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文档简介
1、a,1,选矿3现代生物技术主题2.2细胞工程,2.2动物细胞融合和单克隆抗体,a,2,“西红柿-马铃薯”(理想图),通过长期实验,科学家们用植物体细胞杂交技术获得了“西红柿-马铃薯”株。a、3、杂种植物体、融合的原生质体AB、细胞壁、脱分化、愈伤组织、再分化、过程、植物细胞a、原生质体b、原生质体a、杂种细胞AB、去壁、去壁、人工诱导、方法? 植物细胞b、植物细胞杂交技术、纤维素酶、果胶酶等物理法:离心、振动、电刺激等化学法:聚乙二醇等试剂,筛选,a、4,将奶牛细胞和植物细胞杂交得到绿色奶牛,只需沐浴阳光就能挤出牛奶奇想天开,a,5,动物细胞的全能性随着动物细胞分化程度的提高而逐渐被抑制,分化
2、可能性逐渐减弱,a,6,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体的制造技术,动物细胞核移植技术,动物细胞工程常用技术,酶分解法,如纤维素酶和果胶酶,2 .动物细胞为什么不?因为动物细胞没有细胞壁,3 .植物体细胞杂交诱导原生质体融合的方法是什么?离心、振动、电击等物理方法; 聚乙二醇等化学方法,4 .动物细胞融合可以利用上述两种方法吗? 还有其他方法吗? 也可以利用灭活的病毒进行诱导。 5 .植物体细胞的杂交能在进行原生质体融合后进行组织培养形成完全的杂种个体,动物细胞融合形成杂种动物个体吗? 不过,只要形成杂种细胞,就能用胰蛋白酶分散细胞,a,8,一,动物细胞融合技术,1 .概念:动物
3、细胞融合(cell fusion )也称为细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 含有融合而成的原两种以上细胞遗传物质的单核细胞被称为杂交细胞。 结果:“两个或多个动物细胞”“一个杂交单核细胞”,a,9,2,诱导方法, 物理法:离心、振动、电刺激、化学法:聚乙二醇(PEG ),生物法:灭活病毒,病毒表面含有的糖蛋白和部分酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新定位,细胞膜打开,细胞融合。 例如仙台病毒,失去感染性,保持融合活性,用a,10,灭活的病毒诱导动物细胞的融合过程,灭活的病毒粒子附着在细胞表面,细胞膜贯通病毒粒子,细胞膜连接,细胞融
4、合,形成单核杂交细胞。 成为研究22222222222222222222222,3,原理:细胞膜流动性,a,12,6,应用:细胞遗传,细胞免疫,肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。 5、意义:突破有性杂交方法的界限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物间)成为可能。、a、13、植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,细胞膜的流动性、细胞的全能性、细胞膜的流动性、去除细胞壁后融合原生质体,分散细胞后诱导细胞融合,用物理(离心、振动、电刺激)化学(PEG )、物理、化学方法培养灭活病毒,培养新种, 调制单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等,形成杂种株,形成杂种细胞,生产细
5、胞产品,突破有性杂交方法的界限,使远缘杂交成为可能。 a、14、1、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较,正确地说,a .融合的诱导方法完全相同,b .使用的技术手段完全相同,c .采用原理完全相同,能形成d .杂种细胞,对d、a、15、2、动物细胞融合进行正确地描述,a .动物细胞融合形成的原两个以上的动物细胞原理是打破细胞的全能性c .生殖障碍,实现远缘杂交.现实d .常用的诱导因子是聚乙二醇、灭活病毒、离心力等.3.动物细胞融合目的中最重要的是a .制造远缘杂交不亲和b .单克隆抗体c .的新品种d .杂种细胞. d 2 .主要分布在哪里? 3 .抗体是由什么样的细胞产生的,抗体是被抗原刺
