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文档简介

1、病原微生物标本的采集、保存及运输方法为病原微生物标本的采集、标本采集种类血液标本(抗凝固和非抗凝固)呼吸道标本上呼吸道标本(咽拭子、鼻擦拭器、鼻咽提取物、咽液、痰液等)下呼吸道标本(呼吸道提取物、支气管冲洗液、胸腔液体积存、肺组织活检标本等)。 消化道标本(粪便和肛门擦拭器)尿标本其他人体标本(脑脊液、疱疹液、淋巴结穿刺液等)的尸体解剖标本采集介质和动物标本采集环境标本采集、病原微生物标本的采集, 标本采集中的注意事项采样时的生物安全的考虑采样时间和部位采样容器采样标本的标识各种标本的采样方法、病原微生物标本的采集、采样时的生物安全的考虑1 )相关的专业知识和操作技能掌握工作人员住院的病例的标

2、本,由医院的医疗人员掌握当地疾病对策机构的密切接触者的标本由当地疾病管理机构负责收集。 2具有与采集病原微生物样品所需的生物安全防护水平相符的设备,包括个人防护用品(隔离服、帽子、口罩、口罩、手套、防护眼镜等)、防护材料、器材和防护设施等3 )有有效防止病原微生物扩散和感染的措施4 )保证病原微生物样品质量的技术方法和手段。 病原微生物标本的采集、采集时间和部位时间:一般在怀疑细菌感染时应尽可能在使用急性发病期和抗生素前采集标本,进行细菌的分离培养,否则,该标本在分离培养时必须添加药剂拮抗剂。 病毒分离和病毒抗原检测的标本应在发病初期和急性期采集,届时病毒在体内大量繁殖,检出率高,因此病毒分类

3、标本最好在发病12天内采集。 部位:根据病菌患者在不同病期的体内分布和排出部位,采集不同标本。 例如,伤寒患者在发病初期不使用抗生素前要采血培养,23周不使用抗生素的2天后要采集粪便进行培养。 整个过程都可以进行骨髓培养。 病原微生物标本的采集、样品容器采集标本必须使用无菌容器、一个标本一个容器。 容器的基本要求是选择耐用的材料,包装容器后,可以防止泄漏。 能承受空中地面运输过程中可能发生的温度和压力的变化。 病原微生物标本的采集、样品标本的标识包括种类、原始样品容器、标本的性质、数量、承运人和收件人及其包装日期、运输日期、统一的识别号码和患者联系方式、姓名、检查目的、临床诊断等信息。 其他信

4、息包括患者信息(年龄、性别、完整地址)、临床资料(发病日期、临床症状、治疗史、可疑发病原因、抽样前是否使用抗生素)、急性或恢复期标本、症状与患者其他标本相似。 领取标本的实验室也要记录领取的日期和时间、领取标本的人的名字、标本的性质和状态等。 这些信息是说明检查结果所必要的。 病原微生物标本的采集、各种标本的采集方法(1)血液采集全血:血液病原培养时,用无菌穿刺法采集静脉血,转移到有无菌螺旋口的抗凝固容器或培养瓶中进行检查。 采集量为35毫升。 进行核酸检查时,抗凝固剂一般使用EDTA-K3或柠檬酸钠,不能使用肝素。 血清:用于检测IgM的血清一般在发病1个月内采集的用于检测IgG的血液应该采

5、集两次,第一次是发病初期(13天),越早越好,第二次的血液样本是恢复期(第一次采血后34周)。 同时测定两份血清,只有抗体滴度上升了4倍以上才有意义。 (2)粪便采集:必须采集急性腹泻期和用药前自然排出的粪便。 采集时使用灭菌棉擦拭器,多沾新鲜排泄的粪便脓血、黏液、水样便或稀便部分,采集量一般为35克。(3)咽拭子:使患者仰面开口,用舌板压住舌头,将无菌棉擦拭器放入口腔,适度用力擦拭咽后壁和两侧扁桃体部,放入装有3-5ml汉克s液的样品管中,在前端附近折叠棉签,拧紧管盖进行密封。 病原微生物标本的采集、各种标本的采集方法(4)肛门擦拭子:用棉擦拭子弄湿3-5ml汉克s液,从肛门周围的皱纹擦拭,

6、或在肛门口内轻轻旋转涂上后,插入装有3-5ml汉克s液的样品管内。 (6)疱疹液:可以同时采集多个疱疹作为标本。 首先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹的破裂涂上疱疹液,将棉签立即放入3-5ml汉克s液中,在前端附近折断棉棒,盖好箱盖进行密封。 例如,核酸检查用的标本采集咽擦拭器和肛门擦拭器等,核酸检查用不能使用棉擦拭器和木质擦拭器棒。 因为这样的材料含有核酸扩增抑制剂,所以请使用灭菌人造丝擦拭器或塑料棒。 病原微生物标本的采集、各种标本的采集方法(5)脑脊髓液:无菌条件下腰椎穿刺、无菌试管采集35ml (厌氧培养时将样品放入厌氧瓶),操作最好由医院内有经验的医生用腰椎

