ITC等温滴定量热法的操作说明

1、等温液滴定量热法(isothermal titration calorimetry，ITC)，2011-10-13，2，isothermal titration calorimetry，ITC动态参数，例如接合常数(Ka)、接合位置点(n)、摩尔接合焓(H)、摩尔接合熵(S)、摩尔静压热容量(Cp)、酶反应的Km和kcat；3实验时间短(典型的ITC实验需要30-60分钟，响应时间只有几分钟)，操作简单(整个实验由计算机控制，用户只需输入温度、注射次数、注射量等实验的参数，计算机就可以完成整个实验，分析Origin软件中通过ITC获得的数据)。测量时不需要制作透明、清澈的溶液，热量实验结束的样

2、品没有损坏，也可以进行后续生化分析。微量热法虽然缺乏特异性，但生物界本身也有特异性，这种非特异性方法偶尔会得到不寻常的方法所得到的结果，这有助于发现新的现象或新的规律，特别适合生物界各种不寻常的过程研究。4，Applications include:Small molecular interactions of Small moleculales lead optimization . enzyme kinetics . assessment ofbiological activity的assessment of biological activity。5，6，在一定温度下，注射器中的“配体”

3、溶液适合于包含“聚合物”溶液的池。配体注入池后，两种物质相互作用释放或吸收的热量与结合量成正比。池中的聚合物被配体饱和时，热信号减弱，直到仅观察稀释背景热。7，ITC系统通过细胞反馈网络CFB，分别测量或补偿样品和相应反应产生或吸收的热量。两个硬币形状的东西放在隔热圆柱上，通过那根薄薄的管子与外界连接。有两个热敏设备。一个用于检测两个示例之间的热量差异，另一个用于检测对比和环境的热量差异。样品发生化学反应时，热量被释放或吸收，与样品相对的温差将增加或减少样品，从而稳定到一个水平，即baseline。因此， t1=用于保持常数的列由系统检测图片曲线。8，9，滴定通常在尽量接近隔热的条件下进行，滴

4、定物可以是液体或悬浮固体；滴定剂可以是液体或气体。温度变化是由滴定剂和滴定物之间的化学作用或吸附在固体表面的有机分子的物理作用引起的。实验数据以热光谱的形式显示，提供了反应中物质量(合理终点)和反应物质特性(焓变化)的数据。通过分析图表，可以了解反应容器中发生的反应种类和数量，溶液中存在的各种种类的浓度等信息。这部分称为热滴定，可以确定反应的化学量关系，计算平衡常数k ( g)、标准状态的焓变化 h和熵变化 s等反应的热力学量，这部分称为水滴定量。温度测量滴定基于热效应，与粘度、光学透明度、介电常数、溶剂强度和离子强度等溶液的许多特性无关，因此可用于气相、液相、非水溶液、着色溶液、胶体溶液和粘

5、性浆料等系统。10，将典型的ITC数据配体溶液注射到ITC池的蛋白质溶液中20次。每个注射峰值(上方)下方的区域等于注射发出的总热量。此耦合列相对于池中的配体摩尔比图形添加时，得到了交互的完全耦合等温线(下图)。使用单位点模型验证数据。化学测量、连接常数和焓的值显示在框中。11，12，ITC方法测量键/离解常数，ITC直接测量焓变化H，在不影响反应系统的情况下结合常数Ka，不引入修正组，从而测量更可靠的结果，13，14，15，(55，)，ITC提供(G)和(H)，以生成合并机构的实际图像。机制研究和分析开发，16，ITC:用生物相关模型系统建桥，ITC的核心优势之一是生成生物相关实验的独特能力。没有以固