HPV与宫颈癌和HPV的基因芯片检测.ppt

1、b、1、宫颈癌和人乳头瘤病毒的研究进展，b、2、1、宫颈癌及其病因学概述，2、人乳头瘤病毒的生物学研究，宫颈癌的早期筛查，4、宫颈病变的治疗，b、3、1、宫颈癌及其病因学概述，b、4、宫颈癌全世界统计的最常见的妇科恶性肿瘤。中国每年新增宫颈癌病例约13.15万例，占世界宫颈癌新增病例总数的28.8%，发病率仅次于乳腺癌。随着筛查体系的建立，全世界宫颈癌的发病率和死亡率都大大降低了。我国从1970年代的10.28/10万下降到1990年代的3.25/10万，但高发病率地区的死亡率仍然很高。b，5，患病年龄趋于年轻化(发病年龄提前至45岁)，且发病史缩短。例如，在吉林省，20世纪80年代，35岁以

2、下妇女占宫颈癌患者的4.8%，2000年占34.1%。宫颈癌的危险因素：行为危险因素：如过早性生活、多性伴侣、多次妊娠和生育、社会经济地位低下、营养不良和性功能障碍等。生物因素：各种微生物如细菌、病毒和衣原体的感染。目前，只有少数研究表明宫颈癌可能具有家族聚集性。宫颈癌的生物学病因学进展：*早在19世纪40年代，意大利医生雷戈尼斯特恩就首次提出婚姻可能与宫颈癌的发生有关；*在20世纪60年代和70年代，人们主要研究单纯疱疹病毒、HCMV病毒和其他病原体；* 1974年，祖尔豪森首次提出人乳头瘤病毒感染与宫颈肿瘤密切相关；* 1977年，拉维蒂在电子显微镜下观察到宫颈癌活检组织中存在人乳头瘤病毒

3、颗粒；* 1995年IARC研讨会：高危人乳头瘤病毒的持续感染是宫颈癌的主要原因。-99.7%的宫颈癌患者可发现高危型人乳头瘤病毒感染。8，2，人乳头瘤病毒的生物学研究，9，人乳头瘤病毒，双链脱氧核糖核酸，未包膜的病毒环状脱氧核糖核酸，约8kb；病毒颗粒的直径为50 55纳米。依赖宿主细胞进行复制、转录和翻译。HPV病毒的电子显微照片，b，10，类型：已发现100多种不同的亚型(如果DNA序列的同源性低于90%，它将是一种新的亚型)。超过35种可以感染人类生殖器官，大约30种与肿瘤有关。1)低风险型：低度宫颈上皮内病变，引起良性性传播疾病，如外生殖器尖锐湿疣(人乳头瘤病毒6，11，42)；2)

4、高危型：与宫颈癌发生相关的高宫颈上皮内病变(人乳头瘤病毒16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68)；3)中间型：不确定型。分布：有些亚型与宫颈癌的区域和病理类型有关。人乳头瘤病毒45在西非很常见，人乳头瘤病毒39和59在中美和南美很常见，人乳头瘤病毒52和58在中国很常见。人乳头瘤病毒16占宫颈鳞状细胞癌的51%，人乳头瘤病毒18分别占腺癌和腺鳞癌的56%和39%。型别和分布，b、11、人乳头瘤病毒型别和宫颈病变，b、12、人乳头瘤病毒感染率，最常见的低危型(人乳头瘤病毒6型，11型)，最常见的高危型(人乳头瘤病毒16型，18型，31型，33型，

5、45型，58型)，宫颈癌患者中高危型人乳头瘤病毒感染率，b、13型，不同人乳头瘤病毒由于检测样本中存在复杂感染，亚型检测频率为100%(该亚型检测次数/所有亚型检测次数)，检测次数为2.本表统计数据由深圳市计划生育中心提供，HPV分型基因检测试剂由燕能生物技术(深圳)有限公司提供.人乳头瘤病毒基因结构根据功能可分为三个区：早期区(E区)、晚期区(L区)和非编码区(LCR)。E分为E1 E7开放阅读框，主要编码与病毒复制、转录、调节和细胞转化相关的蛋白质(人乳头瘤病毒没有E3)。l区分L1和L2，分别编码主要衣壳蛋白和次要衣壳蛋白。LCR是一个位于E区和L区之间的-6.4 1.0 KB的DNA片

6、段，负责转录和复制的调控。B、15、人乳头瘤病毒的致癌机制，人乳头瘤病毒能在感染上皮细胞后以游离状态持续在染色体外，而不引起任何病变，或引起良性病变和低度病变，如尖锐湿疣或轻度不典型增生。而癌变与病毒DNA整合入宿主染色体密切相关。高危型人乳头瘤病毒DNA链通常在E1或E2的开放阅读框内断裂，使人乳头瘤病毒DNA整合到染色体的脆弱区。E6和E7具有促进和维持整合的功能。人乳头瘤病毒E6蛋白间接抑制p53的活性，并阻碍细胞对DNA损伤的反应。(细胞生长和分化的负调节)人乳头瘤病毒E7蛋白和pRb的结合使其功能失活并改变细胞周期的正常调节。b，16，人乳头瘤病毒感染途径及危险因素，感染途径：主要是

7、性传播和直接皮肤接触特殊情况：分娩时经口传播给婴儿的危险因素：1。年龄因素：30岁以后人乳头瘤病毒感染率下降；2.性行为的影响：初次性交年龄越小，性伴侣越多，感染率越高；3.避孕方法：没有共识；4.免疫抑制状态增加了人类乳头瘤病毒感染的风险，如艾滋病毒感染和肾移植。b、17、iii。子宫颈癌的早期筛查，b，18，无上皮内病变-异常鳞状细胞-异常腺上皮细胞ASC(非典型鳞状细胞)非典型鳞状细胞ASC-US(意义不明的ASC):非典型鳞状细胞ASC-H(ASC不能排除HSIL):含义不明确的非典型鳞状细胞，除了高级鳞状上皮内病变L-SIL(低级SQU)大量上皮内病变：低级鳞状上皮内病变-人乳头瘤病