6、激而产生的,是具有能与该抗原特异性结合的免疫功能的球蛋白。 二、单克隆抗体的制造技术主要分布在血清中,也分布在组织液及外分泌液中。 a,17,每种浆细胞只能分泌一种抗体,4 .传统抗体的生产方法和缺陷? 反复注射抗原,不能无限增殖,产量低,纯度低抗体特异性差,a,18,1,设计方案: b淋巴细胞仅分泌特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞,能无限增殖,继承米尔斯坦和霍乱、杂交细胞,2,制造过程:父母细胞的遗传物质能制备单克隆抗体,能无限增殖,能产生特异性抗体的a 19,免疫的b淋巴细胞,杂交瘤细胞,单克隆抗体,a, 20、将抗原(羊红血球)注射到小鼠体内,免疫的b淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞、融合、灭活的病毒、
7、PEG、多个杂交瘤细胞、选择培养基、杂交瘤细胞、抗体阳性检测、能产生特定抗体的杂交瘤细胞群、培养液、小鼠腹水、桃在克隆培养、(一)单克隆抗体的制备、筛选、(动物细胞培养技术)、(动物细胞融合技术)、a、21、单克隆抗体的制备过程中的第二次筛选,选择培养基淘汰未融合的b淋巴细胞、骨髓瘤细胞和BB融合、肿瘤融合的细胞第二次筛选是用细胞培养用相应抗原检测产生特定抗体的杂交瘤细胞的方法进行筛选。 因为从体内取出免疫的b淋巴细胞可以摄取很多种类,所以形成的杂交瘤细胞也很多,有必要筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞。 a、22、骨髓瘤细胞、免疫小鼠、(选择培养基)、(抗体检查)、优点:特异性强、灵敏度高、产量高
8、,a、23、作为诊断试剂,正确地识别各种抗原物质,与特异性结合,运药:制备生物导弹,治疗疾病:主要用于癌症治疗减少药量、毒副作用少的新药物,优点:准确、高效、简易、快速、a、24、动物细胞融合技术、单克隆抗体的制备技术、过程:不同动物细胞、杂交细胞、原理:,应用:主要用于制造。 制备:获得细胞和骨髓瘤细胞融合,筛选细胞动物细胞培养提取单克隆抗体,诱导剂、细胞膜流动性、单克隆抗体、b淋巴、杂交瘤、生物导弹、教室总结: a、25、1、单克隆抗体是指() a .单一骨髓瘤细胞增殖产生抗体b .单一b淋巴细胞增殖产生抗体c .单一杂交瘤细胞增殖产生高度单一抗体d .单一c 2.“生物导弹”是指: ()
9、 a .单克隆抗体b .杂交瘤细胞c .产生特定抗体的b淋巴细胞d .单克隆抗体在抗癌剂、d、练习、a、26、3 .单克隆抗体的制造过程中,诱导骨髓瘤细胞与b淋巴细胞融合后, 用特定培养基筛选杂交瘤细胞而不能在该培养基中生存增殖的细胞,在()淋巴细胞 B淋巴细胞自融合细胞小鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞b.c.d.、c、a、27、4 .单克隆抗体时, 如果在培养基中加入某种试剂,杂交瘤细胞就会被筛选出来,这个试剂的作用是a .可以选择性地抑制骨髓瘤细胞的DNA复制,b .可以阻止淋巴细胞原癌基因的活性化,c .可以抑制淋巴细胞的DNA复制,d .杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的5 .现代生物技
10、术应用中,需要检测和筛选的是(双选) () a .植物离体组织培养优良品种b .将小鼠骨髓瘤细胞和b淋巴细胞融合起来用单克隆抗体c .人皮肤细胞进行体外培养,将自体移植皮肤不足的问题d .抗虫基因导入植物细胞中, 培养具有抗虫特性的新株的植物组织培养技术、动物细胞融合技术、动物细胞培养技术、基因工程、BD、a、29、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案,包括单克隆抗体、b淋巴细胞、抗体、细胞融合、灭活病毒分泌抗体,无限增殖,初代,传代,10,抗原没有注入小鼠,因此没有产生此抗体的效果的b细胞,a,30,作业:创新设计 P3034,a 31,a,b细胞是动物细胞,根据图,a细胞,b细胞,c细胞, 如果、a细胞是骨髓瘤细胞,b细胞是淋巴细胞,那么d细胞就称为细胞,请回答d细胞是持续分裂产生大量细胞的过程。 杂交瘤,克隆,练习,a,32,(2)D细胞产生的抗体的化学本质,合成物质的地方是通过调控合成的,合成过程有两个重要步骤,和球蛋白、核糖体、基因、转录、翻译,3)D细胞产生的抗体起作用,与血清抗体相比灵敏度a,33 (4)如果a是人细胞,b是小鼠细胞,a细胞膜上的蛋白质用同位素标记,b没有标记的话,c细胞检测出所有细胞的一半都没有放射性的一半
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