生化基础的知识

1、。生物化学基础知识一、临床实验室生化检测的组成：生化试验主要包括生化试验、离子生化试验和血气试验。1.整个生化测试在生化分析仪上进行，这将在下一部分介绍。2.离子生化检测：主要是钾、钠、氯、二氧化碳等。检测方法如下：(1)火焰光度计：根据色谱理论测试，也用于基层医院。(2)离子分析仪：即电解质分析仪。(3)离子选择电极：附在全自动生化仪上的装置可以同时检测离子，相对独立于其他生化项目，互不影响，速度快。例如，贝克曼、日立7170和奥林巴斯2700都有离子分析设备。(4)酶检测：用酶试剂盒在生化仪上进行检测。3.血气检测：医院为抢救危重病人而购买的检测设备并不总是放在实验室里。仪器包括康宁、AV

2、L、阿布勒、新星等。二。生化分析仪概述(一)、生化检验程序主要步骤有：样品处理(稀释)、试剂添加、反应样品添加(加热显色)、反应产物检测(比色法、浊度法)、数据处理(报告)等。在自动生化分析仪出现之前，所有这些任务都是手工完成的。(2)、临床生化检测仪器的发展临床生化检测仪器的发展经历了三个阶段：分光光度计(手动比色法)、半自动生化仪和全自动生化仪。1.分光光度计：原则：光源单色仪吸收池探测器班长反应杯记录器在特定的波长和一定的浓度范围内，待测溶液的吸光度与待测溶液的浓度和液体层的厚度成：的比例A=bc :摩尔消光系数(常数)b:液体层厚度(比色杯厚度)C:待测液体的浓度定量方法：将标准溶液的

3、吸光度与待测溶液的吸光度进行比较，并计算含量。标准比较法：c标准c待测试=a待测试标准C多点校准A手动颜色比较功能：(1)、优点：对试剂质量要求低；分析成本低。(2)缺点：分析速度慢，不适合大规模临床试验；人工劳动强度大，效率低，偶然误差大；运输成本高，不利于试剂生产的规模化和标准化。2.半自动生化仪；半自动生化仪以分光光度计为基础，自动控制试剂添加、样品添加和比色过程，并自动计算和打印反应结果。长期以来，半衰期仪器是各级医院生化检测的主要设备。目前，全自动生化仪用于二级、一级以上医院的大规模检测，半衰期仪用于少数单项检测或夜间急救。许多品牌已经本地化。特点：A.对试剂的更高要求B.一些试剂的

4、分析成本相对较高C.分析速度相对较快D.减少人为错误3.自动生化分析仪：在半自动生化分析仪的基础上，结合计算机技术，实现了采样、试剂吸收和添加、样品预处理、样品分析和结果处理、设备清洗等步骤的自动化，克服了以往人工操作劳动强度大、效率低、意外误差大的缺点，大大加快了分析速度，提高了工作质量，满足了大规模临床检验的需要。优势：一、分析速度快，自动化程度高，精度高，准确度好分析成本相对较低易于实现标准化管理减少人为错误缺点：一、仪器成本高，一次性投资相对较高试剂的质量要求也很高三、自动生化分析仪的原理、组成和用途(一)、自动生化分析仪的功能和特点全自动生化分析仪模拟人工操作完成生化分析中的取样、加

5、试剂、混合、保温、比色、计算结果和写报告等步骤。它可用于分析和确定各种反应类型，如计时法和连续监测法。除一般生化项目外，其中一些还可用于测定激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物，以及测定酶免疫、荧光免疫等分析方法。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化和可追溯性。(2)自动生化分析仪的分类自动生化分析仪有许多分类方法，其中最常见的是根据其反应装置的结构进行分类。根据这种方法，自动生化分析仪可分为两类：移动式和离散式。所谓流动式自动生化分析仪，是指在同一管道中流动的过程中，同一测量项目的样品和试剂混合后的化学反应。这是第一代自动生化分析仪。过去，有许多通道的生化分析仪都指这一类。缺点是存在严重的

