动物微生物--病毒血凝及血凝抑制实验实验五

1、实验5血凝及抑制血凝的实验，实验目的1血凝试验：使用滴定病毒的血凝效价，一定量的病毒，一般4个血凝单位。2血凝抑制试验：使用标准病毒溶液测定血清中相应的抗体，或使用特定抗体确定新分离的血凝性病毒。3检查实验鸡群中是否有病毒感染，并监测鸡的免疫状态。4基本操作技术，了解事实价值，实验原理，流感病毒结构模式，棘突：亚型特异性抗原，易变异，嘿嘿(在h1-h15中):具有柱状功能：吸附细胞：与细胞内受体结合，病毒侵入细胞，-中和抗体抑制血凝，血凝试验原理，血凝酶hemagglutinin HA:由病毒基因编码的糖蛋白涂片。与病毒吸附和宿主细胞传播有关。HA与人或其他动物多个红细胞表面的n-acetyl

2、中性酶受体结合，可以引起红细胞凝集。病毒的红细胞聚集反应或血凝反应。血凝原理、血凝抑制原理、血凝抑制试验原理病毒引起的血凝酶，在抗体与病毒结合时，没有吸附在红细胞表面的受体上，利用免疫血清阻止红细胞凝集的现象称为血凝抑制。实验材料仪器：u型或v型微量反应板、微量吸管、枪头试剂：1%鸡红细胞、NDIV血细胞、NDIV抗血清、生理盐水、实验阶段1。将一个96孔v反应板放在水平实验台上，将25ul生理盐水放在1行1-10孔中，不添加11孔。12号孔和25ul生理盐水2。将血凝酶25ul放入1号洞，混合25ul放入2号洞，混合25ul放入3号洞，放下10号洞，扔掉25ul。第12个孔没有添加为语音控制

3、孔。3 .在1-12孔中加入25ul生理盐水。4.将鸡红细胞悬浮液的25ul1%放入每个孔，每15-30分钟5min的冲击、室温停止感觉观察结果。5.计算并稀释血凝效价为4。血凝检查结果的确定，效价的确定：絮凝尤为重要：“絮凝现象随之而来：”“絮凝现象明显”:“血凝效价”“絮凝时最大稀释度”。此时稀释度是血凝单位。结果1 .如果各组的对比都正确，红细胞的聚集强度设计也有4红细胞聚集在一起，均匀复盖在孔底部，边缘不均匀或收缩的情况。”3 红细胞是片状聚集型，但其面积比 4 略小。2“红细胞是片状凝聚物，但在一些沉积孔下的中间有小点状。”红细胞大部分在聚集粒子中少量分散的孔底中间下沉. “红细胞沉

4、入孔底，边缘整齐。2.对照组孔正常状态下红细胞凝集的稀释100%判定血凝的终点。能完全凝聚鸡红细胞的所有病毒的最高稀释倍数是病毒的凝集价格。血凝抑制1。取96孔v反应板1块在水平实验台上，在1行1-10孔中放入25ul生理盐水，不添加11孔。第12个孔和25ul生理盐水。2.将检查对象血清25ul添加到孔1，搅拌后将25ul拉出并添加到孔2，搅拌后将25ul拉出并添加到孔3，接着丢弃孔10后的25ul。第12个孔没有添加为语音控制孔。3。在1-12孔内全部放入“4价”血液凝固剂25ul，冲击后在室温下停止5英寸。4.将1%的鸡红细胞悬液放在1-12孔内，每25ul，冲击，室温感15-30分钟，5min观察结果。5.观察结果，实验数据记录。血凝抑制试验结果的测定，孔RBC沉入孔底中心，按钮形状。()凝集(-)病毒对照组孔：凝集RBC对照组孔：无自体凝血凝抑制试验站：用完全血凝抑制法制作的最高血清稀释度。、测试问题1，病毒凝集红细胞是特定抗原反应吗？怎么了？2、血凝抑制实验是特定抗原抗体反应吗？怎么