7、穿刺术进行。 (6)疱疹液:可以同时采集多个疱疹作为标本。 首先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹的破裂涂上疱疹液,将棉签立即放入3-5ml汉克s液中,在前端附近折断棉棒,盖好箱盖进行密封。病原微生物标本采集、禽流感环境标本采集样品液:使用ph7.47.6汉克s或eagles等培养液,提取以下抗生素和0.5%BSA(mem、EMEM、DMEM的使用价格也相对较高):样品液目前使用氨苄西林(:主要对g菌有较强抑制作用的链霉素(200 mg/L ) :主要对g菌对结核菌有抑制作用的两性抗生素B (2 x 106 IU/L) :主要是抗真菌作用庆大霉素(250 mg/L):广

8、域抗生素制霉素(0.5 x 106 IU/L )盐酸氧氟沙星:广域细菌很多肠杆菌科细菌等抗G-菌的抗菌活性磺胺异恶唑(0.2 g/L ),病原微生物标本的采集,禽流感环境标本的采集,1,水标本鸟类饮用水:在各笼旁边的饮水槽中采集饮用水标本,用无菌的、一次性的玻璃棒或棉棒充分地采集水槽中的水样用槽和池:清洗鸟类的污水:采集病原微生物标本,2,擦拭标本笼子表面擦拭标本:笼子表面鸟类最接触的35处(包括笼子底部),用带样品液的聚丙烯纤维头的擦拭子擦拭,擦拭后的擦拭子为5ml太阳也可以用多个擦拭器充分擦拭笼子表面,然后放入一个取样管中,屠宰或放置鸡肉砧板表面的擦拭标本。 把鸡肉屠宰或放置,使用不同的砧

9、板,可以采集擦拭标本放在不同的取样管中。 方法:与采集笼子表面擦拭标本的方法一样,擦拭子擦拭最接触部位,采集病原微生物标本,3、粪便标本从家畜舍和环境中采集5g左右新鲜鸟类粪便样品,放入含有5ml取样液的取样管中充分混合。 可以将同一地方的多个粪便标本放入同一取样管中。 4、其他标本笼带有周围标本(笼下的地面、笼的稻草等)内置的毛皮擦拭器等。 病原微生物标本的保存、总原则:根据标本的种类和检查内容决定标本的保存方式。 用于细菌检查的标本:需要无菌、抗生素的保存,确保目的细菌的生存,抑制其他微生物的过度生长。 通常在4c或室温下保存。 用于病毒检查的标本:一般不能放入保温容器(0C4C )中,放

10、置2天以上。 如果不能立即分离病毒,就必须冷冻保存标本。长期保存时,最好用-70C冷冻保存。 怀疑病原微生物标本保存、寄生虫时,在采集的粪便中加入10%福尔马林和PVA防腐剂(充分混合)。 用于检测抗原和抗体的标本,可以在4C8C、2428h、20c中保存更长时间。 检测出抗体的血清可以在4c保存约1周,最长必须用-20C冷冻10天以上。 病原微生物标本的保存、实验室必须对所有标本建立追踪系统。 该系统中必须严格注明标本的基本信息,如标签、标本的唯一识别码、采样日期、地点、采样等,患者的基本信息、临床诊断检查结果、实验室检查信息,如检查项目、时间和结果。 因此,可以随时知道标本的来源信息,追踪

11、原始来源。 病原微生物标本的包装、感染性材料的包装和运输必须遵循WHO感染性物质和诊断性标本的安全运输指南(WHO,1997 )。 标准的包装方法和材料,即使在运输中包装意外损坏,也能确保人员的安全和标本的完整性。 因此,搬运标本时要包装三层。 病原微生物标本的包装,原始容器防漏,可容纳容量在500ml以下。 在原始容器和第二层包装之间放置有吸附作用的材料。 辅助第二层防漏包装。 运输标本的外包装需要明确的标签,表示发货人和收件人的详细联系方式、包装日期和运输日期等。 病原微生物标本的包装,国际民航组织危险品航空安全运输技术细则把感染性物质分为a和b两种。 a级是指人在感染后发病的可能性高、传

12、染性强、对人危害性大的感染性物质。 强烈怀疑具有严重危害性的感染性物质也属于a级。 a级感染性物质感染性物质联合国编号UN2814和UN2900 (仅引起动物病原) 采用了p20包装要求。 除a级以外,只有一般危险,引起感染机会少的感染性物质感染性物质在b级(联合国编号UN3373 ),采用了p60包装要求。 a类包装与b类包装的差异1,a类包装与b类包装的差异2,UN3373,a类感染性物质的包装材料,b类感染性物质的包装材料,a类感染物质的标记,b类感染物质的标记,UN3373,Biological substance,Category B (生物物质,b类),病原微生物标本的实验室间传含

