Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护课件

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2、 Alliance 2695 HPLC 操作及维护,溶剂输送系统,基本构造,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,基本构造,2695溶剂输送系统（串联泵）示意图,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,溶剂管理系统中的流路,Prime/Vent Valve,Inlet Checkvalve,Inlet Checkvalve,A,B,C,D,Front,基本构造,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,样品管理系统,基本构造,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,样品管理系统可存放和定位样品瓶并将

3、样品注入溶剂流。样品管理系统有 5 个样品转盘。 每个样品转盘中最多可容纳 24 个样品瓶，共计可容纳 120 个样品瓶。,基本构造,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,样品管理系统中的流路,基本构造,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,基本构造,柱 温 箱,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,基本构造,检测器,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,仪器日常操作,开机 操作前准备 灌注柱塞密封泵(Prime Seal Wash) 灌注针头清洗泵 (Prime Needle Wash)

4、打开真空脱气机 干灌注(Dry Prime) 湿灌注(Wet Prime) 冲洗进样器 (Purge Injector),日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,依次打开LAC/E采集服务器、2695分离单元、所需检测器以 及计算机的电源。仪器进行5分钟自检后，出现以下画面。,仪器日常操作,开机,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,仪器日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,用色谱纯有机溶剂配制流动相，所有溶液应经0.45m滤膜过滤，脱气应充分。 必须确保6根管子全部插到溶剂瓶的底部。 准备合适的灌

5、注柱塞密封清洗泵（Seal Wash）液体。 准备合适的灌注针头清洗泵（Needle Wash）液体。,操作前准备,仪器日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,灌注柱塞密封清洗泵(Prime Seal Wash),仪器日常操作,当首次使用或整个管路都已干燥时 1.回到Menu 画面，选择Diag。 2. 将注射器适配器连接到注射器。 3. 移除密封清洗入口管路上的滤头。 4. 将注射器装满清洗液，然后将注射器适配器连到密封清洗管路末端。 5. 按Prime Seal Wash ，再按Start 。 6. 推进注射器使清洗液进入系统。 7. 当有溶剂从密封清洗废

6、液管中流出时，按Halt。 8. 重新安装滤头。 9. 按Close返回。,注意事项：当更换溶液时，只需执行步骤1，5，7和9。,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,灌注针头清洗泵 (Prime Needle Wash),仪器日常操作,注意事项：1 溶剂的选择：根据样品及流动相的化学特性来作选择。 2 若为浓度较高的样品需要较强的溶剂来清洗。 3 若样品对pH较敏感，应考虑洗针液的pH。,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面。 2. 利用方向键 将光标移至“Degasse

7、r”位置，按Enter。 3. 利用上下键选择模式为ON，如下图所示。,打开真空脱气机（Degasser）,注意事项：在开启真空脱气机时，要确认所有溶剂管路都充满溶 剂；若没有溶剂时请执行溶剂的Dry Prime 操作。,仪器日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,干灌注（Dry prime）：系统第一次运行或系统中无溶液时进行。,1 将溶剂管路插入到相应的容器。 2 轻轻摇动滤头，以除去可能存在的气泡。 3 将注射器连到灌注/排放阀。如图所示。 4 逆时针旋转阀1/2圈，将其打开。 5 按Status屏幕中的Direct Function键，选择Dry Pr

8、ime，然后按Enter。 6 在上述对话框中，选择要灌注的溶剂管路对应的屏幕键。如图所示。 7 抽回注射器活塞以将溶剂抽出管路。,仪器日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,湿灌注（Wet prime）：更换流动相；排除气泡；仪器闲置了一段时间。,仪器日常操作,注意事项： 为避免损坏柱塞密封，仅在流路中存在溶剂时执行湿灌注。 若更换流动相与之前流动相不互溶，采用中间溶液过渡。 以最低粘度的溶液开始湿灌注，以帮助清除管路中的空气。,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,执行湿灌注 1 在“status”屏幕的“Composition”

9、字段中，为要用于湿灌注的溶剂输入“100%”。 2 按“Direct Function”键，选择“Wet Prime”，出现湿灌注对话框。 3 按“OK”，执行湿灌注。 4 可根据实际情况重复灌注。,仪器日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,冲洗自动进样器（Purge Injector） 更换为当前流动相 清除流路或注射器中的气泡,仪器日常操作,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,仪器日常操作,日常操作步骤,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,常见故障及维护保养 流动相 输液泵 进样系统 色谱柱 检测器

10、,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,仪器常见故障及维护保养,流动相,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,仪器维护保养,输液泵,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,注意事项 每天实验结束一定要认真冲洗泵,减少密封垫损耗及堵塞。 输液泵的垫圈要和流动相匹配协调。多数垫圈和流动相是协调的,但有的垫圈适用于甲醇、水、乙腈，在四氢呋喃中溶解、变粘、变软。 注意流动相组分的互溶性，使用正确的Seal Wash 溶剂。 必要时清洗单向阀：如果使用过缓冲盐溶液应使用40 50的温水超声20min。如果

11、使用过纯乙腈应使用异丙醇超声20min。如果使用过其他流动相或上述两种溶液超声后应使用纯甲醇超声20min。,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,进样系统,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,注意事项 每次批量进完样后手动清洗，或最后进一针50ul流动相，如果流动相中有盐的话则用纯净水替代缓冲盐那部分比例。 打开样品仓盖后，等待样品盘停止转动后再取出，注意保持样品仓内和样品盘清洁。 使用微量进样瓶请设定正确的针尖高度值。 注射器，样品瓶最好使用仪器自配的，不要用其它仪器的。 仪器右侧的Syr

12、inge要注意不能有气泡，一旦出现，应使用面板上的Purge Injector功能。 停机前一定冲洗干净进样器内残留的样品或缓冲盐，防止样品和无机盐沉积造成样品交叉污染，硬件磨损或管路堵塞。,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,色谱柱,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,注意事项 pH值范围。 样品过滤。 柱压不能太高，防止冲击太大。 预柱的使用。 长时间不用时要保存好,一定要洗去缓冲盐,加入大于10%有机溶剂，将柱两端拧紧,保持柱填料湿润。,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护,检测器,仪器常见故障及维护保养,Waters Alliance 2