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文档简介
1、a,1,培养液中酵母菌种群数的变化,a,2,培养液中酵母菌种群数的变化,目的1,利用血球计数板学习微生物计数的方法2,培养液中酵母菌种群数的变化3,样品方法的应用4,掌握影响种群数变化的因素的实验,a,3, 1、酵母菌的繁殖方式主要为: 2,酵母菌的呼吸方式为:性厌氧(可有氧呼吸和无氧呼吸),回顾:出芽生殖,3,酵母菌的培养条件要注意这些问题吗? 例如,在适当的温度下培养,调整PH值、溶解氧量的控制等。a、4、一、血球计数板、a、5、1、血球计数板的结构、血球计数板是用于计算大单细胞微生物数的装置,由比普通载玻片厚的特制玻璃板制成的玻璃板上有4条凹陷的槽,构成了三个平台。 中央的平台很宽,其中
2、有两个短横沟,各一半上刻有方格网。 在a,6,中方眼,小方眼,a,7,方格网上刻有9个大方眼,其中只有中间的一个大方眼作为计数室供给微生物计数。方格的长度和宽度分别为1mm,深度为0.1mm,即1mm1mm0.1mm,容积为0.1mm3; 大多数眼睛长度和宽度分别为2mm,深度为0.1mm,即2mm2mm0.1mm,其容积为0.4mm3、a、8,计数室通常也有两个规格。 1625型:大方眼内为16中格,每中格25小格,2516型:大方眼内为25中格,每中格16小格。 不管计数室是什么样的构造,各个格都由1625=2516=400个格构成。 a,9,2,计数,1625型:一般取四角的四个中方眼(
3、100个小方眼)的计数,2516型:一般计四角和中央的五个中方眼(80个小方眼)的细胞数。 在、a、10、3、计算中,以1mm1mm0.1mm型为例,计数室容积为0.1mm3时,每个电池的容积为1/4000 mm3。 100个小方眼细胞总数/100 40010000稀释倍数,酵母细胞个数/1mL=,80个小方眼细胞总数/80 40010000稀释倍数,a、11,例1通常用血球计数板对培养液中的酵母菌进行计数,如果计数室为1mm1mm0.1mm方格,则由400个小方眼组成。 反复计数,计算每一个小方格平均有5个酵母菌,该培养液10mL中有酵母菌总数。 2108、a、12、例2检验员将1 mL水样
4、稀释10倍后,用样品检测方法将每1 mL蓝藻数量检测过的玻璃罩放在计数室中,用吸管稍吸培养液,亲自渗透到计数室,用滤纸吸多馀的液体。 已知各计数室由2516=400个电池构成,收容液体的总体积为0.1 mm3。 现在,在图中同计数室所示的a、b、c、d、e的5个中格80个小格内观察到有n个蓝藻,上述的水试料中约有蓝藻个/mL。5n105、a、13、4、血球计数板的使用方法步骤,计数:暂时(约5min ),等待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台中央,首先在低倍镜下找到计数室的位置后,切换高倍镜进行观察,计数记录。 镜检计数室:在放入样品前,对计数板的计数室进行镜检。 如果有污垢
5、,请清洗、晾干后再计数。 加入样品:在清洁干燥的血球计数板的计数室上盖上专用的玻璃罩,用吸引管吸收稀释后的酵母菌悬浊液,使其滴到玻璃罩边缘,使培养液慢慢渗透,同时使计数室充满,防止气泡的产生,细胞悬浊液的量使计数室地板和玻璃罩之间的矩形边缘多馀的培养液可以用滤纸吸收。a、14、5、血球计数板的使用注意事项,从试管中吸引培养液进行计数之前,使试管轻微地震动几次,使酵母菌分布均匀,防止酵母凝聚沉淀,提高计数的代表性和正确性,求出的培养液中酵母菌数的误差小。 小斗中酵母菌太多,数不完时,必须稀释培养液,使酵母菌容易计数。具体方法:摇试管取1mL酵母菌培养液,用双倍无菌水稀释,稀释n倍后,用血球计数板
6、计数,得到的数值乘以稀释倍数。 优选在各胞内含有45个酵母细胞。 特别是培养后期的样品液需要稀释后计数。a、15、压在方格边界线上的酵母菌要数同一侧相邻两侧的菌数,一般来说,“数上线是数下线,数左线是数右线”的原则来处理,另一侧不数。 每个样品计数3次,取其平均值。 计数时要不时调节焦距,观察不同深度的菌体。 使用血球计数板后,用自来水清洗,为了不损伤网眼,不得用硬的东西清洗。a、16、1、研究过程、测定、定期取样、细胞数测定、2、测定方法、重量测定、湿重、干重、研究方法、二、微生物的种群数变化、在一定容积液体培养基上培养、a、17、细菌数的对数、时间、0、1、2、3、4、细菌的生长曲线、(二
7、)个体2 :对数期,3 :稳定期,4 :衰退期,a,18,如何描绘细菌生长曲线,细菌生长速度曲线,a,19,目的:长期稳定地维持微生物的生长。 优点:缩短培养周期,提高设备利用率,便于自动管理。 连续培养,a、20、例2 (08江苏卷)为了研究酵母菌种群密度的动态变化,某同学在下表所示条件下进行了a、b、c和d共4组实验,作为培养容器使用1万ml的玉米瓶,用棉塞封住,在25下静置培养,其他实验条件均根据实验结果制作的酵母菌的种群密度变化如下图表所示,请回答以下问题。 1 )图中的曲线和分别是小组的结果。 d、b、a、2 )组b和组a的实验结果不同的是组_。 培养液多,与空气接触面积小,所以氧气
8、供给少,3)D组和b组的实验结果不同的原因是d组_。 由于葡萄糖浓度低,营养物的供给少,4 )实验过程中,从静置的培养瓶中直接提取培养原液是错误的,正确的方法是和。 摇动培养液后对培养后期的样品液进行取样稀释计数,5 )实验结束后,用试管刷上洗涤剂擦血球计数板是错误的,正确的方法是浸渍和洗涤,a,21,细菌细胞数的测定,测定对象样品,同量的已知含量的红细胞,混合,混合抽样:采集一定体积的培养液,离心分离,反复清洗,采用湿润重量、干燥重量、a、23、1、调节期间、对数期菌体作为菌种,增加接种量,代谢活跃,体积增大,分裂缓慢。 适应新环境,1 )主要特征:2 )原因:3 )人工控制(缩短调整时间):a,24,个体:代谢旺盛; 分裂最快的个体形态和生理特征稳定。 群体:繁殖死亡,1 )主要特征:2 )应用:生产菌种,科研材料。2、对数期、a、25、3、稳定期、个体:出现有害代谢产物积累芽胞。 群体:活菌数最多的繁殖=死亡,1 )主要特征:2 )原因:生存条件相对恶化:营养物质消费; 有害代谢产物的蓄积PH值变化,种内斗争最激烈。 a,26,个体:细胞形态多样化组:生菌数急剧下降繁殖死亡,1 )主要特征:2 )原
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