cTnT)。在心肌细胞膜的完整状态下，cTnI和cTnT不能通过细胞膜进入血液循环，因此健康人的血液不含或含有非常少量的cTnI和cTnT。当心肌缺血和缺氧发生变性和坏死，细胞膜受损时，cTnI和cTnT扩散到细胞间质中，较早出现在外