8、毒感染，CINH-SIL(高级SIL):高级鳞状上皮内病变CIN或鳞状细胞癌(鳞状细胞癌):非典型腺细胞：非典型腺上皮细胞AIS(原位腺癌)原位腺癌ACA:腺癌的组织学检查分类：CIN(宫颈上皮内瘤):宫颈上皮内瘤样病变CIN:轻度非典型增生CIN:中度非典型增生CIN III:重度非典型增生，原位癌，TBS(贝塞斯达系统)宫颈癌前病变细胞学诊断中常用的几个术语的解释2001年报告分类：b，19，正常妇女，人乳头瘤病毒暴露，主要是性传播感染：40 无细胞学变化/人乳头瘤病毒消除、子宫颈癌、免疫机制辅助致癌因素、人乳头瘤病毒感染和宫颈病变的自然过程、潜伏感染阶段、亚临床感染阶段、临床症状阶段、人

9、乳头瘤病毒相关肿瘤阶段、5-10年、平均8-12年、b、20年、病变、进展(恶化)、持续(稳定)、b、21、因此，必须采取适当的预防和筛查措施来预防筛查是早期诊断和治疗的关键。b，22。备注：1 3年的筛查间隔是安全的，风险随着筛查间隔的增加而大大增加。表：阳性病变的筛查间隔和风险系数表，b，23，表：不同的筛查频率可降低宫颈癌的累计发病率，摘自：戈尔迪肖杰等，2001.13；筛查策略采用的方法包括：1-VIA检查、2-HPV检测和3-巴氏涂片。24岁，筛查对象：性生活超过三年或超过21岁的女性。起始年龄：经济发达地区：25 30岁，经济不发达地区：35 40岁，高危人群的起始年龄应相应提前。

10、终止年龄：65岁以上风险极低。筛选间隔：一年一次。如果连续两次人乳头瘤病毒和细胞学筛查正常，筛查间隔可延长至5 8年。，中国癌症研究基金会(CCRF)子宫颈癌早期诊断和治疗指南，b，25，中国癌症研究基金会(CCRF)子宫颈癌早期诊断和治疗指南，筛查方案：基本方案：肉眼观察冰醋酸试验(碘溶液试验)一般方案：巴氏涂片人乳头瘤病毒检测最佳方案：TCT人乳头瘤病毒检测随访：低细胞学病变，CIN一级以上，“特殊职业”注意事项：1。最佳检查时间为月经后10 18天；2.检查前48小时内不要清洗阴道和使用阴道内药物；3.检查前48小时内不要发生性行为；b、26、b、27、宫颈癌常规临床检查方法；临床检查：

11、如肉眼观察、阴道镜检查等。易于操作。然而，准确性和特异性需要提高(50-70%)。细胞学检测：观察宫颈上皮细胞的变异，常用的方法有：巴氏涂片、LCT、薄层层析等。1)长期宫颈糜烂可导致宫颈上皮细胞形态变异，但非人乳头瘤病毒引起的细胞形态异常与宫颈癌无直接关系。2)在感染的早期，细胞通常没有形态变化，但此时，人乳头瘤病毒对细胞内遗传物质的损伤可能已经发生。病毒学检测：人乳头瘤病毒核酸检测(聚合酶链反应法)，常用的方法有：基因芯片分型检测、荧光聚合酶链反应等。特异性强，灵敏度高，操作简单(98%)，b，28，人乳头瘤病毒基因分型快速诊断试剂，通过膜杂交技术建立的灵敏、特异、简便的检测方法，可同时检

12、测23种人乳头瘤病毒亚型(18种高危型和5种低危型)，b，29，人乳头瘤病毒基因分型快速诊断试剂操作程序，样品采集，can提取，聚合酶链反应扩增，杂交，显色，b，30，结果判断，检测结果：人乳头瘤病毒16型，人乳头瘤病毒43型，检测结果：人乳头瘤病毒33型筛查和集中高危人群，以便有效监测和早期发现宫颈癌。3.人乳头瘤病毒检测的阴性预测值为99%，可将筛查间隔延长至每三年一次，大大降低检查成本。敏感性：88-100%特异性：98%阴性预测值：几乎100%，人乳头瘤病毒检测的临床意义，b，32，图：德国、法国和英国研究数据总结，人乳头瘤病毒()是宫颈病变的重要基础，而持续的人乳头瘤病毒感染是CIN

13、II/CIN III的重要条件。(ASCUS分流和低级别病变，1。通过排除可疑或低度病变，人乳头瘤病毒检测可提高诊断的可靠性并降低漏诊风险。2.区分潜在宫颈癌风险的妇女和低风险的妇女，并指导阴道镜检查的合理使用。3.与细胞学检查相比，人类乳头瘤病毒检测提供了更快的结果，因此可以放心地将人类乳头瘤病毒阴性的妇女重新纳入常规筛查人群。b，34，病例数：3000，该图显示，HPV的相对风险随着CIN分级的增加而明显增加，b，35，(3)CIN治疗后的随访，1。预测病理恶化或术后复发的风险，并有效指导术后随访。2.术后6个月和12个月的人乳头瘤病毒检测结果为阴性，表明病变已完全切除，可减少患者的焦虑。3.如果术后人乳头瘤病毒检测呈阳性，则表明有残余病变和复发的可能性。CIN患者：治疗成