肺癌分子靶向治疗

1、肺癌的分子靶向治疗靶向肿瘤治疗的基本概念随着生物技术在医学领域的迅速发展以及从细胞和分子水平对发病机制的深入了解，肿瘤生物治疗进入了一个新的时代。肿瘤分子靶向治疗是指利用具有一定特异性的载体，选择性地将杀死肿瘤细胞的药物或其他活性物质输送到肿瘤部位，从而在不影响正常细胞、组织或器官功能的情况下，尽可能将治疗效果或药物效果限制在特定的靶细胞、组织或器官，从而提高疗效，减少毒副作用的方法。所谓的“靶向治疗”是指靶向目标部位。在肿瘤分子治疗方面，是指对某一种癌细胞、某一种蛋白质或某一种癌细胞分子的治疗。它分为三个层次。第一个目标是某个器官。例如，某种药物只对某个器官的肿瘤有效。这叫做器官定位。第二种

2、叫做细胞靶向，顾名思义，是指只靶向特定类型的肿瘤细胞。进入体内后，药物可以选择性地与这些细胞特异性结合，从而导致细胞凋亡。第三种是分子靶向，指的是治疗肿瘤细胞中的一部分蛋白质家族，或核苷酸片段，或基因产物。分子靶向治疗是目前肿瘤治疗的“亮点”。由于其特异性和有效性，已取得巨大成功，目前是国内外治疗的“热点”。传统的化疗可以理解为“枪毙”，主要针对快速生长的肿瘤细胞。然而，除了肿瘤细胞，正常人体中的一些正常细胞生长和繁殖更快。例如，(1)血细胞由于其主动自我更新，也成为化疗药物的目标，因此白细胞减少、血小板减少、贫血等。会在化疗后发生。(2)毛囊细胞和粘膜细胞更新迅速，因此化疗后脱发、恶心和呕吐

3、是由化疗药物对毛囊细胞和粘膜细胞的攻击引起的。(3)肝细胞，称为体液化学场，代谢许多药物。因此，化疗也会导致严重的肝脏损伤。精子和卵子等生殖细胞也会受到化疗药物的攻击。因此，当靶向体内肿瘤细胞时，化疗药物将不可避免地对体内生长旺盛的正常细胞造成不同程度的损伤。这样，肿瘤细胞的破坏将导致体内许多细胞的“掩埋”，从长远来看，这只会造成“两种损失”。然而，当身体的免疫力被破坏时，肿瘤细胞必然会“上升”。因此，化疗的盲目性不利于肿瘤的长期治疗，也不是真正意义上的靶向治疗。类似地，诸如所谓的靶向化疗、靶向放射治疗、靶向手术、氩氦靶向和射频靶向的治疗不可避免地对正常组织具有大的损伤或不完全的治疗和问题。细

4、胞靶向疗法也被称为“导弹疗法”。它主要利用肿瘤细胞与正常细胞在生物学特性上的差异，具有高选择性，能够稳定、准确、严厉地打击肿瘤细胞。乳腺癌的RAAV-BA46/her2-DC/CTL是细胞靶向治疗的一个很好的例子。BA46在几乎所有的乳腺癌体细胞和细胞膜上表达，但在除乳腺以外的正常组织中不表达。用BA46抗原肽免疫转基因小鼠可以诱导转基因小鼠的特异性细胞免疫。它是一种非常理想的乳腺癌DC治疗的肿瘤抗原。腺相关病毒(AAV)由于其无致病性和与特定位点的整合，已成为人类基因治疗研究中最理想的病毒载体之一。重组rAAV-BA46表达载体的构建和高效价rAAV-BA46病毒的制备是通过以BA46为靶抗

