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文档简介
1、维生素B2和发酵,第六组,维生素B2的概要,而结构和性质维生素B2又称为核黄素。 是核醇和6.7二甲基异嗪的缩合物。 核黄素味道苦,在240下变成暗色,熔点在275282,在这个温度下会引起破坏。 性质核黄素是橙色结晶化合物,溶于水溶解度低,水溶液中黄色荧光核黄素对热稳定,在120下加热6小时,稍分解,容易在碱溶液中破坏,在光和紫外线的照射下发生不可逆分解, 结构核黄素在异佛尔酮上的第1位和第10位的n原子与活跃的双键连接,能接收氢并还原为无色的物质,还原后的再脱氢酶容易,具有可逆的氧化还原特性、化学结构式、二、维生素B2的作用, 促进参与组织呼吸过程的碳水化合物的中间代谢和参与激素的色氨酸向
2、烟酸的转化,VB6转化为磷酸吡唑啉,维持体内还原型谷胱甘肽的浓度,参与体内抗氧化防御系统,参与药物代谢,提高机体对环境的适应力三、维生素B2 目前核黄素的工业生产有微生物发酵法和化学半合成法两种,其中微生物发酵法以生产技术简单、原料便宜、环保、资源可再生等优点,深受世界核黄素制造商的欢迎。 (1)化学合成法制备的维生素B2,使D-核糖和3,4 -二甲基苯胺缩合,进行氢化还原,使伯胺和苯氯化重氮化物反应,将偶氮染料化合物3,4 -二甲基-6-苯基偶氮-D -核糖胺和巴比妥酸进行乙酸用这种维生素B2的生产技术生产的B2收率达到95.3%,纯度达到96.8%。 其中用于合成的D-核糖现在以D-葡萄糖
3、为原料,由芽孢杆菌发酵而成,取代了使D-葡萄糖反应4个阶段合成D-核糖的方法。 后者因为需要使用钠汞合金,带来了严重的环境污染问题。 虽然化学法合成的维生素B2可以利用传统的分批反应设备,但在精制阶段偶氮燃料中间物和维生素B2生成微细结晶,给高效过滤和清洗带来了很大的困难。 同时,这两种化合物的颜色很深,工厂的工厂管理也很困难。 (二)微生物法合成维生素B- 2维生素B- 2的微生物发酵生产采用三级发酵法。 在25下培养成熟的维生素B2产生菌的斜面孢子用无菌水制成孢子悬浊液,接种在种子培养基上培养(30 ),最后将二次发酵液转移到三次发酵槽发酵(30 ,160h )中,得到维生素B2发酵液。
4、工业上使用的维生素b-2的产生菌主要有非杆菌酵母(Eremotecium ashbyii )和棉花病囊菌(ashbyagosspii )两种。 经过菌种改良,维生素B2生产的最高水平可达到10000U/ml。 产品质量好,成本低。 产菌种核黄素发酵的主要生产菌是:棉囊阿舒氏酵母A shbya gossyp ii朊病毒酵母Candida famata阿舒氏假囊菌Eremothecium ashbyii酒类Saccharomyces sp枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis产的科但是,AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAU
5、UAUUAA 随着基因工程技术的发展,相继建立了枯草芽孢杆菌和棒杆菌产核黄素产生菌,这些工程菌具有发酵周期短(2 3天)、原料要求简单、产量高等优点,核黄素微生物发酵生产的生命力强,四、发酵过程,第随着分子生物学技术的发展,基因工程手段已经应用于核黄素生产菌种育种,这样选出的菌种产量高,能源消耗量低(主要指菌种培养所需的营养物质),产品纯度高等,经济效果显着提高。 第二阶段,发酵方法的选择。 核黄素微生物发酵法分为液体深层发酵法和固体发酵法(液体和固体主要培养菌种的培养基状态差异:培养基可以是液体,也可以是固体)。 应指出的是,固态发酵技术比液体发酵操作简单,生产规模可以小,特别是固态发酵设备
6、比液体发酵降低了80%以上的成本,同时能大幅度减少能源消耗,容易普及和应用。 第三阶段,核黄素的提取。 即从发酵液中提取核黄素。 主要的提取方法是重金属盐沉淀法、酸溶液法和碱溶液法。 科学研究表明,碱溶液法提取核黄素不仅收益高,而且能耗低,随着离心分离设备的改进,碱溶液法分离提取核黄素的优势越来越明显。 第四阶段,核黄素的测定。 发酵液中核黄素含量、质量的测定。 测定的方法有微生物法、荧光比色法、高效液相色谱技术(HPLC )、核黄素化学发光的新方法等。 目前核黄素化学发光的新方法精度高,灵敏度高,分析速度快,有广泛的应用前景。 第五阶段,核黄素粒子的制备。 微生物发酵生产的核黄素需要干燥后制
7、成核黄素制品. 常用的干燥方法:普通气流干燥法和喷雾干燥法。 六、微生物发酵的缺点,与化学合成法相比,微生物发酵法也有缺点和不足。 例如,核黄素在后期加工和处理过程中很难分离纯化核黄素,很难得到高纯度的核黄素。 七、发酵过程中的注意事项,要在全过程中严格控制无菌环境,添加抗生素要在温度不太高(不要烫伤手)时添加,防止抗生素失活。 发酵罐使用前一定要清洗干净,不要留下残渣。 特别要注意清洗配管和死角的残留物质,避免染色。 对发酵槽和培养基进行灭菌时要分别灭菌,对葡萄糖单独灭菌,另外磷酸盐也要单独灭菌。 磷酸盐与培养基中的其他无机盐在高温下反应,难溶性化合物沉淀后,被菌体分解后难以利用,影响培养基的营养成分,菌种在前期
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