6、交叉污染，并且结果不准确，这已经被消除了。分离式自动生化分析仪与流动式自动生化分析仪的主要区别在于，待测样品与试剂混合后的化学反应在各自的反应盘中完成，不易交叉污染，结果可靠。(3)、自动生化分析仪的组成由于自动生化分析仪模仿人工操作的过程，无论哪种自动生化分析仪，其结构都类似于一些人工操作的仪器和设备，一般可以由以下几部分组成：1.样品装置：放置待测样品、标准品、质控溶液、空白溶液和质控溶液等。2.取样装置：包括稀释器、取样探头、输送样品和试剂的管道等。3.反应池或反应管道：通常，它充当比色杯(试管)。4.绝缘体：为化学反应提供恒温。5.检测器：如比色计、分光光度计、荧光分光光度计、火焰光度

7、计、电化学测试仪等。不同的仪器有不同的配置。6.微处理器：它是分析仪的计算机部分。仪器的所有动作和功能都受到控制，用户可以通过键盘与仪器“交谈”。同时，计算机还可以接收来自各个部件的反馈信号，做出相应的响应，并针对异常情况发出特定的指示信号。分析软件和分析结果通常存储在磁盘中，可以一起查询。7.打印机：可打印动态响应曲线和检验报告。8.功能监视器：显示屏，可检查反应状态、人机“对话”、当前仪器工作状态、分析结果等。(4)、移动式自动生化分析仪移动式自动生化分析仪可分为空气分段系统和非分段系统。前者是最典型的流量分析仪之一。1.空气分割系统该分析仪的特征在于，弹性样品管、空气管和试剂管(通常称为

8、“泵管”)被定量泵挤压，并且样品依次沿样品管连续抽吸和输送。另一方面，由空气管吸入的气泡将由相同原理吸入并在试剂管中连续流动的试剂分成均匀的段，并且样品流和试剂流在连续向前流动的过程中相遇、混合、渗透(如果需要的话)、保温、反应和被测量。整个分析过程是在液体在管道中连续流动的过程中完成的。2.非分段系统非分段系统通过试剂空白或缓冲溶液分离每个样品的反应溶液，因此在管道中连续流动的液体不会被分段。非分段系统可细分为流动注射系统和间隙系统。(5)、离散自动生化分析仪1.分立型是第二代自动生化分析仪。离散型和流动型的主要区别在于，待测样品与试剂混合后的化学反应在各自的反应盘中完成。2.离心式自动生化

9、分析仪，称为第三代自动生化分析仪，也应该属于离散型。因为在离心分析仪中，每个待测样品在离心力的作用下，在各自的反应罐中与试剂混合，完成化学反应，然后进行测量。离心分析仪属于“同步分析”。在离心力的作用下，每个待测样品几乎同时与试剂混合，反应并测量，然后生成报告；而其他分析仪是“顺序分析”，即每个待测样品依次与试剂混合，然后在反应后进行测量。3.袋式自动生化分析仪也应属于离散型，其中使用试剂袋而不是比色皿，并且在测定过程中，每个待测样品在其自身的试剂袋中进行反应和检测。4.“干式自动生化分析仪”也是一种分立型。其主要特点是采用固相化学技术，即试剂在薄膜或滤纸等载体上呈固相。在测定过程中，将一定量

10、的待测样品分布在测试条上，并在一定时间后通过反射光度计进行测定。离散自动生化分析仪是目前实验室广泛使用的全自动生化分析仪，一般可以选择任何测量项目，因此被称为可选自动生化分析仪。以下重点介绍可选的自动生化分析仪。(6)可选自动生化分析仪的主要部件1.样品添加系统(1)样品转盘或样品条：可放置几十个小样品杯。一些分析仪可以直接使用含有样本的试管，而其他分析仪还配备有条形码读取装置，该装置可以识别样本试管上的条形码信息，并且可以打印出患者的检测报告，而无需对样本进行编号或输入患者数据。(2)试剂仓：不同的分析仪试剂仓可容纳不同数量的试剂盒，一般可容纳20多种试剂。一些试剂仓库有制冷装置，带有条形码