5、原的DC基因转导治疗乳腺癌的有效方法。其他类似的治疗包括前列腺癌的rAAV-PSMA-DC/CTL，各种肿瘤的TIL和A-LAK等。这些细胞靶向疗法可以非常准确和有效地杀死肿瘤。分子靶向治疗是靶向治疗中最高水平的特异性。分子靶向治疗是一种全新的生物治疗模式，针对可能导致细胞癌变的环节，如细胞信号转导通路、原癌基因和肿瘤抑制基因、细胞因子和受体、抗肿瘤血管生成、自杀基因等，从分子水平上逆转这种恶性生物学行为，从而抑制肿瘤细胞的生长，甚至使其完全消退。它用于治疗肿瘤细胞中的蛋白质分子、核苷酸片段或基因产物。根据肿瘤细胞与正常细胞的区别，只有肿瘤细胞受到攻击，对正常细胞的影响很小，因此被称为“稳定、

6、准确、无情”。分子靶向治疗在临床治疗中地位的确立源于20世纪80年代以来的重大进展。主要成果如下：深入了解人体免疫系统、肿瘤细胞生物学和分子生物学；(2)DNA重组技术的进展；杂交瘤技术的广泛应用；(4)体外大容量细胞培养技术；(5)计算机控制生产过程和净化等。特别是，2000年人类基因组计划的突破已经成为在分子水平上理解有机体器官和分析和操纵分子DNA的另一个里程碑。它发展并衍生了一系列现代生物技术前沿：基因组学、蛋白质组学、生物信息学和生物芯片。此外，计算机虚拟筛选、组合化学和高通量筛选加速了分子靶向治疗新药的研究进展。1997年11月，美国食品和药物管理局批准利妥昔单抗治疗某些非霍奇金淋

7、巴瘤，这真正开启了肿瘤分子靶向治疗的序幕。自1997年以来，美国食品和药物管理局已批准了十多种肿瘤分子靶向制剂，并已用于临床实践，取得了良好的社会和经济效益。第二，肺癌靶向治疗的历史回顾(a)肺癌靶向治疗的胚胎阶段对肿瘤相关抗原的最早观察显然早于蛋白质化学的发展。1847年，本斯琼斯成为第一个认识到肿瘤相关抗原存在的人。布朗仅在1928年描述了现在所谓的易位激素综合征与促肾上腺皮质激素(ACTH)的肿瘤分泌有关。1929年，佐德克成为第一个证实人绒毛膜促性腺激素(HCG)可由正常和恶性滋养层细胞分泌的实验室研究。1932年，库欣发现了促肾上腺皮质激素。1938年，古特曼首次提出了前列腺癌和酸性

8、磷酸酶之间的关系。20世纪50年代开展的免疫分析是抗血清最早的应用之一，并促进了其他方面的发展。抗原包被的红细胞、牛奶颗粒和皂土被抗血清粘附。红细胞凝集素抑制素应用广泛。在1959年Yallow和berson提出放射免疫学观点之前，放射性核素氯胺t被用来追踪蛋白质。亨特和格林伍德提出，如果能够在体外证明这种抗体能够抑制肿瘤的产生，那么这种抗体是否能够应用于体内。综上所述，1847年本斯约姆斯发现的肿瘤相关抗原和1940年亨特提出的抗肿瘤抗原抗体是肺癌靶向治疗胚胎期的两个重要标志。(2)肺癌靶向治疗新理论的形成阶段1.靶向抗体的发现在1942年Gorner首次报道了抗肿瘤抗血清可以抑制动物体内的

9、肿瘤生长。这项研究工作早于人类对移植抗原的理解，并假设抗肿瘤抗血清不作用于肿瘤相关抗原，而是可能作用于肿瘤本身。这一假设后来被其他科学家证实。后来，人们还发现抗肿瘤抗血清的作用有限，并作用于某些肿瘤细胞。此外，一些研究已经观察到抗肿瘤抗血清也能刺激肿瘤生长。因此，将抗肿瘤抗体以“弹头”的形式附着在抗肿瘤载体上是合理和理想的。在体内，应用直接作用于肿瘤产物的抗血清可以预测其发展。1967年，当高斯和其他131碘标记抗体开始在肿瘤诊断和治疗中发挥作用。随着1965年Gold和Freenman发现癌胚抗原(CEA)，肿瘤标志物的研究也在加速。马赫等人使用天然抗血清的纯化来制备抗癌胚抗原抗血清。197