13、有危险材料的实验室内、实验室所属机关内和机关外的运输,应满足国家和国际规定的要求。 为了不污染人和环境,必须运输危险材料,确保安全对策。 危险材料必须放在批准的本质上安全的防漏容器中运输。病原微生物标本的输送、在地面上输送标本的时候,请注意把装有标本的箱子牢固地固定在交通工具上。 汽车需要吸水材料、消毒剂、手套、口罩、护目镜、密封防水的废弃物容器等防护用品。 为了避免道路摇晃引起标本溶血,可以在运送前分离血清。 国际、国家、商业有关规定许可的情况下,诊断标本也可以空运,必须注意规范包装。 分离培养病原微生物标本的运输、细菌、病毒的标本大多要求冷藏运输。 脑膜炎球菌等用35C37C保温输送。 用

14、血液标本分离细菌、病毒、寄生虫时,需要低温保存,不能冷冻。 不是用干冰而是用冰搬运。 制作立克次体系微生物的全血标本要求干冰的保存和冷冻输送。 检测核酸样品的输送要求在低温下迅速。 从标本采集到检查的间隔尽可能短,尽量使标本处于冷藏状态。 检查前的保存时间长时,冷冻标本必须防止核酸分解。关于中国病原微生物菌(毒)的种类和样品运输的规定,尽可能由陆路运输的新闻卫生主管部门(跨省向卫生部)授权包装、容器和标志要求的两人护卫,不可通过城市公共汽车在2小时内报告,可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定、可感染人类的高致病性病原微生物(毒) 种或样本运输管理规定于2005年11月24

15、日在卫生部事务会议上可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定、目的:为了加强对人感染高致病性病原微生物菌(毒)种或样品的运输管理,保障人体健康和公共卫生,根据中华人民共和国传染病防治法、病原微生物实验室生物安全管理条例等法律、行政法规的规定制定本规定。 定义:本规定所称感染人的高致病性性病原微生物(毒)种或样品,是人间传染的病原微生物名录中规定的第一类、第二类病原微生物菌(毒)种或样品。 适用范围:本规定适用于人感染的高致病性性病原微生物菌(毒)种或样品的运输管理工作。 人间传染的病原微生物名录的第三类病原微生物运输包装分为a级病原微生物菌(毒)种或样品和高致病性病原微生物菌

16、(毒)种或样品,按照本规定进行运输管理。 运送以上范围规定的菌(毒)种或样品(以下称高致病性致病微生物菌(毒)种或样品),须经省级以上卫生行政部门认可。 因为没有被批准,所以不能运输。 申请单位:从事疾病预防控制、医疗、教育、科研、菌(毒)种保存和生物产品生产的公司,均可申请工作需要,运输高致病性病原微生物菌(毒)种和样品。 运输申请:高致病性病原微生物菌(毒)种或申请运输样品的单位(以下简称申请单位),在运输前必须向省级卫生行政部门申请,提交下一份申请资料(原件1份,复印件3份):1 .能感染人的高致病性病原微生物菌(毒) 种子或样品输送申请书(领取单位)取得政府主管部门出具的有关高病原性病

17、原微生物实验活动、菌(毒)种或样品的保存、生物产品生产等的许可文件,该实验室具备从事高病原性病原微生物实验活动的资格。 领取机关必须满足以下条件。 1 .具有法人资格2 .有资格从事高致病性病原微生物实验活动的实验室3 .取得政府主管部门发行的关于高致病性病原微生物的实验活动、菌(毒)种和样品的保存、生物产品的生产等的批准文件。 在一定的申请地和接受地之间多次运送同一品种的高致病性病原微生物菌(毒)种或样品的,可以多次申请运送。 多次运输有效期为六个月的期限届满后需要继续运输的,应重新提交申请。 省内运输审批:在省、自治区、直辖市行政区域申请运输高致病性病原微生物菌(毒)种或样品的,由省、自治区、直辖市卫生行政部门审批。 省级卫生行政部门应当及时审查申请机关提交的申请资料,申请资料不完善或者不符合法定形式的,应当立即发放申请资料补正通知书的,或者符合法定形式的,立即受理, 5个工作日内必须作出是否批准的决定,符合法定条件的,不符合发行可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定的法定条件的,必须作出不批准的决定,并说明理由。 跨省运输审查:申请跨省、自治区、直辖市运输高病原性性病原微生物菌(毒)的种类和样品,应当将申请资料提交运输源省级卫生行政部门进行初审的要求,省级卫生行政部门应在3个工

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