11、识别装置的试剂仓库可以在任何位置放置试剂盒。如果采用多试剂分析方法，将占据试剂盒在试剂仓中的位置，减少测定项目的数量。(3)取样装置：一些分析仪共用相同的取样针进行取样和取试剂，内部分流阀控制取样和取试剂；有些仪器有两套取样装置，分别采集样品和试剂。取样针前端设有液位传感器，防止空气吸入或液体挂在取样针外壁，取样臂内设有预热装置。2.比色系统(1)光源：大多数分析仪使用工作波长为325 800纳米的卤钨灯。一些分析仪使用工作波长为285 750 nm的氙灯。(2)比色杯：有分立比色皿、分立旋转比色皿和离心比色皿。干式生化分析仪不需要比色杯，而袋式生化分析仪通过挤压试剂袋自动形成比色杯。比色杯的

12、光径为6-7毫米，少数为10毫米。反应杯中的反应溶液需要恒温，可以从37、30和25三个水平中选择，有些固定在37。它们大多采用吹入恒温空气的方式，也使用恒温水浴或半导体温控装置来保暖。为了保证比色杯中反应液的准确度为0.1，分析仪的环境温度必须保持在18 30，室温波动不得超过2。(3)、单色仪：(1)干涉滤光片(2)光栅(4)探测器：(1)光电倍增管(很少使用)。(2)阵列固态光电二极管。3.给排水系统自动生化分析仪中有许多供水管和电磁阀。只读存储器中的软件参数控制电磁阀和输液泵，为每个部件提供冲洗和抽吸，并最终将其排出机器。随机存取存储器中的分析参数控制电磁阀和注射器的步进电机，并提供样

13、品、试剂和稀释水。一些生物化学家也可以自动清洗试管，以便重复使用。4.数据处理系统每个项目的测试结果暂时存储在随机存取存储器中。在对样品所需的所有项目进行测试后，microcomp可以通过选择试剂室中预设试剂盒的一个或所有项目来测试每个样品。根据输入的指令，微机安排项目检测的顺序。一般情况下，先进行长孵育时间的终点法，再进行短监测时间的速率法，这样就可以恒速打印综合报告。当指定的样本进入待测位置时，微型计算机指示试剂盒进入试剂取样位置，取样系统根据被测项目的参数定量取样。同时，比色杯根据微型计算机的指令到达指定的取样位置。生化分析仪的分析速度与采样周期的时间有关。采样周期越短，分析仪越快。双试

14、剂法占用两个采样周期，分析速度减半。(8)可选自动生化分析仪的主要分析参数1.测试代码14。连续监控时间2.测试名称15。标准溶液的量3.测试方法16。标准溶液的浓度4.测试类型17。重复校准次数5.温度18。计算系数(F值)6.波长：你可以选择主波长和次波长。19.测量单位7.反应类型20。小数8.终点法21的零读数。衬底耗尽9.样本大小和稀释水量22。线性10.试剂剂量和稀释水量23。试剂吸光度的上限和下限11.样本空白24。线性范围12.孵化时间25。参考距离13、延迟时间26等等(9)可选自动生化分析仪分析参数的使用1.仪器制造商提供的测量项目(1)一些仪器公司自行生产常用项目试剂盒、

15、校准溶液(固定血清型标准溶液)和固定质控血清，并提供各种常用项目的分析参数供用户直接使用。此外，还有几十个空白项目参数表供用户自行开发新项目。(2)一些仪器公司不自行提供试剂盒，但有提供分析参数的合作试剂公司。因此，在购买仪器时，必须从指定的试剂公司购买一定数量的试剂盒(包括校准溶液和固定质控血清)。(3)有些仪器公司既不生产试剂盒也不与试剂公司合作，分析参数表为空，用户需要自行设计分析参数。但是，国内的代理商或试剂公司一般都提供他们的设计参数，有些参数往往是不合适的，所以用户应该逐一验证。2.自行设计和分析参数的原则如果仪器公司不提供分析参数或测定项目的方法不同，您可以自己设置分析参数。主要设计以下参数。1、样品试剂比例。6.计算因子(f值)。2.孵化时间。7.衬底耗尽的极限。3.延迟时间。8.线性度。4.监控时间。9.线性范围。5、试剂吸光度的上限和下限。通常会提供这些参数套件说明，可用于填写分析参数表。校准后，可以通过质量控制进行日常工作，一些参数将在以后的工作中逐步修改。四、几种主要品牌的自动生化分析仪1.日立自动生化分析仪由日本日立公司生产