10、8年，Gold和Goldberg首次将131碘标记的多克隆抗血清和照相机用于免疫闪烁照相术。1980年，几个研究小组证实了人类肿瘤中存在癌胚抗原和人绒毛膜促性腺激素抗体，并在体内表达相应的抗原。这些研究已经证明，肿瘤中抗体的含量相对较低，并且这些抗体保持循环。如果抗体直接作用于肿瘤产物，并能在体内显示肿瘤的位置用于诊断，那么它是否能用于治疗就能引起人们的兴趣。事实上，开发新的和更有效的治疗方法的动机仅仅是为了确保在诊断领域可以预测更可靠的进展。在20世纪70年代末和80年代初，将各种细胞毒素与抗体结合以直接作用于肿瘤相关细胞的研究工作非常活跃。然而，研究工作也遇到了许多困难。非肿瘤组织的快速分

11、解代谢导致不利的药代动力学、不利的内吞作用、药物释放和抗原表达的异质性，这限制了药物抗体聚集体的功效。然而，临床前研究已经证实，药物抗体聚集的疗效仍然优于单一药物。20世纪80年代中期，药物抗体聚集的研究工作开始逐渐被忽视。这时，对脂质体靶向给药和脂质体聚合物靶向药物的研究开始兴起。2.发现非抗原靶向受体(1)碘和其他碘制剂早在1825年，当甲状腺机能亢进发生时，就证明甲状腺肿地区碘缺乏。20世纪30年代末从回旋加速器获得的放射性碘很快被应用于甲状腺问题。碘是第一种靶向介质，131碘是第一种靶向治疗介质。内分泌器官分泌的激素被输送到表达这些激素受体的器官，激素受体组织中发生的肿瘤继续表达这些受

12、体。已经发现许多化合物可以被某些癌症选择性地吸收。131碘标记的代谢碘代苯并鸟嘌呤可用于监测肾上腺髓质中的嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤和甲状腺癌。由于胰腺合成的酶来源于氨基酸，有人认为75Sr标记的硒蛋氨酸可以在胰腺中沉淀。也有一些有趣的复合物可以作为成像敏感物质在肿瘤中积累。这些物质包括染料，如氯二甲苯基蓝。当成像物质与抗体结合时，它就变成了一种聚合物。(2)酶抑制剂对肿瘤细胞分泌酶的研究由来已久。肿瘤细胞侵袭和转移到远处的能力表明它们分泌的酶能促进这一过程。癌细胞侵入组织，必须克服各种障碍，如压力、运动和细胞溶解酶的作用。肿瘤分泌的金属蛋白酶抑制剂通过降解胶原、层粘连蛋白、蛋白多糖和蛋白酶来消

13、除肿瘤细胞侵袭的物理屏障。(3)叶酸受体关于叶酸及其在细胞复制中的作用的知识始于1898年对蝴蝶翅膀上的蝶呤的研究。自1980年以来，越来越多的人开始关注叶酸受体，主要是叶酸受体对叶酸类似物如甲氨蝶呤的吸收作用。这些研究的主要贡献是证实叶酸在细胞中的积累以及叶酸依赖于这些受体的作用。叶酸通过载体蛋白进入细胞，如简化的叶酸载体或通过介导细胞内吞作用的叶酸受体。叶酸药物复合物可以通过叶酸受体进入细胞。当叶酸的羧基与药物共价结合时，与受体的亲和力保持不变，内吞作用继续。已经证明叶酸受体在许多人类肿瘤中过度表达，包括卵巢、肾脏、子宫、睾丸、脑和造血细胞的肿瘤。叶酸受体的高亲和力使其成为放射性药物的诱人

14、目标。显然，恶性肿瘤细胞不是唯一过度表达叶酸受体的细胞，正常细胞对叶酸的吸收限制了叶酸复合物的特异性。然而，叶酸受体是一种流行的无抗原受体，其灵活性可应用于靶向药物的开发。3.肿瘤血管系统作为靶向治疗靶点的发现20世纪初，人们已经认识到移植肿瘤的生长依赖于宿主的血液供应。1945年，Algire和Chalkey提出体内毛细血管内皮的生长是肿瘤细胞的特征，但是直到1971年Folkman发起的研究证实了血管生成因子的存在，这些观点才被接受。Folkman提出，当肿瘤直径为几毫米时，抑制血管生成可以阻止肿瘤生长。在未来，肿瘤血管的购买、其渗透性、肿瘤血流、血管生成因子和肿瘤血管生成抑制剂已经成为各

15、种研究的主题。肿瘤血管肌纤维的缺失是肿瘤对血管活性因子反应的重要因素。对新生血管抗原标记物、生长因子和受体的识别开辟了一个新的研究方向。肿瘤坏死是由缺氧和供血不足引起的。减少血流量会增加肿瘤坏死的数量。4.肿瘤坏死因子和肿瘤坏死因子诱导介体肿瘤坏死因子是由巨噬细胞和淋巴细胞在抗感染过程中产生的17KD蛋白。它在植入的小鼠肿瘤中介导出血性坏死。尽管肿瘤坏死因子对小鼠有抗肿瘤作用，但由于其在临床试验中副作用大，其临床应用受到限制。FAA，一种人造类黄酮，在抗试验小鼠的肿瘤中显示出活性，并且其活性可以通过联合注射白介素-2来提高。在人体内，无论白细胞介素-2是否存在，火焰原子吸收法都没有抗肿瘤作用。

16、据报道，非抗凝肝素和皮质类固醇C20酮组合的衍生物能明显抑制肿瘤血管生成。在乳腺癌患者模型中，葡聚糖衍生物已显示出显著抑制肿瘤血管生成。血管内皮生长因子，又称血管通透性因子，被证明是一种多功能细胞因子。后来发现，血管内皮生长因子可以直接作用于人工培养的内皮细胞，包括临时重组、改变细胞形状、细胞分裂、血管生成和增加血管通透性。(1)血管生成抑制剂20世纪90年代，发现了两种重要的血管抑制因子：血管抑素和内皮素。它们通过抑制血管内皮细胞的增殖来控制肿瘤的生长和转移。(2)微管蛋白结合剂多种微管蛋白结合剂可导致肿瘤血管损伤，秋水仙碱是应用的第一种微管蛋白结合剂。5.脂质体对脂质体的研究工作开始于20

17、世纪60年代末，尽管磷脂的扩散早在以前就已经进行了研究。早期的研究主要局限于脂质体作为蛋白质载体的潜在应用，包括酶载体。后来，他们转向作为药物载体的研究。脂质体长期以来被用作免疫佐剂药物。近年来，脂质结合的含氧甲基聚乙二醇与高碘酸盐氧化的小鼠抗人表皮生长因子受体结合可延长循环时间和标记免疫原性。然而，聚乙二醇包被的脂质体具有低免疫原性和显著延长的循环时间。6.作为靶向剂的大分子1975年，林德福提出可生物降解的水溶性聚合物可用于在癌症部位释放药物，随后是聚合物-药物复合物的真正发展。聚合物可以在癌症部位积聚的基本原理可以概括为两个方面：肿瘤血管的渗透性和淋巴的缺乏。1995年，西摩等人报道了分

18、子量为22-778 kD的可溶性缔合聚合物的作用。大于肾过滤分子的聚合物显示出进行性肿瘤积聚，在给药后50小时内肿瘤与肌肉的比例为(6-12): 1。7.多步瞄准系统的发现(1)抗体导向的酶前体药物治疗1987年，巴格肖首次提出抗体导向的酶前体药物疗法(ADEPT)。该方法是将药物包被在作用于肿瘤相关抗原的抗体中，然后将药物定位在肿瘤的酶中。这种用于将无毒前体药物转化为高毒性药物的靶向治疗方法称为抗体导向酶前体药物治疗。细胞毒性药物分子量低，比高分子量的抗体-酶复合物更容易在肿瘤中扩散，因此这种药物具有更好的旁观者效应。(2) vdet和GDEPTHuber等人在1991年提出通过病毒载体将相应的基因序列引入肿瘤细